Все участники настоящего клинического исследования дали письменное согласие на его проведение с учетом рекомендаций, касающихся экспериментов с участием людей. (стр. 1 из 2)
Сохранение иммунологической памяти в течение 13 лет у реципиентов рекомбинантной HBV вакцины.
Barbara Watson a*, David J. West b , Andrew Chilkatowsky a ,
Sharon Piercy a , Virginia A. Ioli b
aAlbert Einstein Medical Center & The Philadelphia Department of Health, Di6ision of Disease Control, Immunization Program,
500 S. Broad Street, Philadelphia, PA 19146, USA
bMerck Research Laboratories, West Point, PA 19486, USA
Реферат
Все участники настоящего клинического исследования дали письменное согласие на его проведение с учетом рекомендаций, касающихся экспериментов с участием людей. Бустерная доза вакцины, введенная 18 подросткам (иммунизированным в детском возрасте) и 7 взрослым людям, прошедшим 13 годами ранее курс вакцинации (3 дозы) рекомбинантной вакциной против гепатита В, индуцировала мощный вторичный гуморальный ответ, подтвердив наличие иммунологической памяти к HBsAG у вакцинируемых. Через неделю после бустерной вакцинации GMT анти-HBs выросли в 11-24 раза, достигнув 52-319-кратного увеличения по истечении 4 недель. Обращает на себя внимание тот факт, что выраженный иммунный ответ на бустерную дозу вакцины наблюдался даже у тех участников исследования (5человек), у которых титр анти-HBs до бустерной иммунизации составлял менее 10 mIU/ml.
1.Введение
Первостепенной задачей программ вакцинации против гепатита В является достижение максимального охвата прививками путем проведения первичного курса иммунизации, в результате которого у преобладающей части вакцинируемых формируется протективный уровень антител. Многочисленные исследования эффективности плазменных HBV вакцин продемонстрировали пост-вакцинальное образование антител к HBsAg (анти-HBs) на уровне, превышающем или равном 10 милли-Международных Единиц в 1 миллилитре сыворотки (mIU/ml), что обеспечивает защиту от клинически выраженной HBV-инфекции [1]. Однако, насколько продолжителен пост-вакцинальный иммунитет? Существует ли необходимость по прошествии очень длительного периода времени в бустерной дозе вакцины для поддержания иммунитета?
Уровень анти-HBs, как было показано, падает после завершения курса вакцинации, особенно стремительно в первый год и более плавно - в последующие [2]. В то время, как скорость снижения содержания антител не зависит от первоначального поствакцинального титра, у вакцинируемых с более высокими титрами, как было показано, антитела сохраняются в течение более длительного периода времени. Однако, здоровые вакцинируемые, у которых уже не обнаруживаются антитела, сохраняют HBsAg-специфические лимфоциты [3]. Стимуляция таких клеток памяти HBsAg вызывает стремительную пролиферацию клеток, приводящую к развитию мощного вторичного (анамнестического) увеличения титра анти- HBs. В 1995 году, просмотрев литературу, мы обнаружили 10 сообщений о том, что здоровые люди, адекватно отреагировавшие на первичный курс иммунизации против гепатита В, в том числе и те, у которых впоследствии анти- HBs антитела не выявлялись, на введение бустерной дозы вакцины через 5-12 лет отвечали бурным вторичным увеличением титров специфических антител [1]. Если этот вид иммунного ответа на антигенную стимуляцию с участием клеток памяти, сопровождающийся синтезом антител, отражает путь, по которому вакцинируемый отреагировал бы на реальную “атаку” вируса, то, возможно, в бустерной вакцинации для поддержки иммунологической защиты от инфекции и нет необходимости. Действительно, данные 13 длительных наблюдений за здоровыми людьми, входящими в группу риска и прошедшими вакцинацию, подтверждают, что вакцин-индуцированная иммунологическая память обеспечивает иммунную защиту, несмотря на то, что уровень сывороточных антител падает [1]. Многие из участников этих исследований имели изолированное повышение анти- HBs, у некоторых из них сероконверсия с образованием антител к ядерному антигену HBV (анти-HBc) свидетельствовала о легком течении инфекции. Однако, ни у одного не было зарегистрировано клинически выраженного гепатита В, и лишь небольшая часть оказалась HBsAg-позитивной. В 1998 году группа Европейских экспертов, проанализировав данные дополнительных исследований, пришла к выводу, что вакцин-индуцируемая иммунологическая память сохраняется, по крайней мере, на протяжении 15 лет, однако на вопрос: «существует ли необходимость в бустерной вакцинации для поддержания протективного иммунитета и, если существует, то когда?» могут ответить только более долговременные исследования [4].
