По Кайзерлингу. Раствор I(фиксирующий): вода - 4000 мл, уксуснокислый калий - 85 г, азотнокислый калий - 45 г, формалин -800 мл. Раствор II(восстанавливающий): спирт 90%. Раствор III(консервирующий): вода - 900 мл, глицерин - 300 мл, уксуснокислый калий - 200 г.
По Мельникову-Разведенкову. Раствор I(фиксирующий): формалин - 100 мл, хлористый калий - 5 г, уксуснокислый калий (или натрий) - 30 г, вода - 1000 мл. Раствор II(восстанавливающий цвет): - спирт 85—90%. Раствор III(консервирующий): вода - 100 мл, глицерин - 600 мл, уксуснокислый калий (или натрий) - 400 г.
По Пику. Раствор I(фиксирующий): вода дистиллированная -4000 мл, карловарская соль (искусственная) - 200 г, формалин -200 мл. Раствор II(восстанавливающий цвет): спирт 80-85%. Раствор III(консервирующий): вода дистиллированная - 900 мл, глицерин -540 мл, уксуснокислый натрий (химически чистый) - 270 г.
Отбор материала и подготовка его к фиксации. В патологоанатомических препаратах для сравнения должны быть как пораженные участки органов или тканой, так и здоровые. Извлекая из трупа орган или ткань, надо стремиться сохранять их форму, не нарушать взаимосвязи с другими органами и тканями. Чем дольше лежит труп, тем хуже сохраняется картина патологического процесса (особенно быстро изменяется цвет тканей), тем труднее восстановить их естественный цвет. Предварительная обработка сводится к тому, чтобы удалить все ненужные для демонстрации того или иного процесса ткани (или их обрывки). Своевременно обрезают различные загрязнения, обрывки тканей, отмывают сгустки крови (лучше счищать или оттирать их тряпочкой с водой). После фиксации придать соответствующую форму препарату или снять загрязнения и кровь практически невозможно, не нарушая его внешнего вида. Иногда рекомендуют поместить препарат на несколько часов (4-8) в фиксирующую жидкость, а затем провести его соответствующую обработку.
Фиксирование. Подготовленный соответствующим способом препарат фиксируют в жидкости Кайзерлинга или Мельникова-Разведенкова (раствор I). Для этого на дно посуды (избегать металлической) кладут слой гигроскопической ваты, смоченной в фиксаже, на нее помещают препарат, придают ему соответствующую
форму и заливают жидкостью. Если фиксируют одновременно несколько препаратов, то каждый из них отдельно аккуратно прокладывают ватой (также смоченной фиксирующей жидкостью). Делают это для того, чтобы не было деформаций препарата. Для лучшего проникновения фиксирующей жидкости желательно, чтобы толщина препарата не превышала 3-4 см. Если препараты нельзя сделать требуемой толщины, то до погружения в жидкость в них делают острым ножом надрезы с противоположной для показа стороны, куда вкладывают гигроскопическую вату. Фиксирующую жидкость в толщу препарата можно вводить шприцем. В целый орган или труп мелкого животного фиксирующую жидкость желательно вводить в крупные сосуды или другие естественные каналы под давлением. Внутренние органы из трупа удаляют через разрез брюшной стенки, которую затем аккуратно зашивают. Кишечник извлекают через прямую кишку (или тазовую полость).
Ткани, обладающие способностью быстро сморщиваться, предварительно растягивают на каком-либо твердом предмете (на пробковой пластинке, картоне, тонкой доске) и вместе с ними опускают в фиксирующую жидкость. Отрезки кишечника (слизистой оболочкой вверх) также фиксируют, укрепив на куске картона или пробковой пластинке. Если нужно сохранить и целостность, и толщину полостного органа, фиксирующую жидкость наливают в просвет его, а затем заполняют гигроскопической ватой (или выворачивают слизистой оболочкой наружу, а полость заполняют ватой или хлопчатобумажной материей, придавая органу соответствующий вид).
Полые трубчатые органы (трахея, бронхи, гортань) фиксируют в раскрытом состоянии. Для этого в местах их разреза и разъединения вставляют распорки (стеклянные трубочки или деревянные палочки) так, чтобы они не заслоняли патологический процесс. Под сердечные клапаны кладут кусочки гигроскопической ваты, смоченной фиксирующей жидкостью. Объем жидкости должен превышать объем фиксируемого препарата в несколько раз (обычно в 5-10 раз).
Продолжительность фиксации зависит от размеров органа или ткани и определяется опытным путем. Стенки полостных органов (желудок, мочевой пузырь и др.) фиксируют быстро (1-2 суток), а паренхиматозные органы (сердце, селезенка, почка, легкие и др.) — 1-2 недели (и дольше). Критерием оценки готовности патологического препарата является его уплотнение, равномерное окрашивание с поверхности и на разрезе в грязно-серый или буроватый цвет.
