З листя кульбаби лікарської вперше виділено лютеолін-4'-О-β-D-глюкопіранозид та п-кумарову кислоту, вперше ідентифіковано 4 цукри та 8 жирних кислот. В квітках кульбаби лікарської вперше ідентифікована L-рамноза та 4 жирні кислоти.
Отримані результати дозволяють підібрати та адаптувати методики для кількісного визначення флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, полісахаридів, амінокислот, токоферолів в листі та квітках кульбаби лікарської, вибрати стандарти для перерахунку.
Ідентифіковані групи БАР та індивідуальні речовини, виділені з квіток та листя кульбаби лікарської, дозволяють припустити, що вказана сировина може мати протизапальну, антиоксидантну та геномозахисну активність.
Визначення кількісного вмісту БАР різних груп в сировині та препаратах кульбаби лікарської
З метою стандартизації сировини листя, квіток та коренів кульбаби лікарської та порівняльного аналізу вмісту БАР в надземній та підземній частинах кульбаби лікарської були розроблені методики аналізу та проведено визначення вмісту амінокислот, жирних кислот, гідроксикоричних кислот, флавоноїдів, полісахаридів, токоферолів, каротиноїдів, хлорофілів та мікроелементів.
Із застосуванням методу ВЕРХ розроблено методику якісного та кількісного аналізу амінокислот в сировині кульбаби лікарської. В квітках та коренях ідентифіковано 13 амінокислот, в листі – 12 амінокислот. Найбільший вміст амінокислот знайдено в сировині квіток кульбаби лікарської – 1,90 %, менший вміст в сировині листя – 1,40 %, найменший вміст амінокислот знайдено в сировині коренів кульбаби лікарської – 1,22 %. Дані щодо вмісту амінокислот в сировині кульбаби лікарської представлені в табл. 2.
За допомогою методу ГРХ розроблена методика аналізу жирних кислот в сировині кульбаби лікарської. Встановлено, що в коренях, листі та квітках кульбаби лікарської переважають поліненасичені жирні кислоти. В листі кульбаби лікарської частка поліненасичених жирних кислот становить 68,88 %, в коренях – 65,42 %, в квітках кульбаби лікарської – 62,09 %. Дані щодо вмісту жирних кислот в сировині кульбаби лікарської представлені в табл. 3.
Методом атомно-абсорбційної спектроскопії визначено кількісний вміст 9 макро- та мікроелементів в листі, квітках та коренях кульбаби лікарської. Встановлено, що найбільший вміст в надземній частині кульбаби лікарської мають марганець, залізо та цинк. При цьому слід зазначити, що вміст цинку та марганцю більший в сировині листя кульбаби лікарської, вміст же заліза більший в сировині квіток кульбаби лікарської. В коренях кульбаби найбільший вміст мають магній, залізо та цинк, причому вміст магнію на порядок більший, ніж в надземній частині кульбаби лікарської.
Досліджені ліпофільні екстракти квіток та листя кульбаби лікарської. Встановлено, що хлорофілу міститься більше в ліпофільномуекстракті листя
Таблиця 2
Кількісний вміст амінокислот в сировині кульбаби лікарської
Амінокислота | Вміст амінокислот в сировині кульбаби лікарської (%) | ||
Листя | Квітки | Корені | |
Серин | - | - | 0,32274 |
Гістидин | 0,00223 | - | - |
Гліцин | 0,01981 | 0,17893 | - |
Аргінін | 0,00197 | 0,52341 | 0,50424 |
Треонін | 0,00777 | - | - |
Аланін | 0,12042 | 0,19606 | 0,07024 |
Пролін | 0,97023 | 0,6263 | 0,25036 |
Цистеїн | - | 0,09026 | 0,00052 |
Тирозин | - | 0,04407 | 0,00782 |
Валін | 0,09800 | 0,06983 | 0,01197 |
Лізин | 0,00454 | 0,01452 | 0,01683 |
Метіонін | - | 0,07915 | 0,00533 |
Ізолейцин | 0,04036 | 0,02737 | 0,01032 |
Лейцин | 0,03686 | 0,01614 | 0,00426 |
Фенілаланін | 0,05590 | 0,02365 | 0,00334 |
Триптофан | 0,04701 | 0,02025 | 0,01145 |
Сума амінокислот | 1,40 | 1,90 | 1,22 |
Результати визначення вмісту жирних кислот в сировині кульбаби лікарської
Жирна кислота | Вміст, % від суми | |||
квітки | листя | корені | ||
Капронова | 0,68 | – | 0,11 | |
Каприлова | 0,89 | – | – | |
Лауринова | 2,56 | – | – | |
Міристинова | 4,67 | 0,97 | 1,45 | |
Пентадеценова | 7,56 | – | – | |
Пальмітинова | 18,61 | 23,9 | 27,02 | |
Пальмітинолеїнова | 2,53 | – | – | |
Стеаринова | 5,88 | 1,91 | 1,46 | |
Олеїнова | 1,17 | 1,15 | 13,64 | |
Лінолева | 28,41 | 19,89 | 41,88 | |
Ліноленова | 22,42 | 47,84 | 9,90 | |
Арахінова | 1,90 | 1,21 | 0,52 | |
Бегенова | 1,14 | 1,17 | 2,14 | |
Лігноцеринова | 1,53 | 1,95 | 1,87 | |
Сума насичених жирних кислот | 37,91 | 31.12 | 34,58 | |
Сума ненасичених жирних кислот | 62,09 | 68,88 | 65,42 |
кульбаби лікарської – 52,5±1,3 мг/г, тоді як в екстракті квіток – 10,4±0,8 мг/г. Токоферолів міститься більше в екстракті листя – 0,856±0,05 мг/г, проти 0,535±0,008 мг/г в екстракті квіток. Вміст каротиноїдів становив в екстракті квіток кульбаби лікарської – 4,33±0,30 мг/г, в екстракті листя – 4,47±0,20 мг/г.