Большинство из опубликованных данных о персистенции вакцин-индуцируемой иммунологической памяти через пять лет и более касаются субъектов, вакцинированных одной из первого поколения плазменных вакцин против гепатита В. Поскольку сегодня плазменные вакцины активно вытесняются рекомбинантными, очень важно показать, что последние также приводят к появлению долгоживущих клеток иммунологической памяти. Настоящая статья представляет результаты наблюдения за состоянием иммунологической памяти в небольшой группе здоровых подростков (иммунизированных в детском возрасте, от 13 месяцев до 9 лет) и взрослых, 13 годами ранее прошедших первичный курс иммунизации рекомбинантной HBV вакциной RECOMBIVAX HBÒ.
2. Методы
Протокол исследования и согласительная форма были одобрены AEMCIRB (Albert Einstein Medical Center Institutional Review Board). Списки были составлены из участников предыдущего исследования, проведенного в 1984-1985 гг.., у которых титры анти-HBs после завершения первичного курса иммунизации рекомбинантной вакциной против гепатита В (три дозы RECOMBIVAX HBÒ, Merck & Co., Inc.) составляли ³ 10 mIU/ml. В группу обследуемых вошли подростки, привитые в детском возрасте (1-10 лет) и взрослые, не получавшие какой-либо дополнительной дозы вакцины. Все участники предыдущего исследования вакцинировались с интервалами 0, 1, 6 месяцев; дети получали HBsAg в дозировке 1.25 mcg/0.25 ml , 2.5 mcg/0.5 ml или 5 mcg/0.5 ml, взрослые – 10 mcg/1.0 ml. В списки потенциальных кандидатов вошли 80 человек, вакцинированных в детском возрасте и 18 взрослых. Всем им было сообщено о предстоящем исследовании почтовым сообщением, за которым через две недели следовал телефонный звонок. Три письма и телефонный звонок были адресованы тем, с кем не удалось установить связь с первой попытки.
Процедура исследования включала (1) опрос относительно проведения бустерной вакцинации или возможного контакта с HBV (прошедшие бустерную вакцинацию не могли участвовать в исследовании); (2) исходный анализ крови на наличие анти-HBs и тест на анти-HBc; (3) введение 5 mcg/0.5 ml бустерной дозы RECOMBIVAX HBÒ подросткам, прошедшим первичный курс иммунизации в детском возрасте (Группа 1), или 10 mcg/1.0 ml бустерной дозы RECOMBIVAX HBÒ - тем, кто прививался уже во взрослом возрасте (Группа 2); (4) анализ крови через 1 и 4 недели после бустерной вакцинации для оценки анти-HBs ответа. Участникам исследования были выданы вакцинальные регистрационные карты, в которых их просили записывать температуру тела через 4-6 часов после прививки и ежедневно в одно и то же время в течение 5 дней, а также отмечать любые реакции в месте инъекции или жалобы общего характера.
Проба сыворотки “пред-вакцинального” образца крови отправлялась в CCLS (Covance Central Laboratories Services – Indianapolis, IN), где проводилось тестирование на предмет наличия анти-HBc иммуноферментным анализом (ИФА). Равное количество сыворотки «пред-вакцинального» образца, а также крови, взятой через 1 и 4 недели после бустерной вакцинации, проходили анализ в Исследовательской Лаборатории Merck (West point, PA) радиоиммунным методом с использованием тест-систем AUSABÒ(Abbott Laboratories – North Chicago, IL).
