9. Диагностика
Материалом для бактериологического исследования являются трупы грызунов, от погибших животных – лимфатические узлы, кусочки патологически измененных паренхиматозных органов. Схема исследования включает: бактериоскопию, выделение чистых культур и биологический метод.
Из исследуемого материала готовят мазки, которые окрашивают по Грамму и Романовскому - Гимзе. Посевы проводят на МПА, МПБ, а так же специальные обогащенные среды, дифференциальную среду Серова или агар Хоттингера с генцианвиолетом в концентрации 1: 200000. Заражают подкожно белых мышей или лучше морских свинок. Мыши гибнут на 3-7е сутки, свинки на 3-13е сутки.
При исследовании на псевдотуберкулез овец в лабораторию направляют трупы овец или измененные участки паренхиматозных органов и лимфатические узлы. Схема исследований аналогична описанной выше. Возбудитель псевдотуберкулеза овец легко дифференцируется от ерсиний псевдотуберкулеза: это неподвижный, грамположительный, не окрашивающийся биполярно и не ферментирующий глюкозу микроб.
Необходимо псевдотуберкулез дифференцировать от туберкулеза по следующим признакам: возбудитель некислотоустойчив (возбудитель туберкулеза кислотоустойчив), палочки легко растут на обычных питательных средах (возбудитель туберкулеза медленно), в мазках из очагов обнаруживают грамположительные палочки (при туберкулезе находят палочки, красящиеся по Циль-Нильсену), при посеве из очага легко удается выделить культуру возбудителя (при туберкулезе для выделения культуры заражают лабораторных животных), узелки быстро развиваются, размягчаются, появляется творожистое перерождение (при туберкулезе узелки твердые, сильно пролиферирующие и крупноклеточные), в очагах не бывает отложения извести (при туберкулезе очаги обызвествленные), очаг рано инкапсулируется, капсула утолщается и имеет гладкую внутреннюю поверхность (при туберкулезе очаг окружен фибринозной соединительной тканью).
Так же ерсинию псевдотуберкулеза необходимо отличить от возбудителя зооантропонозной чумы. При этом ориентируются по таким признакам: бактерия чумы неподвижна, лизируется чумным бактериофагом, не растет на среде Бессоновой (голодный агар), не разлагает мочевину, патогенна в R-форме, обладает пестиногенностью; ерсиния псевдотуберкулеза подвижна, лизируется псевдотуберкулезным фагом, растет на среде Бессоновой, разлагает мочевину с образованием щелочи, патогенна в S-форме, пестиногенностью не обладает.
В серологической диагностике используют реакции агглютинации (РА) и непрямой гемагглютинации (РНГА). Диагностическим титром может считаться для РА 1:200, для РНГА 1:100. Достоверным диагностическим критерием при использовании данных методов является четырехкратное нарастание титра специфических антител в динамике заболевания при исследовании парных сывороток. Использование серологических методов, основанных на обнаружении специфических антител к антигенам иерсиний, имеет ряд серьезных недостатков, основными из которых являются невысокая специфичность и поздние сроки подтверждения диагноза.
Использование в качестве диагностикума очищенной псевдотуберкулезной гипериммунной сыворотки позволило создать несколько экспресс-методов обнаружения антигенов иерсиний в организме больных: РНГА, РНИФ (реакция непрямой иммунофлуоресценции), РКА (реакция коагглютинации), латекс-агглютинация, ИФА (иммуноферментный анализ). Эти методы позволяют обнаружить антигены иерсиний в различных биологических средах организма в первые дни заболевания.
В настоящее время апробированы и в ближайшем будущем найдут широкое практическое применение для диагностики псевдотуберкулеза такие современные методы, как иммуноблотинг и полимеразная цепная реакция (ПЦР). Эти методы значительно увеличивают вероятность правильного лабораторного диагноза уже при первом обследовании больного. Так, для постановки диагноза при помощи ПЦР достаточно несколько молекул ДНК иерсиний в исследуемом материале.
10. Специфическая профилактика и терапия заболевания
Специфическая профилактика, несмотря на многочисленные исследования в области вакцинации, до настоящего времени не разработана. А терапия в ветеринарной медицине не предусмотрена.
Заключение
Несмотря на то, что псевдотуберкулез уже несколько десятилетий привлекает к себе внимание ученых, и многие вопросы патогенеза и иммунитета его хорошо изучены, заболеваемость этой инфекцией в Российской Федерации остается на достаточно высоком уровне. Эта болезнь имеет много клинических форм и нередко принимает хроническое течение, сопровождаясь развитием рецидивов и обострений. Причиной этого является способность возбудителя Y. рseudotuberculosis сохранять жизнеспособность в фагоцитах макроорганизма. Кроме этого, при этом ифекционном заболевании развивается вторичное иммунодефицитное состояние, требующее коррекции.
Профилактика иерсиниоза у животных предусматривает строгое соблюдение ветеринарно-санитарных и зоогигиенических правил ухода за животными, направленных на создание оптимальных условий содержания и кормления животных и предотвращение их заражения через объекты внешней среды. Существенное значение имеют дератизационные мероприятия на объектах питания, водоснабжения и животноводческих комплексах. Необходимо уничтожать грызунов и регулярно проводить тщательную дезинфекцию помещений. При подозрении на псевдотуберкулез не реже двух раз в месяц проводить клинический осмотр животных (птицы), подозрительных в заболевании животных изолируют и исследуют бактериологически, больных целесообразнее убить.
Список используемой литературы
1. Емельяненко П. А., Дунаев Г. В., Кудлай Д. Г. , Ветеринарная микробиология, Колос, М., 1982;
2. Коляков Я. Е., Ветеринарная микробиология, Колос, М.,1965;
3. Туманский В. М., Псевдотуберкулез, 2 изд., М., 1958;
4. Колычев Н. М., Госманов Р. Г., Ветеринарная микробиология и иммунология, Колос, М., 2003;
5. Гутира Ф., Частная патология и терапия домашних животных, (пер. с нем.), т. 1, М., 1961;
6. Иванов А. И., К изучению возбудителя псевдотуберкулеза//Ветеринария.-2009.-№3.-С. 8-12.
7. Знаменский В. А., Вишняков А. К., Этиология дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки// "Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии".-1967.- т. 2.- С. 125-130.
8. Сомова Л.М., Беседнова Н.Н., Пушкарева Т.В., Дробот Е.И., Эпштейн Л.М. Применение тинростима при экспериментальной псевдотуберкулезной инфекции//Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, приложенние – 2006 - №3.
9. Чеснокова М. В., Климов В. Т., Бренева Н. В., Шурыгина И. А., Марамович А. С. Применение ПЦР для ранней лабораторной диагностики спорадического псевдотуберкулеза/ Журнал: Эпидемиология и инфекционные болезни - 2001 -№6 - С. 22 – 25.
10. Иерсиниоз животных// Ветеринария сельскохозяйственных животных -2006 - №9 - С. 8.
11. Плешакова В.И., Неленова М. Ю., Биологические свойства иерсиний, выделяемых от свиней//Ветеринария – 2007 - №8- С. 24.