Жиры и масла в герметично укупоренных сосудах стерилизуют при 120°С в течение 2 часов.
Этим методом стерилизуют также изделия из стекла, фарфора, металла, перевязочные и вспомогательные материалы (вата, марля, бинты, фильтровальная бумага, пергамент, спецодежда). Время выдержки составляет при 120°С 45 минут, при 132°С – 20 минут.
Воздушный метод стерилизации осуществляют сухим горячим воздухом в воздушных стерилизаторах при температуре 160, 180 или 200°С и применяют для термостойких порошкообразных веществ (натрия хлорида, цинка окиси, талька, белой глины). Минимальное время стерилизационной выдержки зависит от массы образца и температуры стерилизации. Изделия из стекла, металла, силиконовой резины, фарфора, установки для стерилизующего фильтрования с фильтрами и приемниками фильтрата стерилизуют при 180°С в течение 60 минут или при 160°С в течение 2, 5 часов. Допускается использование более высоких температур нагрева при соответствующем уменьшении времени выдержки, обеспечивающих стерильность и сохранность объекта, но, как и в предыдущем случае режим стерилизации должен быть указан и обоснован в нормативно-технической документации.
Эффективность этого метода зависит от температуры, времени, степени теплопроводности стерилизуемых объектов и правильности расположения их внутри стерилизационной камеры для обеспечения свободной циркуляции горячего воздуха.
Для газовой стерилизации используют окись этилены или ее смесь с различными флегматизаторами (бромистым метилом, двуокисью углерода), стерилизацию проводят в газовых стерилизаторах или микроанаэростатах. Газы обладают хорошей проникающей и низкой повреждающей способностью по отношению к объектам, однако практическое применение этого метода затруднительно, так как сроки экспозиции сравнительно большие, пластические массы адсорбируют газы, дегазация в вентилируемом помещении продолжительна.
Контроль параметров и эффективности стерилизации осуществляют с помощью контрольно-измерительных приборов, химических (например, использование вещества, изменяющего свой цвет или физическое состояние при определенных параметрах стерилизации) и биологических (проводят с помощью биотестов – объектов из установленного материала, обсемененных тест-микроорганизмами) методов.
Стерилизация растворами осуществляется перекисью водорода и надкислотами в закрытых емкостях из стекла, пластмассы или емкостях, покрытых неповрежденной эмалью, при полном погружении изделия в раствор на время стерилизационной выдержки, после чего изделие должно быть промыто стерильной водой в асептических условиях. Применяют данный метод для изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозийно-стойких металлов. Эффективность метода зависит от концентрации активного действующего вещества, времени стерилизационной выдержки и температуры стерилизующего раствора.
При стерилизации 6% раствором перекиси водорода температура стерилизационного раствора должна быть не менее 18С, время стерилизационной выдержки – 6 ч, при температуре 50°С – 3 ч. При стерилизации 1% раствором дезоксона-1 (по надуксусной кислоте) температура стерилизующего раствора должна быть не менее 18°С, время стерилизационной выдержки – 45 минут. Допускается использование других стерилизующих веществ, обеспечивающих стерильность и стабильность объекта, режим должен быть указан и обоснован в нормативно-технической документации.
Стерилизацию фильтрованием проводят для растворов термолабильных веществ с помощью глубинных и мембранных фильтров, задерживающих микроорганизмы и их споры. Мембранные фильтры характеризуются ситовых механизмом задержания и постоянных размером пор при эксплуатации (максимальный диаметр пор стерилизующего мембранного фильтра не превышает 0, 3 мкм).
Глубинные фильтры характеризуются сложным механизмом задержания (ситовый, адсорбционным, инерционным) и в большинстве случаев непостоянным размером пор. Для мембранным фильтров указывается в паспорте «точка пузырька» (минимальное давление газа, необходимое для вытеснения жидкости из фильтра) – величина, непосредственно связанная с максимальным диаметром пор в фильтре.
При стерилизации фильтрованием перед стерилизующим фильтром помещают один или несколько префильтров, поры которых больше или равны порам фильтра.
Глубинные фильтры и префильтры, содержащие асбестовые и стеклянные волокна, как правило, не должны применяться для стерилизации лекарственных средств, вводимых парентерально, но, в случае их использования после – должен быть установлен стерилизующий мембранный фильтр.
Перед началом фильтрования и после него проверяют герметичность собранной установки и целостность мембранного фильтра.
