Смекни!
smekni.com

работа по предмету фармакогнозии на тему: «прополис» (стр. 3 из 6)

Предварительные опыты и результаты бумажной и тонкослойной хроматографии показывают, что прополис содержит ещё целый ряд до сих пор не идентифицированных соединений. Поэтому в своем иссле­довании авторы стремились их определить.

Анализ проводили по следующей схеме. Экстракция : 1000 г про­полиса экстрагировали в 2 л безводного бензола без нагревания в течение двух дней. После фильтрации раствор бензола был удален дистилляцией в вакууме и осадок экстрагирован одним литром без­водного этилового спирта. Экстракцию вели в течение 24 часов без нагревания. Полученный красно-коричневый раствор подвергли дистил­ляции для полного удаления жидкости и экстрагировали в 500 мл холодной воды в течение 3 дней. Остаток после экстракции пере­кристаллизировали в горячей воде. Выделившиеся кристаллы отде­лили и растворили в 10 мл безводного спирта. Полученный раствор был нанесен на тонкий слой силикагеля и хроматографирован в системе бензол-диоксан-уксусная кислота в соотношении 90 : 25:4. С помощью облучения ультрафиолетовыми лучами было установлено, что хроматограмма содержит 5 соединений. Нами выделенная и опи­санная кофейная кислота имела полосы при R/ = 0,24.

В зоне с Rf = 0,50 находилось вещество, которое имело синюю флуоресценцию под ультрафиолетовыми лучами и эту зону экстраги­ровали этиловым спиртом, упаривали и кристаллизовали.

Из 15 таким образом полученных зон спиртовой экстракт был удален сушкой полностью. Полученные мелкие кристаллы после пе­рекристаллизации в горячей воде имели точки плавления 168°. Так как вещество с такой точкой плавления не было еще обнаружено в прополисе, авторы сосредоточились на его идентификации.

Идентификация. Спиртовой раствор выделенного вещества пока­зал характерные химические реакции на присутствие карбоксильной и гидроксильной групп, двойной связи и реакцию, доказывающую при­сутствие метоксигруппы.

При исследовании спиртового раствора в ультрафиолетовых лучах авторы определили максимум абсорбции гари длине волны 322 тм.

По результатам исследования этого вещества с помощью бумаж­ной и тонкослойной хроматографии,, инфракрасного света и спектра ядерного магнитного резонанса авторы определили, что оно является 4-окси-3-метокси коричной кислотой, которая в химической литературе называется также феруловой и имеет следующую структурную формулу:

оснз

Правильность предположения была доказана исследованием ве­личины R выделенной кислоты и контрольного раствора кислоты. Оба вещества имели одинаковые величины Rf, характер поглощения уль­трафиолетовых и инфракрасных лучей.

Фармакологическое действие. Феруловая кислота отличается ан­тибактериальным действием (грамположительным и грамотрицатель-ным) и способствует бактерицидному и бактериостатическому дей­ствию прополиса, что описано уже несколькими авторами.

Кроме того, проявляется в значительной степени вяжущее дей­ствие, используемое при лечении трудно заживающих ран при помощи мази, приготовленной из спиртового раствора прополиса, и желчевы-делительное действие, описанное в 1938 г.

Феруловая кислота находится главным образом в млечном соке корня Ferula foetida, в смоле Орорапах chironium, Catalpa ovata и в Ajugaiva. Кроме того, имеется также в Equisetum hiemala, Dahlia variabilis и Berberis amurensis/.

В прополис феруловая кислота попадает в основном из смолы Pinus laricis, где эта кислота была "найдена еще в 1876 г. из Pinus cerobra и смолы елей.

С этих растений пчелы очень интенсивно, главным образом, осенью собирают смолу, как основную составную часть прополиса. Пчела может эту кислоту синтезировать и в качестве вторичного про­дукта расщепления гликозидов растений, в которых феруловая кисло­та присутствует как агликон.

Ввиду того, что в пыльце эта ненасыщенная кислота еще . не найдена, обнаружение ее в прополисе служит важным аргументом против теории Кюетенмахера и в пользу того мнения, что прополис собирают пчелы из смолистых выделений почек и коры разных растений. (5,8,9).

4. Влияние на организм.

4.1. Действие прополиса на Pseudomonas Aeroginosa in vitro

Р. И. Анастасиу Ру мыния

По всей вероятности, прополис действует непосредственно, бла­годаря содержащимся в нем антибиотическим веществам или же ка­тализирует действие спирта. Во всяком случае применение in vitro спиртовых растворов прополиса (при концентрации выше 3—6%) вызывает ингибирование роста РА.

Из вышесказанного вытекает, что эффективны только растворы с высокой концентрацией прополиса. Это значит, что при высокой степени заражения РА спиртовые растворы прополиса целесообразно применять только местно. Об этом свидетельствуют и другие изве­стные свойства спиртовых растворов прополиса — гемостатическое, местноанестезирующее, а также местногрофический и регенерирующий эпителии эффект.

