Лейкоцитоспермия в диагностике бактериальных инфекций (стр. 2 из 2)

В литературе встречаются результаты аналогичного исследования спермы, в котором лейкоцитоспермия (по критериям ВОЗ) наблюдалась в 10-20% [15]. В нашем исследовании содержала лейкоциты значительно большая часть образцов (43,4% (62/143)). В нашей лаборатории не использовали пероксидазную реакцию, поэтому различие можно объяснить неправильным определением лейкоцитов. Кроме того, в литературе термин «лейкоцитоспермия» часто применяют для концентрации лейкоцитов >1 млн/мл, поэтому такие данные могут быть занижены. Для сравнения, лейкоцитоспермия по критериям ВОЗ наблюдалась в 16,1% (23/143) образцов, что вполне соотносится с данными литературы. Однако в группе II патогенные бактерии обнаруживались в 54,8% (34/62) образцов, а в группе I — в 48,2% (39/81) образцов.

Подобные результаты убеждают в том, что выявить корреляцию между лейкоцитоспермией и бактериоспермией крайне трудно. Вероятнее всего, лейкоцитоспермия имеет ограниченную диагностическую ценность для выявления не только бактериоспермии, но и бактериальных инфекций. Ни у одного из 143 мужчин на момент обследования не было признаков инфекций. Следовательно, более актуально обсуждать выявление бактериоспермии, а не инфекций. Согласно рекомендациям ВОЗ, участников исследования просили мыть руки и пенис водой с мылом, но не обрабатывать кожу антисептиками. Несмотря на то, что такая подготовка предотвращает ложноположительные результаты, обычно ее не проводят. Основная цель исследования состояла в том, чтобы оценить самые распространенные методы анализа, строго следуя рекомендациям ВОЗ.

Во всех группах, выделенных в зависимости от концентрации лейкоцитов, более 50% образцов содержали бактерии. Чувствительность уменьшалась от 0,47 в группе с минимальной концентрацией лейкоцитов (>0,25 млн/мл) до 0,16 в группе с максимальной концентрацией (>1 млн/мл). В этих же группах специфичность повышалась от 0,60 до 0,84. PPV и NPV в различных группах значимо не менялись (0,55 и 0,52; 0,52 и 0,49). LR не был решающим параметром (менялся в диапазоне от 1,16 до 1,04). Тем не менее, наибольшее значение LR принимало в группе с концентрацией лейкоцитов >0,5 млн/мл. PPV и NPV в этой группе были также наибольшими.

Из этих данных можно сделать вывод о том, что лейкоцитоспермия не может служить для определения бактериоспермии. Такой результат согласуется с заключениями Punab и сотр. [12]. Однако в этом исследовании под лейкоцитами понимали только лимфоциты, тогда как к лейкоцитам также относятся макрофаги и гранулоциты. По данным этого исследования, в группе образцов с лейкоцитоспермией по критериям ВОЗ чувствительность составила 25% (в нашем исследовании с учетом всех типов лейкоцитов — 16%), а оптимальное соотношение чувствительность/специфичность было при концентрации лейкоцитов >0,2 млн/мл (чувствительность 45% и специфичность 69%). Мы получили схожие результаты в группе с концентрацией лейкоцитов 0,25 млн/мл — чувствительность 47%, специфичность 60%. LR в этой группе составило 1,16, а в группе, выделенной по критериям ВОЗ, — 1,04.

Помимо этого, результаты, полученные для лейкоцитоспермии как маркера бактериоспермии, согласуются с исследованиями, в которых применяли пероксидазную реакцию [8,9]. Trum и сотр. [8] обнаружили у 39% мужчин бактериальные инфекции и у 11% — вирусные. Площадь под кривой receiver operating составила 0,55 и 0,56 соответственно, и был сделан вывод о низкой диагностической ценности лейкоцитоспермии для выявления бактериальных инфекций. Площадь под кривой в нашем исследовании составила 0,53 (95% доверительный интервал 0,44-0,63) (См. Рис.1), что сравнимо с результатами более быстрого подсчета лейкоцитов. Rodin и сотр. [9] использовали различные методы окраски лейкоцитов (по Граму, пероксидазную, крезоловым фиолетовым - метиленовым синим) и также не получили корреляции между наличием лейкоцитов и бактерий. Следовательно, можно сделать вывод о том, что лейкоцитоспермия имеет небольшое значение в выявлении бактериоспермии и дефектов спермы.

