2. Фильтровальная бумага.
3. Секундомер.
Ход исследования:
Иглой Франка делают укол глубиной 3 мм в мякоть пальца или мочку уха. Самопроизвольно выступающая кровь снимается каждые 15-30 секунд фильтровальной бумагой. Через 1-3 минуты снятая фильтровальной бумагой капля становится маленькой, затем бумага совсем не окрашивается. Промежуток времени от момента появления первой капли крови до прекращения окрашивания фильтровальной бумаги обозначается как продолжительность кровотечения.
Оценка полученных данных:
Нормальная продолжительность кровотечения 2 - 4 минуты.
Определение времени свертываемости крови по способу Бюркера
Оборудование и реактивы:
1. Часовое стекло.
2. Чашка Петри с влажной фильтровальной бумагой на дне.
3. Тонкая стеклянная палочка или игла.
4. Игла Франка или скарификатор.
5. Дистиллированная вода.
6. Секундомер
Ход исследования:
На часовое стекло наносят одну каплю прокипяченной дистиллированной воды. Иглой Франка делают укол в мякоть пальца, первую каплю снимают, а вторую наносят на часовое стекло, помешивают тонкой стеклянной палочкой. Время взятия крови отмечают по секундомеру. Часовое стекло помещают в чашку Петри. Лучше всего производить исследование при температуре 25'C. Каждые полминуты тонкой стеклянной палочкой или иглой прикасаются к капле крови от центра к периферии до тех пор, пока за палочкой не потянутся первые ниточки фибрина, после чего отмечают время появления их.
Оценка полученных данных:
У здоровых людей время свертываемости по методу Бюркера равно 5-6 минутам.
Ярославская Государственная Медицинская Академия
Кафедра пропедевтики внутренних болезней педиатрического факультета
Учебно-методическое пособие для студентов III курса педиатрического факультета
Лабораторные методы диагностики
( часть вторая)
ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ
Ярославль,1997
Цель: овладение студентами методикой лабораторного исследования мочи и клинической оценкой полученных данных.
Порядок исследования
1. Забор материала.
2. Исследование физических свойств.
3. Исследование химических свойств.
4. Микроскопическое исследование осадка.
5. Бактериологическое исследование.
Забор материала
Лабораторное исследование мочи должно производиться у всех больных независимо от характера их заболевания. Для клинического анализа необходимо 100 - 200 мл первой утренней мочи, которую собирают в чистую сухую стеклянную посуду. Перед забором мочи необходим туалет наружных половых органов или взятие мочи катетером. На посуду с мочой наклеивают этикетку с указанием фамилии и инициалов больного, номера палаты и отделения, диагноза и характера исследования (общий анализ, исследование на сахар
и ацетон и т. д.). Количественное определение составных частей мочи (например, сахара при сахарном диабете) производят из суточного количества мочи. Мочу собирают за сутки в один сосуд, измерив общее количество, направляют на исследование 100 - 150 мл мочи.
Для бактериологического исследования достаточно 10 мл мочи, собранной в стерильную пробирку, стерильным катетером.
Для выявлении лейкоцитурии (метод Каковского - Аддиса) мочу собирают за 10 - 12 часов, т. е. с 21 часа до 9 часов. Собранную мочу тщательно размешивают и измеряют ее количество. На исследование направляют количество, выделенное за 12 минут, которое определяют по формуле:
Y
X=----------------- ,
t*5
где:
Х - количество мочи за 12 минут,
Y - объем мочи, измеренной в мл,
t - время, за которое собрана моча, 1/5 часа - 12 минут.
Проба по 3имницкому. При обычном питьевом режимемочу собирают в течение суток за каждые 3 часа, первая порциямочи в 6 часов утра выливается. На каждую бутылочку наклеивается этикетка с указанием фамилии, палаты, номера порции и
промежутка времени, за который собрана порция (6 ч.- 9 ч., 9 ч.- 12 ч., и т. д.). Все 8 порций направляют на исследование.
Исследование физических свойств
Исследование физических свойств мочи включает в себя определение количества, цвета, прозрачности, запаха и удельного весамочи. Количество выделяемой за сутки мочи (диурез) в норме составляет в среднем 50 - 80% выпитой жидкости и колеблется от
1000 до 2000 мл. Измерение производят с помощью мерной посуды по нижнему мениску (уровню жидкости). Цвет мочи в норме колеблется от светло-желтого до насыщенного желтого и обусловлен содержащимися в ней пигментами: урохромом А, урохромом Б, уроэтрином, урорезином и др. Определяют цвет простым осмотром, после предварительного отстаивания в проходящем свете на белом фоне.3апах свежевыпущенной мочи здорового человека своеобразный , слабый ароматический, который, как считают,
зависит от содержания в ней минимальных количеств летучих эфирных кислот. При длительном стоянии, в результате щелочного брожения, моча приобретает резкий неприятный аммиачный запах. Запах гниющих яблок при наличии в моче ацетоновых тел. Прием некоторых пищевых продуктов и лекарств придают моче свой запах.