За анамнестический (вторичный) ответ на бустерную вакцинацию принималось четырех- или более кратное увеличение титра анти-HBs через 1 неделю после иммунизации у тех вакцинируемых, у которых были обнаружены антитела при предварительном обследовании, или появление анти- HBs в титре ³ 10 mIU/ml у тех, у кого их до введения бустерной дозы не было.
3. Результаты
Были отобраны двадцать пять человек (девять мужчин и 16 женщин), участвовавших в предыдущем исследовании, соответствующих перечисленным требованиям и давших согласие на участие в настоящем эксперименте. Среди них: 18 (22%) из 80 подростков, прошедших первичный курс вакцинации в детском возрасте от 13 месяцев до 9 лет (Группа 1) и 7 (22%) из 18 взрослых людей, первично вакцинированных в возрасте 30-54 года (Группа 2). Восемь участников предыдущего исследования уже прошли бустерную иммунизацию и не соответствовали критериям отбора. Другие 30 человек отказались участвовать в исследовании, и с 35 - так и не удалось связаться. К моменту бустерной вакцинации возраст подростков, входящих в Группу 1, варьировал от 14 до 23 лет, в то время как возраст участников Группы 2 составил 43-67 лет.
Все участники исследования хорошо перенесли бустерную вакцинацию без клинически выраженных реакций. Из 18 подростков, входящих в Группу 1, пять отметили небольшую болезненность в месте инъекции в первые два дня после вакцинации, жалоб общего характера не было. В Группе 2 (7 человек) было зарегистрировано две жалобы на болезненность в области укола. Двое участников жаловались на тошноту на второй день после прививки, и один – отметил мышечную боль на 1 и 2 дни после вакцинации.
 Через 4 недели после бустера | Кратное увеличение | 52а | 319а | ||||||||
| GMT (mIU/ml) | 13125 | 9562 | |||||||||
| n | 18 | 0 | 0 | 0 | 18 | 7 | 0 | 0 | 1 | 6 | |
| % | 100 | 0 | 0 | 0 | 100 | 100 | 0 | 0 | 14.3 | 85.7 | |
| Через 1 неделю после бустера | Кратное увеличение | 11а | 24а | ||||||||
| GMT (mIU/ml) | 2776 | 735 | |||||||||
| n | 18 | 0 | 0 | 2 | 16 | 7 | - | 1 | 1 | 5 | |
| % | 100 | 0 | 0 | 11 | 89 | 100 | 14.3 | 14.3 | 57 | 71.4 | |
| Перед бустерной вакцинацией | GMT (mIU/ml) | 254 | 30 | ||||||||
| N | 18 | 1 | 2 | 2 | 13 | 7 | 1 | 1 | 1 | 4 | |
| % | 100 | 6 | 11 | 11 | 72 | 100 | 14.3 | 14.3 | 57 | 14.3 | |
| После первичной вакцинации | GMT (mIU/ml) | 7164 | 3078 | ||||||||
| n | 18 | 0 | 0 | 0 | 18 | 7 | 0 | 0 | 0 | 7 | |
| % | 100 | 0 | 0 | 0 | 100 | 100 | 0 | 0 | 0 | 100 | |
| Титр Анти-HBs | все | 2 | <2-9.9 | 10-99 | ³100 | все | 2 | <2-9.9 | 10-99 | ³100 | |
| Группаа (возраст во время бустера) | Группа1 | Группа 2 |
В Таблице 1 показано, каким образом распределялись уровни анти-HBs в Группах 1 и 2 после первичного курса иммунизации рекомбинантной вакциной, до бустерной вакцинации и через 1 и 4 недели после нее. У всех участников исследования в обеих группах титры анти-HBs антител через месяц после первичного курса иммунизации составляли ³ 100 mIU/ml, однако, через 13 лет произошло значительное снижение содержания антител. В группе подростков (Группа 1) GMT анти-HBs упал с 7164 mIU/ml до 254 mIU/ml, и у троих из 18 (17%) уровень антител оказался < 10 mIU/ml. Сходная динамика наблюдалась в Группе 2, где GMT снизился c 3078 mIU/ml до 30 mIU/ml, и двое из семи (29%) имели < 10 mIU/ml анти-HBs. Все участники исследования были анти-HBc-отрицательны.