Глубинные фильтры с помощью этого теста не проверяют. Фильтрование проводят, применяя положительное давление (до 0, 7 МПа для мембранных фильтров) с нестерильной стороны установки. При использовании глубинных фильтров необходимо строго соблюдать указанные в паспорте температуру, рН, давление, следует, также, избегать гидравлических ударов, продолжительность фильтрования не должна превышать 8 часов.
Стерилизацию фильтрованием и розлив раствор проводят в асептических условиях. Эффективность стерилизации фильтрованием проверяют прямым посевом пробы фильтрата в питательную среду.
При радиационном методе стерилизации производят облучение объектов в конечной упаковке на гамма-установках, ускорителях электронов и других источниках ионизирующего излучения дозой 25 кГр (2, 5 Мрад) или другими дозами в зависимости от конкретных условий (микробная обсемененность продукции до стерилизации, радиорезистентность контаминантов, величина коэффициента надежности стерилизации). Стерилизацию проводят в соответствии со «Сводом правил, регламентирующих проведение в странах – членах СЭВ радиационной стерилизации лекарственных средств» и утвержденными инструкциями на каждый вид изделия.
Радиационный метод стерилизации может быть рекомендован для изделий из пластмасс, изделий одноразового использования в упаковке, перевязочных материалов, некоторых лекарственных средств и других видов медицинской продукции.
Испытание на токсичность проводят на здоровых белых мышах обоего пола массой около 20 г, на которых ранее не было никаких испытаний. Исследования строго регламентируются соответствующими нормативными документами, в которых определяется схема и порядок проведения опытов, условия содержания и рацион кормления животных, их число, способы введения препаратов, время, объем вводимого препарата, продолжительность наблюдения, описание состояния животных и т.д. препарат считают выдержавшим испытание, если в течение предусмотренного срока не погибнет ни одно животное.
Испытание на пирогенность лекарственных препаратов проводится для выявления нежелательных примесей - пирогенов, вызывающих при введении в организм лихорадочное состояние. Исследования проводят испытаний указаны Испытания проводят на здоровых кроликах обоего пола, не альбиносах, с массой тела от 2, 0 до 3, 5 кг по ГФ Х1, вып. 2.
Пирогены - высокомолекулярные вещества, в основном полисахариды - являются эндо- и экзотоксинами, высвобождаемыми при гибели клеток бактерий и грибов. Эндотоксины - относительно устойчивые к нагреванию липосахариднопротеиновые комплексы, содержащиеся в клеточных стенках многих грамм-отрицательных бактерий, таких как Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae и др. Экзотоксины - неустойчивые к нагреванию протеиновые комплексы, образуемые грамм-положительными бактериями такими, как Staphylococcus aureus, Staphylococcus pyrogenes.
Определение пирогенности испытуемого препарата проводится на кроликах и основано на измерении температуры тела у кроликов до и после инъекции. Выбор пал на кроликов по следующим причинам: они сверхчувствительны к пирогенам (0, 001 мкг на кг массы тела); в перерасчете на кг массы тела кролики и человек почти одинаково чувствительны к пороговой дозе пирогена эндотоксинового типа; кроликов обычно легко содержать; они имеют легко доступные ушные вены, в которые можно вводить большой объем и/или многократные инъекции.
Технологические стадии приготовления инъекционных и инфузионных растворов
В зависимости от природы лекарственных веществ, входящих в состав лекарственной формы и технологического процесса изготовления стерильные растворы делят на 2 группы: 1). Растворы, которые стерилизуют в конечной упаковке; 2). Растворы, изготовленные в асептических условиях на стерильном растворителе с использованием стерильной посуды без последующей термической стерилизации.
Изготовление стерильных растворов запрещается при отсутствии данных о химической совместимости лекарственных веществ, входящих в состав раствора, о технологии изготовления, о режиме стерилизации, методик анализа для полного химического контроля, тест-дозы для испытания на пирогенность.
Основные стадии и операции изготовления растворов для инъекций:
Подготовительные работы: подготовка помещения, оборудования, персонала, вспомогательных материалов, мытье и стерилизация флаконов, обработка резиновых пробок и алюминиевых колпачков, получение воды очищенной и воды для инъекций, подготовка лекарственных веществ. Вещества, необходимые для приготовления лекарственных средств в асептических условиях хранят в плотно закрывающихся штангласах в условиях, исключающих их загрязнение, штангласы перед каждым заполнением моют и стерилизуют.
Приготовление раствора:
Проведение расчетов, отмеривание растворителя, отвешивание лекарственных веществ. Стерильные растворы готовят массо-объемным способом (доведением до объема), при необходимости производят пересчет массы вещества на безводное (например, глюкоза, глицерин, кальция хлорид, магния хлорид, натрия ацетат);