Микроклональное размножение Ириса Низкого путем изолирования зарод (стр. 4 из 9)

Н Н С₁₀Н₄ + СН₃

Глиоксаль N

С₁₀Н₄СН₃

дидецилдиметиламмоний хлорид

Схема 1. Молекулярная структура действующих веществ Лизоформина.

Оптимальное время стерилизации 7-10 мин. Поверхностно простерилизованные и промытые семена высаживали в чашки Петри на агаризованную питательную среду Мурасиге – Скуга без добавления фитогормонов. Основная часть семян прорастала на 7 – 10-е сутки, остальные на 13 – 15 сутки с момента помещения их на питательную среду. Полученные проростки в асептических условиях расчленяли на фрагменты и переносили для роста и размножения на питательную среду Мурасиге – Скуга с добавлением 0.5 мг/л 6-БАП.

Для оптимизации состава среды на этапе микроразмножения к питательной среде, содержащей минеральные соли по Мурасиге и Скугу, добавляли в различных концентрациях 6-БАП (0.1; 0.5; 1.0 мг/л), зеатин (0.1; 0.5; 1.0 мг/л), кинетин (1.0; 2.0; 5.0 мг/л) и для вытягивания побегов гибберелловую кислоту (0.2 и 0.4 мг/л). При этом снимались следующие показатели:

1. Коэффициент размножения – количество растений, развившихся из одного экспланта;

2. Количество аномальных (витрифицированных) растений;

3. Количество листьев;

4. Высота растения.

Таблица №1. Влияние гормона зеатина на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.

1-ая повторность

гормон	Концентрация, мг/л	В начале пассажа		В конце пассажа			h2-h1	Кол-во листьев2-кол-во листьев1
h1	Кол-во листь ев1	h2	Кол-во листьев2	Коэф. размноже ния
3.2	1	3,7	2	1	0,5	1
0,5	3	2	3,3	3	1	0,3	1
1,5	1	1,9	1	1	0,4	0
3,5	1	4,2	4	1	0,7	3
1,8	2	2,8	4	3	1	2
зеатин	Среднее значение	2,6 ± 0,4	1,4 ± 0,2	3,2 ± 0,4	2,8 ± 0,6	1,4 ± 0,4	0,6 ± 0,3	1,4±0,5
1,2	1	1,5	1	1	0,3	0
3	1	3,2	5	1	0,2	4
1	0,5	1	0,9	1	1	0,4	0
3,8	1	4,7	4	1	0,9	3
4,5	1	5,4	7	1	0,9	6
Среднее значение	2,6 ±0,8	1	3,14±0,9	3,6 ±1,2	1	0,54 ±0,2	2,6±1,2
1,2	1	1,6	1	1	0,4	0
1,7	1	1,9	1	1	0,2	0
0,1	3,2	3	4	5	1	0,8	2
2	1	2,4	3	1	0,4	2
4	1	4,1	1	1	0,1	0
Среднее значение	2,4 ±0,5	1,4 ±0,4	2,8 ±0,5	2,2 ±0,8	1	0,4 ±0,1	1 ±0,3

2-ая повторность

гормон	Концентрация, мг/л	В начале пассажа		В конце пассажа			h2-h1	Кол-во листьев2-кол-во листьев1
h1	Кол-во листь ев1	h2	Кол-во листьев2	Коэф. размноже ния
3.2	1	3,6	3	1	0,4	2
0,5	1	2	3,2	2	1	2,2	0
3,5	1	3,7	1	1	0,2	0
3,4	2	4,3	3	2	0,9	1
1,8	2	2,6	4	2	0,8	2
зеатин	Среднее значение	2,6 ±0,5	1,6 ±0,2	3,4 ±0,3	2,6 ± 0,5	1,4 ± 0,2	0,9 ± 0,4	1,0 ±0,4
1,3	1	1,5	2	1	0,2	0
2,9	1	3,3	5	1	0,4	4
1	0,7	1	1,2	2	1	0,5	1
3,5	2	4,7	4	1	1,2	2
4,5	3	5,5	7	1	1	4
Среднее значение	2,6 ±0,7	1,6 ±0,4	3,24±0,8	4 ±0,9	1	0,6 ±0,2	2,2±,8
1,3	1	1,6	2	1	0,3	1
1,8	1	2,2	1	1	0,4	0
0,1	3,1	3	4	5	1	0,9	2
2,4	2	2,9	2	1	0,5	0
3,5	1	4	1	1	0,5	0
Среднее значение	2,4 ±0,5	1,6 ±0,4	2,9 ±0,4	2,2 ±0,7	1	0,5 ±0,1	0,6 ±0,4

Таблица №2 Влияние гормона кинетина на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.