Ось x — специфичность, ось y — чувствительность

Рис. 1 – Кривая receiver operating для разных концентраций лейкоцитов и бактериоспермии. Площадь под кривой 0,53 (95% доверительный интервал 0,44-0,63), См. данные в Таблице 3.

Заключение

В данном исследовании лейкоциты были обнаружены в 43,4% (62 из 143) образцов спермы мужчин, которые обратились в урологическую клинику для диагностики бесплодия, а патогенные бактерии — в 51,1% (73/143) из них. Отношение чувствительность/специфичность для определения бактериоспермии при концентрации лейкоцитов >1 млн/мл (лейкоцитоспермия по критериям ВОЗ) было равно 0,16/0,84. Наибольшее отношение чувствительность/специфичность наблюдалось в группе с концентрацией лейкоцитов >0,5 млн/мл, LR в этой же группе составил 1,29. Тем не менее, подсчет лейкоцитов в сперме не имеет предсказательной способности для бактериоспермии. Это заключение согласуется с данными литературы о том, что подсчет лейкоцитов без использования специальной окраски, несмотря на простоту выполнения, имеет небольшую диагностическую ценность.

Списоклитературы

[1] Wolff H, Politch JA, Martinez A, Haimovici F, Hill JA, Anderson DJ. Leukocytospermia is associated with poor semen quality. Fertil Steril 1990; 53:528-36.

[2] Wolff H. The biologic significance of white blood cells in semen. Fertil Steril 1995;63:1143-57.

[3] Tomlinson MJ, Barratt CL, Cooke ID. Prospective study of leukocytes and leukocyte subpopulations in semen suggests they are not a cause of male infertility. Fertil Steril 1993;60:1069-75.

[4] Kiessling AA, Lamparelli N, Yin HZ, Seibel MM, Eyre RC. Semen leukocytes: friends or foes? Fertil Steril 1995;64:196-8.

[5] Alvarez JG, Sharma RK, Ollero M, Saleh RA, Lopez MC, Thomas AJ, et al. Increased DNA damage in sperm from leukocytospermic semen samples as determined by the sperm chromatin structure assay. Fertil Steril 2002; 78:319-29.

[6] Erenpreiss J, Hlevicka S, Zalkalns J, Erenpreisa J. Effect of leukocytospermia on sperm DNA integrity: a negative effect in abnormal semen samples. J Androl 2002; 23:717-23.

[7] Saleh RA, Agarwal A, Kandirali E, Sharma RK, Thomas AJ, Nada EA, et al. Leukocytospermia is associated with increased reactive oygen species production by human spermatozoa. Fertil Steril 2002;78:1215-24.

[8] Trum JW, Mol BW, Pannekoek Y, Spanjaard L, Wetheim P, Bleker OP, et al. Value of detecting leukocytospermia in the diagnosis of genital tract infection in subfertile men. Fertil Steril 1998;70:315-9.

[9] Rodin DM, Larone D, Goldstein M. Relationship between semen cultures, leukospermia, and semen analysis in men undergoing fertility evaluation. Fertil Steril 2003;79:1555-8.

[10] Cottell E, Harrison RF, McCaffrey M, Wealsh T, Mallon E, Barry-Kinsella C. Are seminal fluid microorganisms of significance or merely contaminants? Fertil Steril 2000;74:465-70.

[11] Kim FY, Goldstein M. Antibacterial skin preparation decreases the incidence of false-positive semen culture results. J Urol 1999;161:819-21.

[12] Punab M, Loivukene K, Kermes K, Mandar R. The limit of leukocytospermia from the microbiological viewpoint. Andrologia 2003;35:271-8.

[13] Keel B. How reliable are results from the semen analysis? Fertil Steril 2004;82:41–4.

[14] World Health Organization. WHO Laboratory Manual for the Examination of Human Semen and Sperm-Cervical Mucus Interaction. 4th ed. Cambridge: Cambridge University Press; 1999.

