Стерилизующая фильтрация (стр. 2 из 2)

Экспериментальные данные по оценке производительности фильтров и динамике скорости фильтрации обработанной на компьютере HP-9845 (США) с использованием метода регрессионного анализа и последующей аппроксимацией данных аналитическими функциями.

Электронно-микроскопические исследования поверхности фильтров выполнены на сканирующих электронных микроскопах «Opton» (ФРГ) Jem-100 CX («Jeol», Япония)с приставкой «Acid 4 D».

Тест - объектами для изучения возможного цитотоксического влияния материала фильтров «Мифил» служили первичные культуры заднекорешковых ганглиев эмбрионов цыплят, тригеминальных ганглиев новорожденных крыс, а также перевиваемые линии клеток VERO, HeLa, HEP, MDSK

Результаты и их обсуждение

В таблице приведены величины проницаемости (Q), прочности σ и относительного удлинения при разрыве ε исследованных мембран.

Характеристики мембран различных марок с размером пор 0,2мкм.

Марка мембраны	Место изготовления, фирмы	Q, мл/(мин·см2)при 0,1МПа	Q, МПа	ε,%
МФА-1GS «Дюрапор»«Мифил»	г. Владимир«Миллипор» (США)«Миллипор» (США)Таллин	17171313	2,33,24,46,9	6,72,716,513,0

Рис. 1. Микрофлора Pseudomonasdiminuta на поверхности мембраны «Мифил»х1000.

Из рис. 1 следует, что все использованные пористые мембраны, подготовленные автоклавированием, обеспечивают очистку как спонтанно загрязненных, так и специально контаминированных биологических жидкостей от макрофлоры с размерами более 0,2мкм. Вчасти нативных сывороток спонтанно контаминированных микоплазмой (размеры менее 0,2 мкм), эффективная стерилизация не достигается без предварительной инактивации их прогреванием.

На рис. 2 представлены электронные микрофотографии поверхности исследованных мембран.

Рис.2.Электронныемикрофотографииповерхностеймембран. а – МФА; б – GS; в – «Дюрапор»; г – «Мифил».

Сравнительный анализ динамики скорости фильтрации показал однотипность и изменения этого параметра для всех изученных фильтров(рис. 3). Установлено, чтодля сложных поликомпонентных биологических жидкостей она определяется удельной пористостью мембраны, а также наличием в фильтруемых растворах макромолекул белковой природы (рис. 4).

Неорганические вещества и органические низкомолекулярные компоненты существенно не влияют на скорость фильтрации.

Такое заключение справедливо только для слабозагрязненных растворов. В этом случае изменение объема фильтруемой жидкости описывается уравнением вида υ = ατ^-1, где υ ─ объем профильтрованной жидкости; α ─ коэффициент регрессии; τ ─ время от начала фильтрации.

Рис.3. Кривые динамики скорости фильтрации сывороток плацентарной крови человека через мембраны «Мифил». 1- «Дюрапор»; 2 — GS; З— «Мифил»; 4 — «Сарториус»; 5 — МФА-1. Здесь и на рис. 2 по оси абсцисс τ (в с), по оси ординат — υ(в мл).Рис. 4. Кривые динамики скорости фильтрации сывороток плацентарной крови человека через мембраны «Мифил». Концентрация сывороток: 1 — 100 %. 2 —20 %. Э — 10%.

Возможность использован и я фильтров для медико-биологических задач определяется не только стерилизующей эффективностью, производительностью, механической прочностью, возможностью применения различных способов стерилизации, но и отсутствием выделения токсичных компонентовв стерилизуемую жидкость. Предполагаемое токсическое действие материала фильтров «Мифил» оценивали в опытах по культивированию клеток и тканей. Использование в качестве тест - объектов культуральных систем явилось следствием хорошо известного факта гиперчувствительности клеток invitroк любым повреждающим воздействиям в сравнении с клетками insitu. Проведено исследование функционального состояния клеток в развивающихся культурах, выращиваемых в различных питательных средах, фильтрованных через оцениваемый фильтр, или в присутствии материала фильтра в культуральной системе. В последнем случае отмытые и автоклавированные фильтры (100 мг на 1 мл среды) помещали в сосуд со средой и развивающимися культурами. Ежедневно в течение недели опытные культуры сравнивали с контрольными на предмет выявления в них цитотоксических изменений. Все культуры исследовали прижизненно микроскопически, часть из них фиксировали и окрашивали для гистологического и гистохимического анализа.

Рис.5. Культуры клеток и тканей, выращенные в присутствии материала мембраны «Мифил» в питательной среде.

1 – клетки линии MDSK. Окраска гематоксилином х16; 2 – клетки линии МА; эстеразная активность, выявляемая методом диазосочетаний. х40; 3 – культура тригеминального ганглия крысы, 12 дней invitro. Прижизненная микроскопия, фазовый контраст.х40.

Функциональную оценку культур проводили по следующим параметрам: укрепление клеток на субстрате, формирование и сохранение характерного рисунка монослоя, пролиферация для перевиваемых культур, рост отростков, формирование зоны роста, состояние нейронов для культур нервной ткани. Цитологический анализ таких культур не выявил цитотоксического эффекта материала фильтров «Мифил» (рис. 5).

Таким образом, проведенные исследования позволяют заключить, что микрофильтрационные капроновые мембраны «Мифил» обеспечивают эффективную стерилизацию биологических жидкостей, загрязненных микрофлорой с размерами более 0,2 мкм, являются нетоксичными, обладают высокой механической прочностью и не изменяют своих свойств при обычных методах стерилизации автоклавированием, а по производительности сопоставимы с фильтрами «Дюрапор» фирмы «Миллипор» (США).

Список литературы

1. Промышленная технология лекарств: [Учебник. В 2-х т. Том 2/ В.И Чуешов, М.Ю. Хохлова и др.]; Под редакцией профессора В.И. Чуешова. – Х.:МТК-Книга; Издательство НФАУ, 2002. – с.180-181,с. 555-556.

2. Технология лекарственных форм:[Учебник. В 2-х т. Том 1/ Т.С. Кондратьева, Л.А. Иванова, Ю.И. Зеликсон и др.;Под ред. Т.С. Кондратьевой.- М.: Медицина, 1991.ил.-(Учеб. Лит. Для студ. Фарм. Ин-тов)-с.351-354.

3. Химико-фармацевтический журнал. В.Я. Вильнер, Ю.М. Аркатов, Т.А. Коршунова, В.А. Артамонов «Стерилизующая фильтрация биологических жидкостей с помощью микрофильтрационных мембран».1988. с. 1001-1004.

4. Химико-фармацевтический журнал.И.В. Беседина, Ф.А. Конев, А.А. Болотова.»Изучение процесса фильтрования инъекционных растворов при использовании некоторых фильтровальных материалов».1988.с.98-101.

5. Интернет: http:|/wwww.unico94.ru/official/docs/show/ function.mysql-connect