Для достижения поставленной цели предполагается решить следующие задачи:
1)изучить распространение кокцидиоза и респираторного микоплазмоза как моноболезней и в виде ассоциативного течения;
2)установить возрастную и годовую динамику ассоциативного течения кокцидиоз-респираторный микоплазмоз;
3)изучить клинические и патоморфологические признаки, морфологические и биохимические показатели крови больной птицы и провести систематизацию различных клинико-морфологических форм ассоциативно протекающего кокцидиоза и респираторного микоплазмоза.
4)изучитьчувствительность полевых культур М. gallisepticum к антибактериальным препаратам in vitro методом дисков;
5)изучить различные схемы деконтаминации яиц от микоплазм.;
на разных половозрастных группах
6) изучить различные схемы профилактики и лечения птицы при ассоциативном кокцидиозе и респираторном микоплазмозе.
7)разработать и внедрить в производство систему лечебно-профилактических мероприятий при ассоциации кокцидиоз - респираторный микоплазмоз кур.
Материалы и методы исследований
Исследования будут проводиться в ГУРО «Областная ветеринарная лаборатория», лаборатории паразитологии с сектором синтеза ГНУ СКЗНИВИ, птицеводческих хозяйствах разных форм собственности Ростовской области.
I этап – изучение распространения, сезонной и возрастной динамики респираторного микоплазмоза и кокцидиоза цыплят-бройлеров как моноболезней, так и в ассоциации друг с другом будет проводиться на базе птицеводческих хозяйств разных форм собственности Ростовской области.
Объекты исследований: молодняк в возрасте до 50 дней, взрослое маточное поголовье куры и петухи, трупы павших птиц разных возрастных групп, пробы фекалий, образцы почвы, подстилки с мест содержания животных.
Диагноз на кокцидиоз будет ставиться по картине вскрытия, микроскопии мазков-соскобов со слизистой оболочки пораженных отделов кишечника. Видовую идентификацию эймерий будем проводить по морфологическим особенностям и срокам споруляции ооцист (Г.А. Котельников, 1974; М.В. Крылов, О.И. Бондаренко, 1979). Диагноз на респираторный микоплазмоз будет ставиться по комплексу эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных и подкрепляться лабораторными бактериологическими и серологическими исследованиями.
Для достоверности каждого вывода будет проведено не менее двадцати однотипных исследований.
Ожидаемые результаты: Будет установлена возрастная и сезонная заболеваемость моноболезнями и ассоциативными вариантами, будет прослежена взаимосвязь между инфицированностью и инвазированностью птиц маточного стада и заболеваемостью молодняка. Будет определено ведущее звено в ассоциации.
Практические предложения: в каждом конкретном случае, применительно к создавшейся эпизоотической ситуации после определения чувствительности микоплазм к ряду препаратов будет разработана и предложена комплексная система лечебно-профилактических мероприятий в отношении ассоциативного течения респираторного микоплазмоза и кокцидиоза.
II этап – Изучение и систематизация различных клинико-морфологических форм ассоциативно протекающего кокцидиоза и респираторного микоплазмоза.
Изучение клинических, патоморфологических и лабораторных признаков ассоциативно протекающего респираторного микоплазмоза и кокцидиоза будет проводиться на базе птицеводческих хозяйств разных форм собственности Ростовской области общепринятыми методами клинических, патоморфологических и лабораторных исследований.
Объекты исследований: молодняк в возрасте до 50 дней, взрослое маточное поголовье куры и петухи, трупы павших птиц разных возрастных групп. Для достоверности каждого вывода будет проведено не менее двадцати однотипных исследований.
Ожидаемые результаты: методом клинической диспансеризации будет изучена клиническая картина различных клинико-морфологических форм ассоциативно протекающего респираторного микоплазмоза и кокцидиоза, методом патологоанатомического вскрытия будут изучены и описаны особенности патоморфологии ассоциативного течения респираторного микоплазмоза и кокцидиоза, будут выявлены основные, сопутствующие, фоновые компоненты ассоциаций. Будут проведены гистологические исследования органов и тканей больных птиц, морфологические и биохимические исследования крови.
На основании проведённого комплексного исследований будет выстроен алгоритм постановки нозологического диагноза.
III этап – изучитьчувствительность полевых культур М. gallisepticum к антибактериальным препаратам in vitro методом дисков и серийных разведений.
