Изучение психотропной активности селенита натрия и селенита цинка в условиях тотальной ишемии мозга
Введение
При сосудистой патологии мозга в клинике отмечается ряд расстройств его деятельности: нарушение поведения, памяти (в том числе, амнезия) эмоционального статуса, тревожные расстройства. Нарушения в онтогенезе нервно-психических процессов, прежде всего когнитивных, могут проявляться не сразу, а через длительный период после патогенетического воздействия. Однако при оказании помощи пациентам практически все системы лечения направлены на ликвидацию уже развившейся патологии, хотя часто церебральной катастрофе предшествует продолжительный период обратимых нарушений, когда ещё возможно превентивное воздействие. Формирование 50% от окончательного объёма инфаркта происходит в течение первых 90 минут с момента развития инсульта, 80% - в течение 360 минут, в связи с чем первые 3-6 часов получили название «терапевтического окна», внутри которого лечебные мероприятия могут быть наиболее эффективными. Время «доформирования» инфарктных изменений после НМК в каждом случае индивидуально и составляет от 3 до 7 суток [1].
Согласно данным литературы окклюзия артерий мозга сопровождается значительной вариабельностью ишемических повреждений и степенью неврологического дефицита. Известно, что продольные гравитационные перегрузки при краниокаудальном векторе ускорения вызывают нарушения кровоснабжения головного мозга. Степень проявления цереброваскулярных нарушений зависит от величины и продолжительности перегрузки, а также от градиента её нарастания и спада, что позволяет их дозировать. Наряду с изменениями показателей мозговой гемодинамики у животных, подвергшихся воздействию гипергравитации, отмечаются изменения неврологического статуса, поведенческой активности и уровня эмоциональной тревожности.
Известно, что антиоксиданты обладают ноотропными свойствами. Учитывая выраженную антигипоксическую активность селенита натрия и селенита цинка представляло интерес изучить их влияние на обучаемость и процессы памяти, на двигательную, ориентировочно-исследовательскую, эмоциональную активность и координацию движений у животных, подвергшихся тотальной ишемии мозга.
1. Изучение влияния селенита натрия и селенита цинка на психоневрологический статус белых крыс, подвергшихся воздействию гравитационных перегрузок (профилактическое введение)
Продольные гравитационные перегрузки создавались центрифугой. В эксперименте использовались белые крысы массой 220-250г, выжившие после перегрузок. Животные были разделены на три исследуемые группы. Контрольную группу составили 7 крыс, получавших изотонический раствор, вторую группу – крысы, которым профилактически до перегрузок вводили селенит натрия в дозе 100 мкг/кг (8 животных). Третьей группе животных (11 крыс) за 10-15 минут до ишемии вводили селенит цинка в дозе 100 мкг/кг. В дальнейшем в каждой группе животных проводилась оценка психоневрологического статуса.
Оценку влияния селенита натрия и селенита цинка на двигательную, ориентировочно-исследовательскую и эмоциональную активность животных проводили в тесте «открытое поле». Установка представляет собой круг диаметром 80 см, с бортиком 20 см, разделённый на 8 радиальных секторов и одним в центре. Тестируемое животное помещали в центральный сектор, спиной к экспериментатору. В течение 3 минут наблюдения регистрировали число пересечённых секторов (двигательная активность), вставание на задние лапы и число пересечённых центральных секторов (ориентировочно-исследовательская активность), количество стереотипных движений (груминг), эмоциональную активность (дефекация, уринация).
Исследование проводили на второй, четвёртый и седьмой день после перенесённых перегрузок. Это позволило следить за динамикой изменений психоневрологического статуса ишемизированных животных.
Результаты проведённых исследований показали, что в постишемическом периоде в контрольных опытах отмечалось понижение двигательной активности, о чём свидетельствует уменьшение числа пересечённых секторов, снижение познавательной активности (уменьшение числа вертикальных стоек) крыс и их эмоционального состояния (уменьшение актов груминга и число дефекаций). Эти нарушения наиболее ярко проявлялись в течение первых дней после ишемии, а в последующие сутки несколько ослабевали. Селенит натрия и селенит цинка при их предварительном до ишемии введении повышали двигательную активность крыс, перенесших ишемию мозга. Более выраженный эффект оказывал селенит цинка, под влиянием которого значительно увеличивалось число пересечённых животными секторов. Профилактическое введение селенита натрия уменьшало у крыс число вертикальных стоек, стереотипных движений и не изменяло число дефекаций по сравнению с контролем, что свидетельствует о некотором снижении исследовательской и эмоциональной активности. Селенит цинка повышал ориентировочно-исследовательскую активность (увеличивал число стоек) и снижал уровень эмоционального состояния (уменьшал акты груминга и дефекаций) крыс в постишемическом периоде.
Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 28 – 30.
Таблица 28.