1-ая повторность.

гормон	Концентрация, мг/л	В начале пассажа		В конце пассажа			h2-h1	Кол-во листьев2-кол-во листьев1
h1	Кол-во листь ев1	h2	Кол-во листьев2	Коэф. размноже ния
1,3	4	5,6	4	1	4,3	0
0,8	3	3	3	1	2,2	0
1	1,6	3	2,4	4	1	0,8	1
1,4	4	3,9	5	4	2,5	1
2,4	2	4,3	4	1	1,9	2
Кинетин	Среднее значение	1,5 ±0,3	3,2 ±0,4	3,84 ±0,5	4 ±0,6	1,6 ±0,6	2,34 ±0,6	0,8 ±0,4
2	4	10,4	5	2	8,4	1
2,3	4	7	5	2	4,7	1
2	2,5	6	3,6	6	2	1,1	0
2,2	8	5,5	9	3	3,3	1
1,8	2	4	4	3	2,2	2
Среднее значение	2,16 ±0,1	4,8 ±1	6,1 ±1,2	5,8 ±0,8	2,4 ±0,2	3,94 ±1,2	1,2 ±0,09
2,2	6	3,9	7	1	1,7	1
0,8	2	4	4	1	3,2	2
5	2,8	5	6,3	5	1	3,5	0
1	2	3	3	1	2	1
1	4	2,2	6	5	1,2	2
Среднее значение	1,56 ±0,4	3,8 ±0,8	3,9 ±0,6	5 ±0,7	1,8 ±0,8	2,32 ±0,4	1,2 ±0,8

2-ая повторность

гормон	Концентрация, мг/л	В начале пассажа		В конце пассажа			h2-h1	Кол-во листьев2-кол-во листьев1
h1	Кол-во листь ев1	h2	Кол-во листьев2	Коэф. размноже ния
2,5	2	4,5	4	2	2	2
1,5	5	3,6	6	1	2,1	1
1	1,6	2	2,5	3	2	0,9	1
0,9	4	3	5	1	2,1	1
1,5	4	5,7	4	2	4,2	0
Кинетин	Среднее значение	1,6 ±0,2	3,4 ±0,6	3,9 ±0,6	4,4 ±0,5	1,6 ±0,2	2,3 ±0,5	1±0,3
1,7	6	3,9	7	3	2,2	1
2,1	4	5,5	5	2	3,4	1
2	2,4	8	3,6	9	3	1,2	1
2,2	2	7	2	3	4,8	0
1,9	4	10	5	2	8,1	1
Среднее значение	2,06 ±0,1	4,8 ±1	6 ±1,2	5,6 ±1,2	2,6 ±0,2	3,94 ±1,2	0,8 ±0,2
2,7	4	6,1	6	1	3,4	2
0,5	1	1,2	1	2	0,7	0
5	0,8	5	3,6	5	3	2,8	0
2,1	2	3,7	4	2	1,6	2
1,1	6	4	7	1	2,9	1
Среднее значение	1,4 ±0,4	3,6 ±0,9	3,7 ±0,8	4,6 ±1	1,8 ±0,3	2,3 ±1,6	1 ±0,4

Таблица №3 Влияние гибберелловой кислоты на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.

1-ая повторность.

гормон	Концентрация, мг/л	В начале пассажа		В конце пассажа			h2-h1	Кол-во листьев2-кол-во листьев1
h1	Кол-во листь ев1	h2	Кол-во листьев2	Коэф.размноже ния
1,6	4	3,1	5	1	1,5	1
2,4	4	3,9	4	1	1,5	0
0,4	2,6	2	3	3	1	0,4	1
2,6	4	3,2	4	1	0,6	0
2,5	5	3,6	6	1	1,1	1
ГБК	Среднее значение	2,34±0,2	3,8 ±0,5	3,4 ±0,2	4,4 ±0,5	1	1,02 ±0,2	0,6 ±0,2
2,7	3	4,5	4	1	1,8	1
1,2	3	6,8	6	1	5,6	3
0,2	2	6	4	3	1	2	0
1,5	5	1,7	2	1	0,2	0
1	2	1,3	3	1	0,3	1
Среднее значение	1,7 ±0,3	3,8 ±0,5	3,6 ±1	4,8 ±0,6	1	1,8 ±1	1 ±0,5

2-ая повторность