При сравнении микробных штаммов зарегистрированы значи­тельные различия между грамположительными возбудителями (очень чувствительными к прополису) и грамотрицательными, в том числе РА (12) (менее чувствительными). (7).

4.2ИНГИБИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОПОЛИСА НА НЕКОТОРЫЕ ВИРУСЫ РАСТЕНИЙ

Прополис обнаружил несомненно ингибирующее действие на все четыре вируса, использованные в опыте, и оно было довольно силь­ным. Три вида из этих вирусов обладали круглыми частицами, но несмотря на то что они сходны, их чувствительность была различной. Самая высокая чувствительность была обнаружена у вируса некроза табака, а самая низкая — у вируса мозаики огурца, соответственно, у его штамма, изолированного с Phytolacca; у четвертого вируса частицы имели вид палочек и, по-видимому, их чувствительность к прополису почти подобна чувствительности круглого вируса некроза табака.

Приведенные результаты четко показывают, что прополис не только сокращает число повреждений на засеянных вирусом листьях, но и явно затормаживает размножение вируса во всем растении.

На данном этапе авторы еще не в состоянии объяснить более выра­женное действие прополиса при пониженных концентрациях (опти­мальные результаты были получены при концентрациях в 10~3 — Ю-7). В этих случаях, речь идет либо о влиянии физиологического состояния растений (опыты были произведены последовательно а не одновременно), либо о действии среды или другого неконтролируемого фактора. Все-таки из последнего опыта можно сделать вывод что прополис сохраняет свою действенность даже в очень низких концен­трациях, что может иметь особое практическое значение в случае воз­можного использования с целью защиты более чувствительных куль­тур, в особенности тепличных, рассады и вообще молодых растений. Ингибирующее действие прополиса на вирусы обладает значительной устойчивостью которая сохраняется в большой мере при более высо­ких температурах.

Предварительные опыты, произведенные с прополисом продемон­стрировали его сильное ингибирующее действие на три вида сфери­ческого вируса — соответственно вирус мозаики огурца, изолирован­ный с Phytolacca americana, вирус пятнистости табака и вирус некро­за табака, изолированного с бересклета, а также палочкообразный вирус мозаики табака. Прополис сокращает не только число повреж­дений на засеянных вирусом листьях но, одновременно, явно затор­маживает размножение вируса во всем растении. Прополис проявил высокую активность и в случае пониженных концентраций, что может иметь значение для использования этого вещества в практике меро­приятий по защите культур. (9,10).

4.3ВЛИЯНИЕ ПРОПОЛИСА НА РЯД ВИДОВ МИКРООРГАНИЗМОВ И ПЛЕСЕНЕЙ

В работе авторы хотели выявить антимикробное действие прополиса па некоторые виды микроорганизмов. Его аитнмнкробное действие было доказано многими авторами. ЛИНДЕНФЕЛСЕР считает, что он оказывает общее бактериостатическое и фунгистатическое воздей­ствие, главным образом на грамположительные бактерии. Прополис не действовал ни на одну из двух испытанных дрожжевых культур.

Из проведенных опытов установлено, что прополис оказывал бактерицидное действие на большинство испытанных микроорганиз­мов, в особенности на грамположительные кокки Micrococcus lysodeicticus, Sarcina lutea, Staphylococcus aureus, на грамотрицательные бациллы — Bacillus subtilis, на грамположительные — Corynebacte-rium equi, а также на некоторые виды плесеней — Aspergillus ochra-ceus и дрожжей — Saccharomyces cerevisiae.

Разные концентрации прополиса в этиловом спирте не обнару­жили существенного различия — до концентрации 1 : 10, имевшей самую низкую эффективность.

Не установлено разницы между действием прополиса, раство­ренного в этиловом спирте, и прополиса в растворе этилового спирта, разбавленного водой.

В серии опытов, проведенных для определения термостабиль­ности прополиса, достоверных различий не отмечено. Можно предпо­лагать что прополис является термостабильным веществом. Это его свойство было выявлено и КИВАЛКИНОЙ.

Относительный бактерицидный эффект прополиса соответствует бактерицидному эффекту 16 е пенициллина и 25 е фунгицидина.

Следует отметить, что на результаты проведенных испытаний могло повлиять — скорее отрицательно — одно из свойств прополиса, а именно его растворимость в спирте, по сравнению с его возможной растворимостью в воде. Авторы считаем, что несмотря «а то, что испаре­ния этилового спирта из роликов удалось относительно эффективно избежать (благодаря тому, что верхняя половина чашки Петри опи­ралась непосредственно на ролики), процесс испарения все же проис­ходил вследствие диффузии раствора в твердой среде. Этим же можно объяснить отрицательный результат полученный при испытании влия­ния этилового спирта на подопытные виды микроорганизмов. Были использованы максимально-точные методы титрования, так как даже очень небольшая концентрация этилового спирта в жидкой культуре имеет бактерицидное действие.