После выпаивания в течение недели птице Лактусана происходила дальнейшая стабилизация и тенденция увеличения численности симбиотической микрофлоры (табл. 2).
Таблица 2
Микробный пейзаж пищеварительного канала семисуточных цыплят, lg КОЕ/г
| Г руппы бактерий | Контрольная группа | Опытная группа | |||
| 1 | 2 | 3 | |||
| в зобе | |||||
| Лактобактерии | 5.08 ±0.03 | 5.48±0.04 | |||
| Бифидобактерии | 2.00±0.07 | 2.00±0.05 | |||
| Бактерии группы кишечной палочки | 5.78±0.09 | 4.53±0.15 | |||
| Стафилококки | единичные | единичные | |||
| Энтерококки | 2.00±0.03 | 2.60±0.02 | |||
| Дрожжеподобные грибы | не выявлены | не выявлены | |||
| Патогенные энтеробактерии | не выявлены | не выявлены | |||
| в слепых кишках | |||||
| Лактобактерии | 7.08±0.01 | 7.51±0.04 | |||
| Бифидобактерии | 6.01±0.08 | 6.76±0.02 | |||
| Бактерии группы кишечной палочки | 4.84±0.45 | 4.81±0.07 | |||
| Стафилококки | не выявлены | не выявлены | |||
| Энтерококки | 3.06±0.03 | 2.79±0.08 | |||
| Дрожжеподобные грибы | не выявлены | не выявлены | |||
| Патогенные энтеробактерии | не выявлены | не выявлены | |||
| 1 | 2 | 3 | |||
| в прямой кишке | |||||
| Лактобактерии | 6.94 ±0.07 | 9.86 ±0.14 *** | |||
| Бифидобактерии | 7.68±0.01 | 9.00±0.05 ** | |||
| Бактерии группы кишечной палочки, в т.ч. | 7.7б±1.04 | 7.73±1.05 | |||
| гемолитически активные формы | 5.18±0.07 | не выявлены | |||
| лактозонегативные формы | 6.12±0.06 | не выявлены | |||
| Стафилококки | единичные | единичные | |||
| Энтерококки | 3.88±0.53 | 3.68±0.03 | |||
| Дрожжеподобные грибы | 2.90±0,07 | 2.00±0.01*** | |||
| Патогенные энтеробактерии | не выявлены | не выявлены | |||
Примечание: степень достоверности разницы с контролем: ** р<0.01; *** р<0.01.
Патогенных бактерий в пищеварительном тракте и трех-, и семисуточных цыплят- бройлеров не обнаружено. У семисуточных цыплят из опытной группы отмечен рост популяции лактобактерий в содержимом зоба и слепых кишок в среднем в 2.5 раза и с нарастающей колонизацией в содержимом прямой кишки в 830 раз по сравнению контрольной птицей. Бифидобактерии появлялись в содержимом зоба, а в слепых и прямой кишках их количество возрастало в среднем в 5.5 и 20 раз соответственно. Заселенность появившихся в зобу стрептококков была в 4 раза больше у опытной птицы, хотя в слепых и прямой кишках в их отношении наблюдали обратную картину. Численность энтеробактерий в сумме варьировала, но их колонизационные способности возрастали к задним отделам кишечника птиц обеих групп. Обнаруженные в микробиоценозе прямой кишки цыплят контрольной группы гемолитические и лактозонегативные формы бактерий вытеснялись симбиотической микрофлорой и их численность составляла в среднем 2.6% от общего количества бактерий группы кишечной палочки. Так как обнаружение оппортунистических форм бактерий в содержимом пищеварительного тракта цыплят, не получавших пребиотик, является прогностически неблагоприятным, это служит показателем необходимости проведения в дальнейшем соответствующих профилактических мероприятий для укрепления здоровья растущих птиц. Пребиотик лактулоза известен как естественный фактор, который способствует увеличению в кишечнике численности пробиотических бактерий, нормализующих нарушенный кишечный микробиоценоз [8] и так же, как и пробиотики [9, 10], он может стать неотъемлемым компонентом рационального кормления животных. Особо следует подчеркнуть, что вводимые орально пробиотические добавки не способны длительно сохраняться без существенного изменения их количественного и качественного характера, потому что представители автохтонной микрофлоры присутствуют в организме в виде фиксированных к определенным рецепторам микроколоний, а фиксация бактерий к поверхности слизистой оболочки пищеварительного канала имеет видовую и анатомическую специфичность. Например, выделенные из кишки одних животных, лактобактерии не способны фиксироваться к эпителиальным клеткам кишечника других животных. То есть точные данные о том, в каком возрасте, в каком качественном и количественном составе происходит их адгезия, что препятствует или, наоборот, стимулирует этот процесс до настоящего времени отсутствуют. Поэтому перед нами стояла задача выявить наиболее успешные