За допомогою методів УФ-спектрофотометрії та ВЕРХ розроблені методики аналізу суми оксикоричних кислот та цикорієвої кислоти в сировині та препаратах кульбаби лікарської.
З використанням розробленої нами УФ-спектрофотометричної методики встановлено, що найбільший вміст суми оксикоричних кислот знаходиться в сировині листя кульбаби лікарської, менший – в квітках, найменший – в коренях кульбаби лікарської. Досліджено коливання вмісту суми оксикоричних кислот в сировині, зібраній у різні роки в різних регіонах України (табл. 4). Встановлено, що вміст оксикоричних кислот у сировині листя кульбаби лікарської коливається в межах від 3,01±0,13 % до 3,81±0,18 %, вміст оксикоричних кислот в сировині квіток кульбаби лікарської коливається в межах від 1,920±0,101 % до 2,72±0,11 %, вміст оксикоричних кислот в сировині коренів коливається в межах від 0,98±0,07 % до 1,11±0,08 %.
З використанням розробленої ВЕРХ-методики встановлено, що найбільший вміст цикорієвої кислоти знаходиться в сировині листя кульбаби лікарської, менший – в квітках, найменший – в коренях кульбаби лікарської. Хроматограми цикорієвої кислоти та екстрактів кульбаби лікарської представлені на рис. 1-4. Досліджено як коливається вміст цикорієвої кислоти в сировині, зібраній в різні роки в різних регіонах України (табл. 4). Встановлено, що вміст цикорієвої кислоти в сировині листя кульбаби лікарської коливається в межах від 1,21±0,07 % до 1,53±0,05 %, вміст цикорієвої кислоти в сировині квіток кульбаби лікарської коливається в межах від 0,52±0,03 % до 0,066±0,02 %, вміст цикорієвої кислоти в сировині коренів коливається в межах від 0,30±0,02 % до 0,32±0,02 %.
Таблиця 4
Вміст суми оксикоричних кислот та цикорієвої кислоти в сировині кульбаби лікарської, зібраної в різних регіонах України
Сировина кульбаби лікарської,n=6 | Вміст суми оксикоричних кислот (%), | Вміст цикорієвої кислоти (%), |
Листя, Черкаська обл., 2006 р. | 3,51±0,17 | 1,48±0,05 |
Листя, Київська обл., 2005 р. | 3,50±0,16 | 1,32±0,06 |
Листя, Київська обл., 2006 р. | 3,81±0,18 | 1,53±0,05 |
Листя, Волинська обл., 2006 р. | 3,61±0,16 | 1,49±0,06 |
Листя, Херсонська обл., 2006 р. | 3,01±0,13 | 1,21±0,07 |
Квітки, Черкаська обл., 2006 р. | 2,11±0,11 | 0,59±0,03 |
Квітки, Київська обл., 2005 р. | 2,32±0,10 | 0,58±0,02 |
Квітки, Київська обл., 2006 р. | 2,72±0,11 | 0,66±0,02 |
Квітки, Волинська обл., 2006 р. | 2,43±0,11 | 0,61±0,03 |
Квітки, Херсонська обл., 2006 р. | 1,92±0,10 | 0,52±0,03 |
Корені, Київська обл., 2004 р. | 0,98±0,07 | 0,30±0,02 |
Корені, Київська обл., 2005 р. | 1,10 ± 0.06 | 0,32±0,02 |
Корені, Черкаська обл., 2005 р. | 1,11±0,08 | 0,30±0,03 |
хв.
Рис. 1. Хроматограма розчину цикорієвої кислоти.
хв.
Рис. 2. Хроматограма екстракту листя кульбаби лікарської.