У щурів-самців, що одержували клопіралід встановлені аналогічні кореляційні зв'язки між рівнем ВРПО ліпідів і функціональними показниками репродуктивної системи: рівень ТБК-реактантов крові прямо корелював з кількістю канальців із злущеним епітелієм r=0,83. Виявлялася пряма кореляційна залежність між рівнем ТБК-реактантів в сім’яниках з кількістю сперматозоїдів з дискінезісом r=0,82, що прямо указує на патогенетичний зв'язок рівня ВРПО ліпідів і порушення рухливості сперматозоїдів. Активність антиоксидантного захисту впливав на процеси імплантації зародка, про що свідчив прямий кореляційний зв'язок між активністю каталази і кількістю місць імплантації на самку r=0,94. В цей же час збільшена активність субстратіндуцибельної СОД обумовлена компенсаторною реакцією на підвищення продукції АФК. Таким чином, тісні кореляційні зв'язки між концентрацією продуктів ВРПО ліпідів, станом сперматогенного епітелію, рухливістю сперматозоїдів, ембріональною летальністю вказували на патогенетичну роль процесів ВРПО в ушкодженні репродуктивної системи прооксидантами у щурів,
| Таблиця 2 | |||||||||
| Функціональні показники сперми щурів, які отримували препарати АО на тлі хронічного надходження прооксидантів (M±m) | |||||||||
| Інтактні | Введення ацетату свинцю | Ацетат свинцю + б-токоферолу ацетат | Ацетат свинцю + екстракт ехінацеї | Ацетат свинцю + азупростат | Введення клопіра-ліду | Клопіралід + б-токофе-ролу ацетат | Клопіралід + екстракт ехінацеї | Клопіралід + азупростат | |
| Кількість сперматозоїдів, млн | 48,0±3,7 | 27,2±3,8 | 42,6±3,6 | 38,7±2,0 | 46,8±3,0 | 30,6±3,5 | 46,1±2,6 | 40,4±2,9 | 48,2±3,5 |
| р1<0,05 | р2<0,02 | р1<0,05 | р2<0,01 | р1<0,01 | р2<0,002 | р2<0,005 | р2<0,001 | ||
| р2<0,002 | |||||||||
| Кількість мертвих сперматозоїдів, млн | 9,6±0,8 | 20,6±0,9 | 16,2±1,5 | 12,7±1,4 | 10,4±0,7 | 17,5±1,1 | 13,4±1,4 | 10,6±0,9 | 9,9±0,4 |
| р1<0,01 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | р1<0,001 | р1<0,05 | р2<0,001 | р2<0,001 | ||
| р2<0,05 | р2<0,05 | ||||||||
| Кількість патоло-гічних форм спер-матозоїдів, млн | 8,0±0,9 | 24,3±1,6 | 17,1±0,4 | 11,8±1,8 | 9,4±0,8 | 19,0±0,9 | 14,8±1,2 | 10,2±0,7 | 9,1±1,0 |
| р1<0,01 | р1<0,05 | р2<0,001 | р2<0,001 | р1<0,001 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | ||
| р2<0,001 | р2<0,02 | ||||||||
| Кінезісграма | |||||||||
| Нормокінезис, % | 89,0±4,2 | 28,2±3,2 | 77,2±9,6 | 79,5±4,5 | 86,5±9,4 | 26,8±3,2 | 77,3±8,5 | 79,9±3,7 | 86,2±9,8 |
| р1<0,001 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | р1<0,001 | р1<0,05 | р2<0,001 | р2<0,001 | ||
| р2<0,001 | р2<0,001 | ||||||||
| Гіпокінезис, % | 0,7±0,33 | 30,8±3,6 | 2,9±1,8 | 6,9±3,8 | 1,4±1,4 | 34,7±4,3 | 3,8±3,5 | 7,0±3,7 | 2,2±1,5 |
| р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,002 | р2<0,001 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | ||
| Акінезис, % | 9,4±0,9 | 31,0±2,0 | 16,4±1,5 | 11,2±1,5 | 10,2±0,2 | 29,3±1,8 | 14,9±1,2 | 10,8±1,1 | 10,1±1,2 |
| р1<0,001 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | р1<0,001 | р1<0,02 | р2<0,001 | р2<0,001 | ||
| р2<0,001 | р2<0,001 | ||||||||
| Дискінезис, % | 0,9±0,4 | 10,0±1,5 | 3,5±0,5 | 2,4±1,2 | 1,9±1,3 | 9,2±1,5 | 4,0±0,6 | 2,3±1,5 | 1,5±1,0 |
| р1<0,001 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,001 | р1<0,001 | р1<0,001 | р2<0,001 | р2<0,01 | ||
| р2<0,001 | р2<0,01 | ||||||||
| Примітка: р1 - різниця достовірна в порівнянні з величинами інтактної групи, р2 - різниця достовірна в порівнянні звеличинами контрольної групи. | |||||||||
Рис. 3.Зміст ДК в сироватці крові та ТБК-реагуючих продуктів в тканинах сім’яників тварин, щоотримували препарати АО на тлі введення клопіраліда.
Рис. 4. Кількість живих, мертвих и резорбованих ембріонів у інтактних самок спарених с самцями, що отримували препарати АО на тлі введення клопіраліду, що приводило до розвитку біохімічних, морфологічних і функціональних порушень в сім’яниках, зниження фертильності і, зрештою, загибелі потомства.