в этом плане индигенные микроорганизмы путем стимуляции их развития пребиотиком. При исследовании мазков-отпечатков слизистой оболочки зоба, слепых отростков и прямой кишки цыплят-бройлеров трехсуточного возраста молочнокислые бактерии не были обнаружены ни у контрольной, ни у опытной птицы. После выпаивания цыплятам лактулозы в течение 7 суток нами выявлена первоначальная слабая степень фиксации лактобактерий (около 20 микробных тел в поле зрения) и бифидобактерий (около 10 микробных тел) к слизистой оболочке толстого кишечника. На свойство эпителиальных клеток слизистых оболочек первично адсорбировать микрофлору к семисуточному возрасту с последующей активизацией этого процесса еще в течение 3 недель указывают также некоторые авторы [11]. По мнению Б.А. Шендерова [8], микроорганизмы в составе биопленки в десятки- сотни раз более устойчивы к воздействию неблагоприятных факторов по сравнению с тем, когда они находятся в свободно плавающем состоянии. Исходя из этого, мы предлагаем создание перспективных пробиотиков пролонгированного действия на основе выделения штаммов молочнокислых бактерий из слизистой оболочки кишечника. Этот вывод послужил основанием для нашей дальнейшей работы по созданию пробиотика, обладающего пролонгированным и направленным действием, с рабочим названием ЛАКТО-11 для эффективного выращивания цыплят-бройлеров.
Заключение
Из представленных данных следует, что видовой и численный состав микроорганизмов, присутствующих в зобу, слепых и прямой кишках трех- и семисуточных цыплят, существенно различается. После выпаивания в этот период пребиотика с лактулозой численность лакто- и бифидобактерий увеличивалась, E. coli снижалась; не выявлялись гемолитические и лактозонегативные штаммы, присутствующие в кишечнике цыплят контрольной группы, количество грибов рода Candida уменьшалось. В то же время выпаивание раствора лактулозы способствовало первичной адгезии молочнокислых бактерий на слизистой оболочки прямой кишки птицы, что определяет возможности использования данного пребиотика для стимуляции развития собственной полезной кишечной микрофлоры, вытеснения из микробиоценоза нежелательных видов с первой недели жизни цыплят- бройлеров, а также создания на их основе пробиотика пролонгированного действия.
Список литературы
Субботин В.В. Новый пробиотический препарат бифацидобактерин (лактобифидол) и его профилактическая эффективность при откорме бройлерных цыплят // Новые фармакологические средства в ветеринарии:Материалы10-й Международной межвузовской научно-практической конференции. - СПб.: ГАВМ, 1998. - С. 31.
Субботин В.В. Кишечная микрофлора бройлерных цыплят в норме и при клинически выраженной диарее // Новые фармакологические средства в ветеринарии:Материалы10-й
Международной межвузовской научно-практической конференции. - СПб.: ГАВМ, 1998. - С. 212.
Олива Т.В. К вопросу микробной экологии кишечника бройлеров // Доклады Московского общества испытателей природы. - Т. 39. - Биотехнология - охране окружающей среды (под ред. проф. Садчикова А.П., д.б.н. Котелевцева С.В.): Материалы IV Международной научной конференции. - М.: Графикон, 2006. - С. 132-135.
Скворцова Л.Н. Использование пребиотиков при выращивании цыплят-бройлеров // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2010. - №3. - С. 38-40.
Скворцова Л., Беляев А. Влияние МЭК Вильзим F на развитие микробиоценоза и продуктивные качества цыплят / / Птицеводство. - 2010. - №4. - С. 37-38.
Микробиологическая диагностика дисбактериозов: Методические рекомендации. - Киев. - - 27 с.
Плотичер С.М. Лабораторные диагностические исследования.- Киев: Здоровье, 1965. - С. 7-30.
Шендеров В.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание // Т. 1: Микрофлора человека и животных и ее функции. - М.: Грантъ, 1998. - 288 с.
Сидоров М.А., Субботин В.В., Данилевская Н.В. Нормальная микрофлора животных и ее коррекция пробиотиками // Ветеринария. - 2006. - № 11. - С. 17-22.
Панин А.Н., Малик Н.И. Пробиотики - неотъемлемый компонент рациона питания животных // Ветеринария. - 2006. - № 7. - С. 3-6.
Защитные механизмы птицы в постэмбриональном развитии / Б. Бессарабов, Л. Клетикова, О.Копоть, С. Алексеева / / Птицеводство. - 2009. - № 10. - С. 46-47.