Пролиферативная активность спленоцитов мышей C57BL6, оцененная на пике иммунного ответа на эритроциты барана (на 4-е сутки после иммунизации), оказалась достоверно выше таковой у мышей линии СВА (табл. 11).
Таблица 11. Пролиферативная активность спленоцитов мышей C57BL6 и СВА на пике иммунного ответа
| Линия мышей | Группа | Индекс стимуляции (число импульсов в опыте/число импульсов в контроле) |
| СВА | Контроль (6) | 31,8 |
| C57BL6 | Контроль (6) | 9,2 |
Спленоциты мышей опытной группы линии C57BL6 включают 3Н-тимидин значительно активнее спленоцитов мышей опытной группы (обработанных на пике иммунного ответа монардой) линии СВА.
Учитывая литературные данные о генетической рестрикции силы иммунного ответа, реализуемой на уровне Т-клеток, можно говорить о способности некоторых РАВ (в частности, монарды) к фенотипической коррекции клеточного компонента иммунного ответа.
Экспериментально установленный факт возможности фенотипической коррекции компонента иммунного ответа имеет существенное практическое значение, поскольку решение этого вопроса может способствовать повышению эффективности лечения.
Влияние РАВ на функцию гипофизадреналовой системы, гуморальный и клеточный ответ. Изучена взаимосвязь между нейроэндокринными сдвигами в организме экспериментальных животных, подвергнутых действию РАВ, и иммунным ответом. Использованы мыши-самки гибридов Fl (CBAXC57BL6) и СВА. Животные ежедневно по 40 мин (кроме субботы и воскресенья) в течение 10, 20 и 30 дней находились в камере, воздух которой содержал летучие компоненты различных РАВ в концентрации 20 мг/м.куб.
Исследовали гуморальный иммунный ответ на эритроциты барана в реакции Ерне. Во второй части работы исследовали клеточный иммунный ответ по способности клеток лимфатических узлов мышей СВА инактивировать эндогенные стволовые клетки в сублетально облученном организме гибридов Fl (CBAXC57BL6) [Петров Р.В. и др., 1970]. Иммунизацию осуществляли в дозе 2 -Ю8 в боковую вену хвоста в объеме 0,5 мл среды 199. Иммунный ответ оценивали на 5-е сутки после иммунизации по числу антителообразующих клеток в селезенке в дозе 2-106 степени спленоцитов. Оценку клеточного иммунного ответа проводили на 8-е сутки после внутривенного введения клеток лимфатических узлов по числу колоний на селезенке.
Рис. 8. Влияние РАВ на гуморальный иммунитет: повышение уровня кортикостерона при вдыхании ароматических веществ (черные столбики). При вдыхании аромата шалфея число АОК снижалось.
1 — монарда; 2 — базилик; 3 — лаванда; 4 — шалфей; 5 — полынь лимонная; К — контроль; а — исследование через 10 дней от начала опыта; б — через 20 дней; в — через 30 дней.
Функцию гипофизадреналовой системы оценивали по уровню кортикостерона. Концентрацию этого гормона определяли в сроки исследования гуморального иммунного ответа в плазме крови радиоиммунным методом. Пробы крови забирали у животных каждой из исследуемых групп на 10-е, 20-е и 30-е сутки.
Установлено, что реакция иммунной системы как клеточного, так и гуморального ее компонентов на РАВ в целом изменялась стадийно: в первые 10 дней ингаляций иммунный ответ не менялся или угнетался, а в дальнейшем, к 20-й ингаляции — усиливался, а к 30-м суткам вновь ослаблялся (рис. 8).
Отмеченная в динамике ингаляций модуляция иммунного ответа коррелировала с активностью гипофизадреналовой системы. Повышение концентрации кортикостерона в плазме крови, наблюдаемое к 20-м суткам, соответствовало периоду усиления иммунного ответа, а концентрация, близкая к уровню гормона в контрольной группе (10-е и 30-е сутки), — периоду угнетения.
Подтверждением включения гуморального механизма в регуляцию иммунного ответа при действии РАВ является и тот факт, что воздействие сопровождается резким нарастанием уровня гормонов. Мягкое воздействие, оказываемое всеми другими препаратами, наоборот, усиливает иммунный ответ.
Влияние РАВ на функцию гипофизадреналовой системы и клеточный иммунный ответ. Известно, что феномен инактивации несингенных стволовых клеток обусловливается действием живых лимфоцитов на чужеродные кроветворные стволовые клетки. Облученные сублетальной дозой лимфоциты не инактивируют кроветворные стволовые клетки. Полагают, что инактивирующее (тормозящее) действие лимфоцитов распространяется и на другие несингенные стволовые (пролиферирующие) клетки, например раковые, и что данный феномен является одним (возможно, главным) механизмом иммунологического надзора и элиминации соматических мутаций [Петров Р.В. и др., 1981].