Показатели психоневрологического статуса контрольной группы животных в постишемическом периоде
| Время эксперимента(сутки) | Исследуемые вещества | Кол-вопройденныхсекторов | Кол-воСтоек | Дефекация | Числоуринаций | Груминг | Кол-вопройденныхцентральных секторов |
| 2 день | физ. раствор | 12,0±2,6 | 7,9±2,7 | 2,4±1,5 | 0,9±0,7 | 2,6±1,1 | 0,0±0,0 |
| 4 день | физ. раствор | 10,6±3,6 | 4,7±2,5 | 2,9±2,1 | 0,7±0,6 | 3,4±0,7 | 0,0±0,0 |
| 7 день | физ. раствор | 13,0±2,6 | 7,0±7,0 | 1,9±1,3 | 0,3±0,5 | 2,3±0,7 | 0,2±0,2 |
Таблица 29
Показатели психоневрологического статуса у животных в постишемическом периоде предварительным введением селенита натрия (100 мкг/кг)
| Время эксперимента(сутки) | Исследуемые вещества | Кол-вопройденныхсекторов | Кол-востоек | Дефекация | Числоуринаций | Груминг | Кол-вопройденныхцентральных секторов |
| 2 день | Селенит натрия | 10,8±1,9 | 4,1±1,0* | 2,3±1,3 | 0,3±0,6 | 1,0±1,0 | 0,1±0,3 |
| 4 день | Селенит натрия | 12,4±3,3 | 5,4±2,2 | 3,3±2,2 | 1,3±0,3 | 1,3±0,8* | 0,1±0,3 |
| 7 день | Селенит натрия | 14,4±2,0 | 6,4±1,2 | 1,3±1,0 | 0,1±0,3 | 1,6±0,8 | 0,3±0,4 |
Примечание - достоверно относительно контроля, * р≤0,05
Таблица 30.
Показатели психоневрологического статуса у животных в постишемическом периоде с предварительным введением селенита цинка (100 мкг/кг)
| Время эксперимента(сутки) | Исследуемые вещества | Кол-вопройденныхсекторов | Кол-востоек | Дефекация | Числоуринаций | Груминг | Кол-вопройденныхцентральных секторов |
| 2 день | Селенит цинка | 15,4±3,9 | 8,0±3,1 | 1,6±1,1 | 0,3±0,4 | 0,5±0,6* | 0,3±0,4 |
| 4 день | Селенит цинка | 14,2±2,2 | 11,3±2,8* | 2,8±2,3 | 0,5±0,6 | 1,0±0,7* | 0,3±0,4 |
| 7 день | Селенит цинка | 17,3±2,4* | 8,7±2,3 | 1,5±1,2 | 0,2±0,3 | 0,9±0,8* | 0,4±0,5 |
Примечание - достоверно относительно контроля, * р≤0,05
Таким образом, полученные экспериментальные данные свидетельствуют, о том, что однократное введение селенита натрия и селенита цинка до ишемии оказало положительное влияние на организм животных в постишемическом периоде. В опытах с предварительным введением исследуемых веществ уменьшился уровень эмоциональной тревожности, увеличилась двигательная активность, а на фоне селенита цинка повышалась и познавательная активность животных по сравнению с контрольной группой.
Для изучения влияния исследуемых соединений на различные фазы памяти - обучение белых крыс проводили через 24 часа после ишемии в методике условного рефлекса пассивного избегания в модификации Буреш, Бурешова. В каждой группе животных проводили тест на воспроизведение УРПИ. При помещении крыс в экспериментальную установку регистрировали латентный период захода (ЛПЗ) крысы в тёмную камеру и время пребывания (ВП) в этой камере в течение 3 минут. Для изучения ЛПЗ и ВП в тёмном отсеке в динамике - исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после обучения животных.
Поскольку обучение животных проводилось после ишемии, а введение исследуемых соединений проводили до ишемии – это позволило судить о степени неврологических нарушений ишемизированных животных. В ходе экспериментов было установлено, что в контрольной группе животных отмечалось ухудшение процессов обучения и процессов воспроизведения памятного следа. Эти эффекты наиболее ярко проявлялись в первые дни наблюдения и несколько ослабевали к седьмому дню наблюдения. Селенит натрия и селенит цинка значительно увеличивали ЛПЗ и ВП. Однако выраженность эффекта селенитов была различной. Наиболее активным оказался селенит цинка. Изучаемые соединения у интактных животных способствовали сохранению навыка УРПИ. Эти данные позволяют сделать вывод, что нарушение памяти крыс, по-видимому, связано с ухудшением процессов фиксации обучения или консолидации памяти (переход кратковременной памяти в долговременную). Полученные экспериментальные данные статистически обработаны и представлены в таблицах 31 - 34.
Таблица 31.
Оценка ЛПЗ у белых крыс получавших селенит натрия и до ишемии мозга
| Исследуемые вещества | Дозы,мкг/кг | Кол-воживотных | Латентный период первого захода крыс в тёмный отсек в сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Физ. раствор | 7 | 88,6±30,2 | 122,1±41,0 | 153,6±24,5 | |
| Селенит натрия | 100 | 9 | 120,6±30,7 | 127,8±40,2 | 147,2±34,8 |
Примечание - достоверно относительно контроля (интактные крысы),