Фиксирующую жидкость (раствор I) можно использовать 2-3 раза, предварительно профильтровав его через вату. Препарат сначала' помещают в раствор, в котором материал фиксировали уже дважды, затем переносят в жидкость, которая в употреблении была один раз, а потом уже в свежий раствор. Если жидкости, бывшей в употреблении, нет, то действие формалина можно умерить (смягчить) добавлением глицерина. Несмотря на кажущуюся простоту, фиксация требует определенных навыков.
До сих пор не найдено универсального (для всех органов и тканей) фиксирующего раствора. Обычно слабые растворы формалина легче (и лучше) фиксируют ткань; сильные растворы, наоборот, уплотняют ее. Применение солевых растворов формалина замедляет уплотнение органа. Крупные (по размеру) органы лучше фиксировать в слабых растворах, а органы и ткани, богатые кровью, — в крепких солевых растворах формалина. Для получения высококачественных препаратов (помимо навыков и умения) необходим индивидуальный подход к каждому препарату с учетом особенностей патологического процесса, состава фиксирующей жидкости. За препаратом, пока он не готов, все время надо следить, своевременно переносить из одной жидкости в другую.
Восстановление цвета препарата. Зафиксированный материал вынимают из жидкости и промывают 12-24 ч проточной водопроводной водой (за неимением последней препарат промывают в большом сосуде, в котором воду меняют каждые 2 ч). Затем жидкости дают стечь, а излишки ее из различных углублений удаляют гигроскопической ватой или хлопчатобумажной материей (хорошо впитывающей влагу). После этого препарат переносят в этиловый спирт с концентрацией не ниже 80-90% (спирт-сырец не пригоден), можно применять ректифицированный (посуду плотно закрывают, чтобы спирт не испарялся). Небольшие органы (во избежание расходования спиртов) обкладывают ватой, обильно смоченной спиртом. Естественный цвет иногда восстанавливается через несколько минут. Однако, чтобы спирт проник в более глубокие слои препарата, его нужно выдерживать от 2 до 12 ч. Сначала препарат помещают в спирт, уже бывший в употреблении, а затем на 1-2 ч в свежий спирт. Если (на ваш взгляд) препарат достаточно восстановил
цвет, процесс нужно приостановить, так как передержка в спирте приводит к обесцвечиванию препарата.
Установлено, что под воздействием этилового спирта метгемоглобин, образующийся при фиксации препарата формалином и придающий органу грязно-серый цвет, переводится в стойкий катгемоглобин (нейтральный гематин), обладающий цветом оксигемоглобина и восстанавливающий естественную окраску органа или ткани. В литературе есть прописи, не содержащие спирт, правда, они менее эффективны.
По Иоресу. Раствор I (фиксирующий и восстанавливающий цвет): вода - 1000 мл, карловарская соль (искусственная) - 50 г, хлоралгидрат (концентрированный) водный раствор - 50 мл. Раствор II (консервирующий): вода - 1000 мл, уксуснокислый калий (или натрий) - 300 г, глицерин - 600 мл.
Консервирование (пропитывание препаратов глицериновой смесью). После восстановления цвета органы или ткани переносят в раствор IIIдля консервирования и длительного хранения. Препарат помещают в стеклянную банку со смесью, покрывают ватой или тряпочкой, чтобы не всплывал. Через 2-3 дня он сам опустится на дно. Держат препараты в этих же глицериновых смесях. При длительном их хранении глицериновая смесь мутнеет в результате перехода в нее красящих веществ из ткани. Может выпадать и осадок. Причины: плохая первичная фиксация, несоблюдение сроков фиксации и объемных пропорций, содержание в препарате повышенного количества пигмента, неправильное хранение (перепад температур) и др. В таких случаях препарат необходимо размонтировать и залить свежей жидкостью. Для удаления осадка и пигмента препарат промывают водой и помещают на 30—60 мин в жидкость по прописи: 1000 мл воды, 30 мл химически чистой концентрированной соляной кислоты в 10 мл азотной кислоты. Промывают 30—60 мин в воде и после выдерживают в 0,5%-ном растворе хлорамина, переносят в 2%-ный раствор хлорной извести, опять промывают водой (проточной) и заливают глицериновой смесью для хранения
Заключение препарата в стеклянную банку (подготовка посуды и монтаж влажных препаратов). Для хранения влажных патологоанатомических препаратов чаще используют прямоугольные стеклянные банки (при необходимости можно и цилиндрические). Они Должны быть прозрачными, не искажать цвет и форму препарата, герметически закрываться. Банки для хранения препаратов готовят заранее. Их тщательно моют щеткой в воде с мылом. Подбирают к ним