- получение положительной реакции преципитации при исследовании загнившего исходного патологического материала;
- получение положительной реакции преципитации при наличии характерной клинической картины и патологических изменений у свиней даже при отсутствии культуры возбудителя в высевах из исходного патологического материала и отрицательном результате биопробы.
Методы ускоренной диагностики. Кроме пробы бактериофагам, реакции "жемчужное ожерелье", в лабораторной практике используют и другие методы ускоренной диагностики антракса: экстренная диагностика реакцией пассивной гемагглютинации (РПГА), метод быстрого выявления капсулы на среде ГКИ (in vitro), метод выявления капсулы in vivo, метод выявления капсулообразования на селективной среде, метод ускоренной диагностики на сывороточной питательноцй среде в атмосфере углекислого газа, люминесцентно-серологический метод, люминесцентно-серологический метод с использованием капсульных сибиреязвенных сывороток, метод ускоренной диагностики с применением флюорисцирующих антител.
В последние годы разработаны молекулярно-биологические методы обнаружения генома бациллы сибирской язвы (полимеразная цепная реакция).
Дифференциальный диагноз. Из-за многообразия форм проявления у животных данная болезнь имеет ряд сходных клинических признаков со многоими болезнями инфекционной и неинфекционной этиологии. При постановке диагноза необходимо исключить пастереллез, злокачественный отек, эмфизематозный карбункул, брадзот и энтеротоксимию овец, чуму свиней, африканскую чуму, инфекциооную анемию и грипп лошадей, пироплазмозы, фарингиты незаразной этиологии, долезни сердца и желудочно-кишечного тракта (острая тимпания рубца, колики у лошадей).
6. Исследование кожевенного и мехового сырья
Для обнаружения Bac. anthracis в кожевенном и меховом сырье применяют реакцию преципитации по Асколи и реакцию диффузионной преципитации (РДП). Эти реакции пригодны и для исследования загнившего патологического материала. Реакция Асколи - достоверный и широко применяемый в практике тест серологической диагностики. При исследовании патологического материала и кожевенно- мехового сырья достоверность реакции 100%. Время исследования подготовленных проб шкур от 10-12 минут до 0,5 часа, в зависимости от состояния кож.
7. Иммунитет.
При сибирской язве механизм и факторы иммунитета многообразны и их разделяют на неспецифические (защитные свойства кожи и слизистых оболочек, влияние ферментов пищеварительного сока, фагоцитоз, породная и возрастная чувствительность) и специфические (клеточный и гуморальный иммунитет).
После выздоровления от сибирской язвы у животных формируется стойкий и длительный специфический иммунитет. В настоящее время установлено, что специфический иммунитет вырабатывается в ответ на воздействие токсина сибиреязвенной бациллы, в состав которого входит протективный, отёчный и летальный факторы. В результате в организме синтезируются защитные противосибиреязвенные антитела (иммуноглобулины), которые и обеспечивают устойчивость животных от заражения при попадании в организм возбудителя. Это так называемый активный иммунитет. Кроме переболевания, активный иммунитет формируется после введения вакцин. Пассивный иммунитет имеет место после введения животным противосибиреязвенной гипериммунной сыворотки.
Для создания активного иммунитета к возбудителю сибирской язвы используют вакцины. Основоположником разработки живой сибиреязвенной вакцины является великий французский учёный Л.Пастер, который в 1881 году впервые аттенуировал капсульный вирулентный штамм путём его выращивания при температуре 42,5-430С и получил авирулентный вакцинный штамм, который стал первой вакциной против сибирской язвы.
8. Современные вакцины.
Принцип изготовления живых сибиреязвенных вакцин заключается в наработке споровой бакмассы на твердых питательных средах.
В 1937 году Стерн получил бескапсульный иммуногенный вариант B.anthracic, который до настоящего времени используется во многих странах мира.
В России, в 1940 году Гинсбург Н.Н. также получил бескапсульный вариант и на его основе разработал вакцину СТИ-1, которая с 1942 г. по 1986 год применялась в нашей стране.
В 1983-1986 годах Бакуловым И.А. и соавторами во ВНИИВВиМ на основе бескапсульного штамма № 55 была создана новая живая вакцина против сибирской язвы, которая используется в нашей стране в настоящее время (ВНИИВВиМ-55). Срок иммунитета составляет 1-1,5 года.
Делались попытки получить сибиреязвенные вакцины их убитых бацилл, но они не вызывали в организме образования стойкого, длительного иммунитета.
При изготовлении вакцин против сибирской язвы обязательной операцией является проверка посевного материала, а также споровой бакмассы и готовой продукции на отсуствие контаминации бактериальной и грибной микрофлорой. Для этого все три вида биоматериала засевают на питательные среды: мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар, мясо-пептонно-печёночный бульон под вазелиновым маслом, бульон и агар Сабуро и ведут за посевами в течение 10 суток.
9. Лечение. Современные средства применяемые для лечения животных, больных сибирской язвой, можно разделить на специфические и неспецифические. К первым относится серотерапия. Еще в 1895 г. Sclavo в Италии, Marchu во Франции и в 1902 г. Юргелюнас в России создали противосибиреязвенную сыворотку, которая в дальнейшем рядом авторов была усовершенствована как по качеству, так и по методам изготовления. По данным многих авторов, массовое применение сибиреязвенной сыворотки в практических условия подтвердилоее эффективность. Ее рекомендуется применять с профилактической и лечебной целями. В последнем случае сыворотку используют при всех формах болезни, причем чем раньше ее вводят, тем эффективней ее действие.
В 1961 г. М.А.Бабич и В.А.Плотникова разработали метод получения противосибиреязвеного гамма-глобулина. Его широко применяют в медицинской практике. Биопромышленность выпускает гамма-глобулины и для ветеринарных целей.
Наряду с этими средствами ученые изискивали и другие лечебные препараты. В частности, были предложены для лечения креолин, новарсенол, 1%-раствор йода, 2%-раствор йодистого калия. При местной форме сибирской язвы (карбункулы, отеки в подчелюстной области рекомендовано инъецировать вокруг патологического фокуса 3-5%-ный раствор кристаллической карболовой кислоты.
Наиболее широко при сибирской язве применяют антибиотики. В ряде работ сообщается об эффективности лечения пенициллином. При этом отмечается быстрое исчезновение возбудителя из мест поражения.
Пенициллин наиболее активен, однако при его использовании иногда наблюдаются аллергические реакции, и он неэффективен при местных поражениях. Предполагается, что пенициллин не может нейтрализовать ткане-повреждающийц фактор, выделяемый бациллами.
Литературные данные свидетельствуют о том, что при сибирской язве биомицин, хлорамфеникол и террамицин обладают примерно одинаковым лечебным действием.
Большинство исследователей объясняют сущность лечебного эффекта антибиотиков результатом их прямого воздействия на микробную клетку. Установлено, что антибиотики (стрептомицин) проникают в рибосомы микробов, где происходит сборка белков из аминокислот, и связывается с рибосомальным белком, обеспечивающим эту сборку, и тем самым тормозят данный процесс.
Специфическое лечение при сибирской язве целесообразно сочетать с применением симптоматических средств, из которых особого внимания заслуживают сердечные, а также глюкоза (внутривенно).
Применение антибиотиков в таких случаях очень целесообразно, особенно с широким спектром их действия. Продолжительность и кратность применения антибиотиков могут быть установлены в каждом случае отдельно. Лечить больных животных необходимо в полной их изоляции, при хорошем кормлении. Ни в коем случае нельзя включать в рацион корма, способные травмировать слизистые оболочки органов пищеварения.