6.6. При подозрении на заболевание ТОРС
Кровь
Для исследования методом ПЦР необходимо использовать плазму крови. Для проведения ИФА с тест-системой "ИФА-АНТИ-SARS-СоV" возможно использование сыворотки или плазмы крови. Для получения плазмы забор крови производят натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа "Venoject" (с ЭДТА), "Vacuette" (сиреневые крышки - 6% ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносят в одноразовую пластиковую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:20 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9). Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя! Пробирку закрывают крышкой и аккуратно переворачивают несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Для получения сыворотки забор крови проводят натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или в стеклянную пробирку типа Vacuette - без антикоагулянта. При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносят в одноразовую стеклянную пробирку.
Фекалии
Используют пробы фекалий массой (объемом) 1-3 г (1-3 мл). Фекалии забирают из предварительно продезинфицированного горшка или подкладного судна, не имеющего следов дезсредств. Пробу в количестве 1 грамма (примерно) отдельным наконечником с аэрозольным барьером или одноразовыми лопатками переносят в специальный стерильный флакон.
Мазки из полости носа
Мазки (слизь) берут сухими стерильными ватными тампонами. Тампон вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем тампон слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой. Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращают зонд в течение 10-15 секунд, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и закрывают пробирку.
Мазки из ротоглотки
Мазки берут сухими стерильными ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой. Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращают зонд в течение 10-15 секунд, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и закрывают пробирку.
Смывы из полости носа
Забор материала производят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода поочередно с помощью зонда или одноразового шприца вводят по 3-5 мл теплого стерильного изотонического раствора натрия хлорида. Промывную жидкость из обоих носовых ходов собирают через воронку в одну стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования.
Смывы из ротоглотки
Перед забором смывов из ротоглотки проводят предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 сек.) 8-10 мл изотонического раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования.
Мокрота
Забор материала осуществляют в количестве не менее 0,5 мл в одноразовые градуированные стерильные флаконы (пробирки) с широким горлом и завинчивающимися крышками объемом не менее 50 мл.
Секционный материал
В качестве секционного материала используются ткани легких, сегментарные бронхи, кровь, образцы фекалий. Секционный материал тканей легких и бронхов собирают в одноразовые полипропиленовые пробирки с завинчивающимися крышками объемом 50 мл. Манипуляции с образцами крови и фекалий указаны выше.
Транспортировку клинического материала осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом: при температуре 2-8 град. C - в течение 6 часов; в замороженном виде - в течение 1 суток.
6.7. При подозрении на заболевание оспой
Для исследования берут кровь, соскоб папул, содержимое везикул, пустул, корки, отделяемое слизистой носоглотки. Техника забора материала - как и при других особо опасных инфекционных болезнях.
6.8. При подозрении на заболевание человеческим гриппом,
вызванным новым подтипом вируса
Для исследования забирают следующие виды клинического материала:
- смывы из полости носа и ротоглотки (для ОТ-ПЦР анализа);
- мазки из полости носа (для МФА и ОТ-ПЦР анализа) и ротоглотки (для ОТ-ПЦР анализа);
- носоглоточное отделяемое (для выделения вируса, для ОТ-ПЦР анализа);
- фекалии (для ОТ-ПЦР анализа).
6.9. При подозрении на заболевание желтой лихорадкой и
лихорадкой Денге
Для исследования берут следующий материал:
- кровь из вены - 10 мл (в 2 пробирках по 5 мл); готовят сыворотку крови;
- секционные пробы органов (печень, селезенка).
6.10. При подозрении на заболевание лихорадкой
Западного Нила
Для исследования берут следующий материал:
- кровь из вены - 10 мл (в 2 пробирках по 5 мл); готовят сыворотку крови;
- спинномозговую жидкость (по показаниям);
- секционные пробы органов (головной мозг, печень, селезенка).
6.11. При подозрении на заболевание Крымской
геморрагической лихорадкой
Для исследования берут следующий материал:
- кровь из вены - 10 мл (в 2 пробирках по 5 мл); готовят сыворотку крови;
- секционные пробы органов (головной и спинной мозг, печень, селезенка, легкие, почки).
6.12. При подозрении на заболевание лихорадкой
Рифт-Валли
Для исследования берут следующий материал:
- кровь из вены - 10 мл (в 2 пробирках по 5 мл); готовят сыворотку крови;
- смывы из зева;
- секционные пробы органов (печень);
- фекалии.
6.13. При неустановленном диагнозе
В зависимости от формы проявления заболевания для исследования берут следующий материал:
- кровь из вены - 10 мл (в 2 пробирках по 5 мл);
- слизь из зева (стерильным тампоном);
- мокроту;
- мочу - 100 мл стерильным катетером в стерильный флакон (банку);
- отделяемое патологических образований на коже - стерильным скарификатором;
- пунктат бубонов, лимфоузлов, отеков, других воспалительных образований.
Методика забора материала такая же, как при подозрении на чуму, для фиксации мазков используют 96 град. спирт с добавлением 3% перекиси водорода (конечная концентрация). Режим обеззараживания в Приложении 9.
6.14. Упаковка и транспортирование материала
Все материалы (пробы) должны быть пронумерованы и последовательно "дважды упакованы":
- в транспортную емкость (плотно закрывающиеся пробирки, флаконы с завинчивающейся пробкой и другие емкости). Плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой для надежности заклеивают, например, парафинизированным полиэтиленом (парафильмом). Транспортную емкость обрабатывают снаружи дезраствором;
- в пластиковый пакет подходящего размера с небольшим количеством любого адсорбирующего материала, например, ваты. Пластиковый пакет следует заклеить или запаять;
- не допускается упаковка образцов материалов от разных людей в один и тот же пакет.
Заклеенные пакеты с образцами помещают внутрь дополнительного пластикового контейнера с завинчивающейся крышкой. Строго дважды упакованные образцы материалов от разных пациентов могут быть транспортированы в одном дополнительном контейнере. В дополнительный контейнер также следует положить некоторое количество адсорбирующего влагу материала.
При транспортировании проб на значительные расстояния их помещают в специальный переносной термоизолирующий контейнер, укомплектованный охлаждающимися элементами или льдом. Контейнер, термоконтейнер опечатывают и транспортируют в лабораторию. Пробы отправляют в лабораторию специальным транспортом в сопровождении 2-х человек, один из которых медицинский работник. Каждую пробу материала сопровождают бланком направления по форме, прикрепленным к наружной стенке контейнера.
Транспортирование проб клинического материала в референтную лабораторию (референс-центр) для дальнейшего исследования с целью подтверждения результатов осуществляется нарочным, информированным о правилах доставки материала.
Сопроводительные документы составляют в двух экземплярах: один отправляют вместе с пробами в лабораторию, второй (копия) остается у лица, направляющего пробы на исследование. В сопроводительном документе указывают фамилию, имя, отчество, возраст больного, диагноз, даты начала заболевания и взятия материала, часы забора, характер материала для исследования, примененные антибиотики (дата и доза), фамилию и должность медицинского работника, забравшего материал.
Мазки при подозрении на малярию высушивают на воздухе, завертывают в обычную бумагу, помещают в полиэтиленовый пакет, снабжают этикеткой.
Пробы направляют в лаборатории, имеющие разрешение на работу с соответствующим возбудителем, предусмотренные в комплексном плане по санитарной охране территории.