При исследовании органов брюшной полости обращают особое внимание на брыжеечные лимфатические узлы, печень, селезенку, почки, а при вскрытии вымени – на наружный паховый лимфатический узел. Осматривают тушу, обращают внимание на состояние плевры, реберных лимфатических узлов, глубокого пахового лимфатического узла.
В конце исследования берут материал для бактериологического и гистологического исследований. Для индукции и выделения микобоктерий туберкулеза из патологических материалов предлагают метод культивирования микобактерий на парафиновых дисках в жидкой питательной среде (типа среды Сотона), в сочетании с обычной микроскопией, из предварительно не очищенных от банальной микрофлоры патологических материалов.
Лабораторные методы диагностики. Материал направляют в лабораторию в тех случаях, когда в хозяйстве, благополучном по туберкулезу, при диагностическом убое животных, реагировавших на туберкулин, не обнаруживают специфических для туберкулеза патологоанатомических изменений, или они нечетко выражены.
Исследования проводят микроскопическим, культуральным и биологическим методами.
Аллергическая туберкулиновая проба. Применяют сухой очищенный туберкулин (пртеин- пурифиед- дериват-ППД). Сухой очищенный туберкулин ППД был предложен М. А. Линниковой для медицинской практики. В ветеринарии используют стандартизированный сухой очищенный туберкулин для млекопитающих, который содержит в диагностической дозе 10000 туберкулиновых единиц (ТЕ-0,2 мг препарата, растворенного в 0,2 мл растворителя). Диагностическая доза альттуберкулина в том же объеме составляет 18000 ТЕ.
Серологическая диагностика. В настоящее время получены и испытываются в разных вариантах туберкулезные антигены, которые применяются в самых различных серологических диагностических реакциях. В качестве вспомогательного метода диагностики туберкулеза разрешена РСК.
Отбор проб для исследования на туберкулез
При отборе проб для исследования на туберкулез учитывают цель исследования и характер объекта, от которого берут пробы. Если необходимо подтвердить наличие туберкулеза при положительных туберкулиновых реакциях и отрицательных результатах вскрытия, прибегают к исследованию материала, взятого как от убитых, так и от живых животных. От последних пробы берут мноногократно с разными интервалами. Пробами для исследования от живых животных служат молоко, мокрота, моча, каловые массы, истечения из влагалища.
Проба молока берется из всех четырех долей вымени. Предварительно вымя обмывают теплой водой с мылом, высушивают стерильной салфеткой, а затем соски протирают 70 º спиртом. В таком же порядке обрабатывают и руки при взятии проб. Первые струйки молока сдаивают отдельно, а затем берут пробу в стерильную посуду из первой и последней порции удоя. Из каждой доли вымени берут не меньше 25 мл молока. Всю пробу центрифугируют при 3000 об/мин 20-30 мин. Осадок обрабатывают 6%-ным растворам серной кислоты, промывают физраствором, центрифугируют. Исследуют осадок и слой сливок.
Пробу мокроты собирают с помощью стерильных марлевых салфеток во время кашля, при необходимости кашель вызывают искусственно(слизь можно собирать с помощью ложки со слизистой оболочки носа). Заливают равным объемом 10%-ного раствора трехзамещенного фосфата натрия, хорошо перемешивают и ставят в термостат на 24 ч. Затем центрифугируют при 3000 об/мин 10-15 мин. Исследуют осадок [12].
Пробу мочи берут стерильным катетером в количестве 150-200 мл. из мочевого пузыря или во время мочеиспускания.
Пробу фекалий берут из прямой кишки в количестве 30-50 г и помещают в стерильную стеклянную банку с крышкой.
Пробу истечений из влагалища и других полостей собирают стерильной ложкой в количестве 3-5 мл.
После вынужденного убоя или гибели животного в лабораторию направляют кусочки измененных органов и тканей со свежими, еще неинкапсулироваными и необызвествленными поражениями. При отсутствии видимых изменений в органах животных, реагирующих на туберкулин, в лабораторию для бактериологического исследования направляют заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средостенные, паховые, предлопаточные лимфатические узлы, а также кусочки средних долей легкого. Материал можно консервировать 30%-м водным раствором глицерина [25].
Иммунитет и средства специфической профилактики. При туберкулезе он нестерильный, сохраняющийся до тех пор, пока микобактерии находятся в организме. Фагоцитоз имеет незавершонный характер, и фагоцитированные микобактерии не погибают. В организме вырабатываются агглютинины и комплементсвязывающие антитела, но их роль в иммунитете незначительна. Защита в основном определяется способностью организма купировать патологический процесс, ограничивать возбудителя в гранулемах-туберкулах [10].