Прозрачность (мутность) . Нормальная свежевыпущенная моча прозрачна. Мутность может быть вызвана: солями, клеточными элементами, бактериями.
Посуда, оборудование и реактивы:
- цилиндр на 10 - 15 мл.
- химические пробирки.
- горелка.
- 10% раствор уксусной кислоты, раствор щелочи ( NaОН ).
Ход исследования:
В цилиндр емкостью 10 - 15 мл наливают мочу, отстаивают и через слой мочи читают печатный текст. Степень мутности обозначают следующим образом: прозрачная
моча - печатный текст читается легко; слабая степень мутности - легко читается средний и крупный печатный текст; умеренная - буквы различаются нечетко; большая - буквы неразличимы. Причину помутнения определяют следующим образом. В пробирку наливают 2-3 мл мочи, нагревают. Исчезновение помутнения указывает на наличие уратов; усиление - на наличие фосфатов. Последние растворяются после добавления 2-3 капель 10% уксусной кислоты, Исчезновение помутнения от добавления нескольких капель щелочи говорит о присутствии кристаллов мочевой кислоты. Удельный вес зависит от количества растворенных в моче плотных веществ. В норме удельный вес мочи 1012 - 1025.
Посуда и оборудование:
- цилиндр емкостью в 50 - 100 мл,
- урометр с делениями от 1000 до 1050 ...
Ход исследования:
Мочу наливают в цилиндр, избегая образование пены. Если пена образуется, то ее следует удалить фильтровальной бумагой. Осторожно погружают урометр в жидкость; верхняя часть урометра должна быть сухой и урометр не должен касаться стенок цилиндра. Когда урометр перестал погружаться, его слегка толкают сверху, иначе он опускается меньше, чем следует. После прекращения колебаний по нижнему мениску жидкости по шкале урометра отмечают удельный вес. При малом количестве мочи, ее следует развести дистиллированной водой (1 мл мочи +1 мл воды - разведение в 2 раза, 1 мл мочи +2 мл воды - в 3 раза и т.д.) . Определив удельный вес, две последние цифры удельного веса умножают на степень разведения. Необходимо при определении удельного веса учитывать температуру окружающей среды, так как урометры выверены при температуре 15'С. Измеряя удельный вес, следует вносить поправку: на каждые 3' выше 15' необходимо прибавить 0,001, и на каждые 3' ниже 15' вычитать 0,001.
Реакция мочи в норме при смешанной пище кислая или слабокислая. Ориентировочный способ определения реакции мочи при помощи синей и красной лакмусовой бумажек. В кислой моче синяя лакмусовая бумага краснеет, в щелочной - красная синеет; в нейтральной обе бумажки не меняют своего цвета.
Исследование химических свойств:
Прежде чем приступить к химическому исследованию, необходимо профильтровать мочу.
Химическое исследование включает в себя определение в моче белка, сахара, ацетона и ацетоуксусной кислоты, желчных пигментов и уробилина.
Определение белка:
Качественные реакции на белок основаны на его осаждении реактивами или нагреванием. При наличии белка в моче образуется большая или меньшая степень помутнения. Условия определения белка: 1) - моча должна иметь кислую реакцию. Щелочную мочу подкисляют, добавляя 2 - 3 капли уксусной кислоты. 2) - моча должна быть прозрачной. Помутнение
устраняется фильтрованием через бумажный фильтр. Качественную пробу следует проводить в двух пробирках, од на - контроль.
0ценка: В норме белка в моче не содержится.
Качественные пробы
Проба с сульфосалициловой кислотой
Реактивы:
- 20% раствор сульфосалициловой кислоты.
Ход исследования:
В пробирку наливают 4 - 5 мл мочи и добавляют 8 - 10 капель реактива. При наличии белка в моче, в зависимости от количества его, может быть помутнение или выпадает хлопьевидный осадок. Проба считается одной из самых чувствительных, положительна при наличии белка в моче в количестве - 0,015%.
Проба с уксусной кислотой
Реактивы:
- 10% раствор уксусной кислоты.
Ход исследования:
В пробирку наливают 8 - 10 мл мочи, нагревают верхний слой мочи до кипения и прибавляют 8 - 10 капель уксусной кислоты. При наличии белка в нагретой части мочи образуется помутнение или хлопья свернувшегося белка.
Количественное определение белка. (способ Робертса - Стольникова):
Принцип метода: Если при наслаивании мочи на азотную кислоту на границе двух жидкостей образуется тонкое белое кольцо между 2-й и 3-й минутами, то в исследуемой моче содержится 0,033%o белка.
Реактивы:
- концентрированная азотная кислота,
Ход исследования:
В пробирку наливают 1 - 3 мл азотной кислоты и осторожно по стенке наслаивают такое же количество мочи. Замечают время после наслаивания. Если кольцо на границе жидкостей (рассматривать его следует на черном фоне) образуется сразу или раньше 2-х минут после наслаивания, мочу необходимо развести водой. После чего производят повторное определение белка в разведенной моче. Разведение производят до тех пор,