Суть активации несингенных стволовых клеток состоит в том, что лимфоциты способны подавлять генетически отличающиеся клетки в самом начале их возникновения, т.е. препятствовать формированию мутантных клеток. Растительные ароматы повышают активность несингенных стволовых клеток, снижая тем самым риск развития онкологического заболевания.
Результаты исследований представлены на рис. 9. Как видно из представленных данных на 20-е сутки эксперимента под влиянием РАВ наблюдалось тормозящее действие лимфоцитов на несингенные стволовые клетки, что сочеталось с повышением в крови уровня кортикостерона. На 30-е сутки содержание кортикостерона в крови экспериментальных животных снизилось до исходного уровня, что сопровождалось одновременным снижением тормозящего действия лимфоцитов на несингенные стволовые клетки.
В проводимых экспериментах мы наблюдали стадию тревоги в сочетании с состоянием неспецифического напряжения, при котором в организм РАВ поступали и повышалась функция коры надпочечников, а как следствие — увеличивалась резистентность организма за счет стимуляции клеточного и гуморального звеньев иммунитета. В конечном счете все эти изменения в организме привели на 30-й день к нормализации нарушенного равновесия организма с внешней средой.
Действие эфирных масел на иммунную систему животных в различных газовых средах. Исследована функциональная активность иммунной системы в условиях одновременного и длительного содержания мышей в гермообъемах с ИА, ЕА и БИА. Результаты исследований показали, что пребывание мышей в течение месяца в атмосфере, лишенной растительных ароматических биорегуляторов (ИА), сопровождалось достоверным (Р<0,01) увеличением в селезенке количества антителообразующих клеток.
Введение в состав искусственной атмосферы РАВ монарды достоверно нормализовало количество АОК мышей, находящихся в БИА (табл. 12).
Рис. 9. Фагоцитарная активность макрофагов, полученных от мышей, которым вводили эфирные масла.
1 — контроль; 2 — ЭМ монарды; 3 — ЭМ базилика.
Таблица 12. Число клеток прямых АОК селезенки мышей в различных газовых средах
| Газовая среда | Число прямых АОК селезенки | |
| на 106 клеток селезенки | на всю селезенку | |
| Искусственная атмосфера (лишенная РАВ) | 2,83 | 930 |
| Естественная атмосфера | 1,49 | 333 |
| Биогенизированная атмосфера | 2,78 | 713 |
Первичный иммунный ответ у мышей после длительного пребывания в условиях искусственной атмосферы также претерпевал значительные изменения. Число прямых антителообразующих клеток селезенки достоверно превышало их число у мышей контрольной группы. Сходная картина выявлена при расчете числа АОК на всю селезенку. При этом число АОК у мышей, содержащихся в условиях искусственной атмосферы, превышало контрольные цифры почти в 3 раза. Введение эфирного масла монарды сопровождалось достоверным снижением выраженности первичного иммунного ответа.
Таким образом, длительное пребывание экспериментальных животных в условиях искусственной атмосферы сопровождалось изменениями иммунной системы, а именно — увеличением числа клеток селезенки и более активным формированием первичного иммунного ответа.
Введение растительных ароматических веществ монарды в состав искусственной атмосферы нормализует эффект ее влияния на иммунную систему, что подтверждается уменьшением числа клеток в селезенке.
Изучение титра гемагглютининов у крыс-самцов линии Wistar в различных газовых средах выявило, что интенсивность иммунного ответа на эритроциты барана была выше в искусственной атмосфере (In обратного титра составил 7,5), чем в естественной атмосфере (6,2; Р<0,05).
Биогенизация искусственной атмосферы растительными ароматами лаванды привела к нормализации титра гемагглютининов (In обратного титра составил 6,5), приближая его к контрольным показателям (6,2; Р<0,05).
Приведенные данные свидетельствуют о том, что и в первой, и во второй серии экспериментов показатели иммунной системы животных, содержащихся в ИА, отличались от данных, полученных в ЕА. Это отличие заключалось в активации интенсивности иммунологических реакций в условиях ИА. Возможно, что активация иммунитета была обусловлена более высокой микробной обсемененностью воздуха искусственной атмосферы.
При введении РАВ лаванды и монарды в природных концентрациях в состав ИА отмечена нормализация некоторых показателей. Активность воздействия ароматов лаванды была выше, чем активность воздействия эфирного масла монарды.
Очевидно, действие РАВ на выраженность иммунологических реакций можно объяснить, с одной стороны, снижением микробной обсемененности воздуха в гермообъеме под влиянием РАВ эфирных масел, а с другой — их непосредственным воздействием на измененные иммунологические реакции организма животных. В пользу последнего свидетельствуют и данные, полученные в лаборатории, показавшие, что РАВ монарды, базилика, лаванды в природных концентрациях стимулируют функциональную активность Т-звена иммунитета при экспериментальных вторичных иммунодефицитах, проявляя отчетливую иммуномодулирующую активность на моделях первичного и вторичного иммунных ответов.