Введення б-токоферолу ацетату при хронічному надходженні прооксиданту ацетату свинцю призводило до зниження рівня первинних і проміжних продуктів ВРПО в крові тварин і тканинах сім’яників і підвищувало ефективність функціонування системи антиоксидантного захисту (САЗ) в організмі (див. рис. 1), поліпшувало стан сперматогенного епітелію, деякі кількісні характеристики сперми, але не змогло нормалізувати кількість канальців зі злущеним епітелієм та у стадії дозрівання, індекс сперматогенезу, кількість мертвих і патологічних форм сперматозоїдів, кількість сперматозоїдів з а- і дискінезисом (див. табл. 2). При спаровуванні цих самців у інтактних самок, збільшувалася кількість жовтих тіл, місць імплантації і числа живих ембріонів на самку. Проте б-токоферолу ацетат істотно не впливав на число мертвих і резорбованих зародків, величину загальної і постімплантаційної летальності (див. рис. 2).
Введення екстракту ехінацеї рідкого при хронічному надходженні ацетату свинцю також викликало зниження ВРПО ліпідів, але більш виражене в тканинах сім’яників, ніж в крові (див. рис. 1). Протекторна дія екстракту ехінацеї рідкого виявлялася в нормалізації морфологічних характеристик сім’ярідного епітелію і рухливості сперматозоїдів (див. табл. 2), але при цьому зберігалася висока кількість канальців із злущеним епітелієм, а кількість канальців з 12-стадіей мейозу і загальна кількість сперматозоїдів залишалися на рівні контрольної групи. У інтактних самок нормалізувалась кількість живих, мертвих і резорбованих зародків, ембріональна летальность (див. рис. 2). Проте зберігалася зменшена кількість жовтих тіл і місць імплантації.
Введення азупростату при хронічному надходженні ацетату свинцю призводило до вираженого зниження ВРПО ліпідів в крові і тканинах сім’яників (див. рис. 1), що в істотній мірі знижало ушкоджувальну дію вільнорадикальних продуктів на репродуктивну систему. Нормалізувало стан сперматогенного епітелію, кількісні характеристики сперми і рухливість сперматозоїдів щурів (див. табл. 2), а також привело до нормалізації показники ембріо- і фетогенезу у спарених з ними інтактних самок (див. рис. 2).
Введення б-токоферолу ацетату при хронічному надходженні клопіраліду призводило до зниження продуктів ВРПО ліпідів (див. рис. 3), причому приріст ТБК-реактантів в крові був нижчий, ніж в тканинах сім’яників. Відновлювалася САЗ організму, про що свідчить нормалізація активності антиоксидантних ферментів крові. Поліпшився морфофункциональний стан сперматогенного епітелію і деякі кількісні характеристики сперми, але не впливало на кількість канальців зі злущеним епітелієм та у стадії дозрівання, кількість мертвих і патологічних форм сперматозоїдів та сперматозоїдів з а- і дискінезисом (див. табл. 2). У інтактних самок, спарених з цими самцями, збільшилось кількості жовтих тіл, місць імплантації, живих ембріонів. Проте кількість резорбованих зародків, величина загальної і постімплантаційної летальності залишалися на рівні показників контрольної групи (див. рис. 4).
Профілактичне введення екстракту ехінацеї на тлі введення клопіраліду призводило до підвищення САЗ тканин сім’яників (див. рис. 3), поліпшувавло морфологічний стан сперматогенного епітелію і рухливість сперматозоїдів (див. табл. 2), але при цьому залишалося на рівні контрольної групи кількість канальців з 12 стадією мейозу і у стадії росту, не змінилась кількість нормальних сперматогонієв і загальна кількість сперматозоїдів. У інтактних самок, спарених з самцями цієї групи, збільшувалася кількість живих ембріонів, знижувалася кількість мертвих і резорбованих зародків, загальна ебріональна і постімплантаційна летальність, проте зберігалися низькими кількість жовтих тіл і місць імплантації (див. рис. 4).
Введення азупростату при хронічному надходженні клопіраліду призводило до нормалізації вмісту первинних і проміжних продуктів ВРПО в тканинах сім’яників і крові (див. рис. 3), активності антиоксидантних ферментів, сприяло поліпшенню стану сперматогенного епітелію (нормалізації індексу сперматогенезу, кількості нормальних сперматогоніїв, числа канальців із злущеним або атрофічним епітелієм, кількості канальців у стадії росту і дозрівання), кількісних показників сперми щурів, нормалізації рухливості сперматозоїдів (див. табл. 2), хоча і залишалися дещо підвищеними кількість сперматозоїдів з гіпо- і дискінезисом. Нормалізувались показники ембріо- і фетогенезу у інтактних самок (див. рис. 4).
Враховуючи системність біологічного інгібування ВРПО ліпідів, комплексна дія компонентів препарату азупростат забезпечивала найбільш виражений гонадопротективний ефект, що доводе ефективність його застосування і визначає пріоритетне використання азу простату для фармакологічної корекції чоловічого безпліддя, викликаної надходженням сполук прооксидантної дії.
В цілому, одержані дані свідчать про доцільність застосування АО для профілактики біохімічних, функціональних і морфологічних змін в сім’яниках при хронічному впливі на організм сполук прооксидантної дії (важких металів і пестицидів).
ВИСНОВКИ
В роботі отримані дані експериментального обґрунтування ефективності використання препаратів антиоксидантної дії як гонадопротекторів при хронічному впливі прооксидантів.