У зараженных животных развивается состояние относительной невосприимчивости и экзогенной инфекции. Иммунизирующими свойствами обладают в определенной степени также атипичные микобактерии. Иммунитет клеточный, нестерильный, сохраняется на период нахождения микобактерий в организме. В отдельных районах страны используют вакцино- и химиопрофилактику туберкулеза телят с помощью вакцины БЦЖ и изониазида [16].
Роль живых возбудителей болезни в образовании иммунитета при туберкулезе подтверждается опытами Р. Коха по повторному заражению больных морских свинок. При первичном подкожном заражении их на месте введения через 10-15 дней образуется вначале узелок, а потом незаживающая язва. Наряду с этим наблюдается воспаление окружающих лимфатических узлов. После повторного же заражения через 4-6 недель в месте инъекции появляется отечно-воспалительный очаг, кожа некротизируется , отторгается и образуется язва, которая быстро заживает. При этом лимфатические узлы в процесс не вовлекаются. Этот опыт, названный феноменом Коха, показывает, что вторично введенные микобактерии туберкулеза встречаются в организме с наличием частичного иммунитета , вследствие чего реактивное воспаление, быстро развивающееся в месте заражения, локализирует и удаляет вторичный аффект, ликвидируя таким образом реакцию. В этом случае повышенная чувствительность организма препятствует распространению микобактерий туберкулеза и способствует удалению их из организма [29].
Профилактика и меры борьбы. В целях недопущения заболевания животных туберкулезом руководители хозяйств, владельцы скота и ветеринарные специалисты обязаны:
- не допускать ввод животных из других неблагополучных хозяйств и населенных пунктов, а также перемещение животных внутри хозяйства без разрешения ветеринарных специалистов;
- исследовать всех поступающих в хозяйство животных в период 30-дневного карантина на туберкулез аллергическим методом. В общее стадо животных вводят только при получении у каждого из них отрицательных результатов исследований.
Если при исследовании выявлены реагирующие животные, принимают меры к установлению диагноза и при установлении туберкулеза все поголовье данной группы подвергают убою.
Организовать на каждой ферме строгое соблюдение санитарных правил, осуществлять комплекс профилактических мер, способствующих повышению естественной резистентности организма животных. Оборудовать необходимые объекты ветеринарного и санитарного назначения.
Не разрешать посторонним лицам посещать животноводческие фермы, скотные дворы. Не допускать контакта животных со скотом неблагополучных по туберкулезу хозяйств (ферм), населенных пунктов на пастбищах, в местах водопоя скота и т. п., строго выполнять «Ветеринарные правила по предупреждению заражения пастбищ, водоисточников и трасс перегона (перевоза) скота возбудителями туберкулеза, а так же их обеззараживанию» [7].
При продаже или вывозе животных в другие хозяйства для межхозяйственного обмена и племенных целей, разрешается отбирать из хозяйств благополучных по туберкулезу не менее 4 лет.
Государственные ветеринарные инспектора районов обязаны обеспечить проверку эпизоотического состояния поголовья животных на каждой ферме в отношении туберкулеза [7].
В некоторых хозяйствах оздоровление от туберкулеза проводится с применением вакцины БЦЖ (с разрешения ветотдела).
Эффективность вакцины БЦЖ:
1.Применение вакцины БЦЖ способствует формированию иммунитета.
2.Ежегодная вакцинация БЦЖ поголовья, позволяет выявить больных активными формами туберкулеза животных по проявлению гиперэргических реакций на вакцину [17].
Отрицательная сторона: в возрасте 16-18 месяцев (т.е. в период отбора нетелей) многие ревакцинированные (через 12 месяцев после ревакцинации) телята реагируют на туберкулин. К сожалению тестов, позволяющих отличать поствакцинальную аллергию от инфекции, нет.
Наиболее напряженный иммунитет (100%) получен при трехкратном введении вакцины БЦЖ (в возрасте 10-15 дней, через 12 и 18 месяцев после первого отела), что подтверждается лабораторными методами исследования материала от животных [6].
Для дезинфекции животноводческих помещений предложена композиционная смесь – щелочной раствор фенолята натрия. Оба компонента этой смеси (раствор фенолята натрия водный и раствор щелочи отработанной) являются отходами химического производства. В ходе лабораторного исследования указанного препарата установлено, что он обладает выраженным бактериостатическим действием на микобактерии туберкулеза [2].
Проведение исследований по разработанной сотрудниками ветотдела методике показали неподготовленность практической ветеринарной службы к квалифицированной диагностике, профилактике и мерам борьбы с инфекционными заболеваниями животных. Все это свидетельствует о необходимости перехода к активным формам обучения ветеринарных специалистов. Одним из таких методов являются деловые игры (анкетный метод, на карточках, ролевая игра) [21].