Для подбора наиболее эффективных препаратов для профилактики и лечения при ассоциативном респираторном микоплазмозмозе будет проведена работа по определению чувствительности полевых культур М. gallisepticum к антибактериальным препаратам in vitro методом дисков. При диффузионном методе будут использованы стандартные диски с фуразолидоном, нетилмецином, бензилпенициллином, тетрациклином и стрептомицином, гентамицином, энроксилом, энрофлоксацином, ципрофлоксацином, тиамулином, амоксициллином, тилозина тартратом, фармазином. В качестве питательной среды будем применять мясо-пептонный агар в чашках Петри. Посевным материалом будут служить 18-20-часовые бульонные культуры М. gallisepticum. На поверхность агара будем наливать 1 мл бульонной культуры, равномерно распределим ее, после чего приоткрытые чашки подсушим при комнатной температуре в течение 15 минут и разложим диски. После 18-часовой инкубации в термостате при Т 37° С, учтем диаметр зоны задержки роста.
Для достоверности каждого вывода будет проведено не менее двадцати однотипных исследований.
Ожидаемые результаты: будут определены наиболее эффективные по зоне задержки роста препараты.
IV этап – разработка и испытание комплексной системы лечебно-профилактических мероприятий в отношении ассоциации кокцидиоз-респираторный микоплазмоз будет проведена в следующих направлениях:
1.Изучение различных схем деконтаминации яиц от микоплазм.
2. На разных половозрастных группах будут изучены различные схемы профилактики и лечения птицы при ассоциативном респираторном микоплазмозе с кокцидиозом.
Объекты исследований: яйцо, молодняк в возрасте до 50 дней, взрослое маточное поголовье куры и петухи. Для достоверности каждого вывода будет проведено не менее двадцати однотипных исследований.
Для изучения различных схем деконтаминации яиц от микоплазм будут сформированы 4 опытных и 1 контрольная группы, по 20 яиц в каждой. Обработку яйца будем проводить согласно схеме опыта (табл. 1). Яйцо на инкубацию будем брать от кур-несушек 240-250 дней с положительными результатами серологических и бактериологических исследований. Сбор яйца будем проводить в течение 3 дней. Яйцо будем инкубировать в лабораторном инкубаторе ИЛУ-Ф-03. Биологический контроль будем проводить на 7-е, 11-е и 18-е сутки инкубации. Полученный молодняк будем исследовать с применением серологических и бактериологических методов диагностики в суточном и 7 дневном возрасте на наличие возбудителя респираторного микоплазмоза.
Табл. 1. Изучение различных схем деконтаминации яиц от микоплазм.
| Группа | Схема деконтаминации | Кол-во яиц |
| Контрольная | Без обработки | 20 |
| Опытная 1 | Погружение яиц, нагретых до 38° С, в раствор фармазина (10 мг/кг массы) Т + 5° С на 15 минут | 20 |
| Опытная 2 | Обработка 1% раствором Виркона-С, аэрозольно (30 мин.) | 20 |
| Опытная 3 | Обработка парами формальдегида (20 минут) | 20 |
Для изучения различных схем лечения респираторного микоплазмоза в ассоциации с кокцидиозом будут сформированы 4 опытные и 1 контрольная группы по 20 голов кур-несушек и цыплят в возрасте 20 дней в каждой, согласно схеме опыта (табл. 2). В опыте будем использовать птицу, больную респираторным микоплазмозом и кокцидиозом. Подбор птиц в группы будет осуществляться по принципу пар-аналогов численностью согласно общепринятой методике экспериментальных исследований.
Диагноз будем устанавливать основании эпизоотических, клинических, серологических и бактериологических и копрологических исследований.
Контроль эффективности применяемых схем лечения будем осуществлять с использованием клинического, патологоанатомического, серологического и бактериологического и копрологического методов диагностики.
Табл. 2. Изучение различных схем лечения при ассоциативном течении респираторного микоплазмоза и кокцидиоза кур-несушек и петухов.
| Группа | Кол-во кур/, цыплят гол. | Схема лечения | |
| препарат | концентрация, мг/кг массы | ||
| Контрольная | 20/20 | Лечение не проводили | |
| Опытная 1 | 20/20 | Энрофлоксацин (5 дней подряд) | 10 |
| Опытная 2 | 20/20 | Фармазин (5 дней подряд) | 50 |
| Опытная 3 | 20/20 | Тиамулин (5 дней подряд) | 50 |
| Опытная 4 | 20/20 | Нифулин (5 дней подряд) | 50 |
Серологическое исследование сыворотки крови будет проводиться в сывороточно-капельной реакции агглютинации (СКРА) с цветным антигеном М. gallisepticum (ВНИИЗЖ) на наличие антител к микоплазмозу и иммуно-ферментным методом (набор фирмы Bio Check).
Материалом для бактериологического исследования при жизни будут служить соскобы со слизистой оболочки гортани, посмертно — кусочки легкого и стенки воздухоносных мешков, головной мозг, семенники. Соскобы будем брать при помощи стерильного хирургического полого зонда на «транспортную среду». С органов посев будет осуществляться пастеровскими пипетками по общепринятой методике. Исследуемый материал будет подвергнут исследованию на выявление морфологических, культуральных и биохимических свойств возбудителя.