[15] Aziz N, Agarwal A, Lewis-Jones I, Sharma RK, Thomas AJ. Novel associations between specific sperm morphological defects and leukocytospermia. Fertil Steril 2004;82:621-7.

Комментарий Wolfgang Weidner, Гессен, Германия

ВОЗ [1] выдвигает предложение использовать повышенное содержание пероксидаза-положительных лейкоцитов в сперме и высевание значительного количества патогенных бактерий в качестве признаков инфекций придаточных желез у мужчин. В 1995 году [2] эксперты пришли к выводу о том, что обычные методы окраски не позволяют достоверно выявить лейкоциты в сперме. Более того, хотя преоксидазный метод применим для подсчета гранулоцитов, золотой стандарт определения всех типов лейкоцитов — это иммуноцитологические методы [2]. Недавно были получены данные о том, что пероксидазный метод может оказаться неточным из-за экзоцитоза содержимого гранулоцитов в ходе воспаления [3].

Даже не учитывая методику анализа, можно сказать, что лейкоцитоспермия может возникнуть спонтанно [4], в результате фагоцитарной активности [5] и коррелирует с процессом апоптоза [6] в сперме. Кроме того, лейкоцитоспермия может быть связана с выделением лейкоцитов простатой, которая формирует основной объем эякулята [7]. Из этих данных следует, что содержание лейкоцитов в сперме зависит от множества различных и не вполне выясненных факторов.

Эти факторы должны учитываться при исследовании корреляции между лейкоцитоспермией и бактериоспермией. При концентрации лейкоцитов >1 млн/мл [6] чувствительность для определения значимой бактериоспермии в соответствии с кривыми receiver operating characteristic крайне низка [8]. С учетом того, что можно значительно снизить количество ложноположительных результатов путем простой подготовки кожи [9], обращают на себя внимание данные более позднего исследования [10], в котором оценивали содержание бактерий в первой порции мочи, средней порции мочи, сперме, повышенную концентрацию лейкоцитов в сперме и наступление беременности. Между содержанием бактерий в сперме, лейкоцитоспермией и наступлением беременности корреляции обнаружено не было.

В целом, на данный момент во всех исследованиях подтверждается заключение авторов (Lackner и сотр.) о том, что подсчет лейкоцитов без использования специальных методов не может быть использован для диагностики бактериоспермии.

[1] Rowe PJ, Comhaire FH, Hargreave TB, Mahmoud AMA. WHO manual for the investigation, diagnosis and manage-ment of the infertile men. Cambridge University Press; 2000.

[2] Wolff H. The biologic significance of white blood cells in semen. Fertil Steril 1995;63:1143-57.

[3] Villegas J, Schulz M, Vallejos V, Henkel R, Miska W, Sanchez R. Indirect immunofluorescence using monoclonal antibodies for the detection of leukocytospermia: comparison with peroxidase staining. Andrologia 2002;34:69-73.

[4] Yanushpolsky EH, Politch JA, Hill JA, Anderson DG. Antibiotic therapy and leukocytospermia: a prospective, ran-domzided, controlled study. Fertil Steril 1995;63:142-7.

[5] Tomlinson MJ, White A, Barratt CLR. Bolton AE, Cooke ID. The removal of morphologically abnormal sperm forms by phagocytes: a positive role for seminal leukocytes. Human Reproduction 1992;7:517-22.

[6] Ricci G, Perticarari S, Fragonas E, Giolo E, Canova S, Pazzo-bon C, et al. Apoptosis in human sperm: its correlation with semen quality and the presence of leukocytes. Human Reproduction 2002;17:2665-72.

[7] Ludwig M, Vidal A, Diemer Th, Pabst W, Failing K, Weidner W. Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome: seminal markers of inflammation. World J Urol 2003; 21:82-5.

[8] Punab M, Loivukene K, Kermes K, Mandar R. The limit of leukocytospermia from the microbiological viewpoint. Andrologia 2003;35:271-8.

[9] Kim FY, Goldstein M. Antibacterial skin preparation decreases the incidence of false-positive semen culture results. J Urol 1999;161:819-21.

[10] Cottell E, Harrison RF, McCaffrey M, Walsh T, Mallon E, Barry-Kinsella С Are seminal fluid microorganisms of significance or merely contaminants. Fertil Steril 2000; 74:465-70.