Сульфаты. Раствор 0,2 г препарата в 10 мл Н2О должен выдерживать испытания на сульфаты (не более 0,05% в препарате).
Органические примеси. Раствор 0,15 г препарата в 5 мл концентрированной серной кислоты должен быть бесцветным.
Хранение. Список Б. Вхорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.
Высшая разовая доза внутрь и под кожу 0,05 г.
Высшая суточная доза внутрь и под кожу 0,15 г.
3.5. Solutio Eppedrini hydrochloridi 5% pro injektionibus
Раствор эфедрина гидрохлорида 5% для инъекций
Состав: Эфедрина гидрохлорида......................... 50 г
Воды для инъекций.................................. до 1 л
Раствор фильтруют, разливают в ампулы нейтрального стекла по 1 мл и стерилизуют текучим паром при 100° в течение 30 мин.
Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.
Подлинность. 1 мл препарата разводят водой до 5 мл. Полученный раствор дает реакции подлинности, указанные для «Ephedrini hydrochloridum».
рН = 4,5 – 7,0
Хранение. Список Б. В защищенном от света месте.
Высшая разовая доза внутрь и под кожу 0,05 г
Высшая суточная доза внутрь и под кожу 0,15 г.
1. Реакция с хлоридом окисного железа
Адреналина гидрохлорид при добавлении FeCl3 окрашивается в изумрудно-зеленый цвет, переходящий от прибавления одной капли раствора аммиака в вишнево-красный, а затем в оранжево-красный.
2. Реакция азосочетания
Адреналин, как соединение, содержащее фенольную группу, обладает способностью сочетаться с солями диазония. В качестве диазореактивов применяют обычно диазотированную сульфаниловую кислоту. При взаимодействии диазобензосульфокислоты с фенолами в щелочной среде образуются азокрасители; сочетание протекает в пара- или орто- положении к гидроксильной группе.
Выполнение реакции : 1 мл 0,1% адреналина гидрохлорида растворяем в воде, прибавляем 5 – 6 капель диазореактива и через 3 – 5 мин – 2 – 3 капли раствора едкого натра; при этом возникает темно-красное окрашивание.
3. Реакция с фосфорномолибденовой кислотой
Фосфорномолибденовая кислота в кислом или нейтральном растворе не окисляет слабые восстановители. В щелочной среде окислительная способность фосфорномолибденовой кислоты значительно повышается, в результате чего происходит окисление многих соединений, в молекуле которых содержится фенольный гидроксил; фосфоромолибдат при этом восстанавливается до так называемой молибденовой сини, как следствие этого появляется синее или зеленое окрашивание.
Выполнение реакции: 1 мл 0,1% адреналина гидрохлорида растворяем в 1 мл воды и прибавляем 5 – 6 капель 10% раствора фосфорномолибденовой кислоты; адреналина гидрохлорид 0,1% приобретает зеленое окрашивание; после прибавления раствора аммиака появляется интенсивное темно-фиолетовое окрашивание.
4. Реакция окисления.
Препараты, содержащие в молекуле фенольный гидроксил окисляются раствором йодата калия в кислой среде, образуя окрашенные комплексы.
Выполнение реакции: к 1 мл 0,1% адреналина гидрохлорида прибавляют 1 мл воды, по 5 капель раствора фосфорной кислоты и 1% раствора йодата калия и нагреваем на водяной бане.
5. Тонкослойная хроматография (ТСХ)
На стеклянную пластинку наносим силикагель, гранулы которого предварительно измельчаем на шаровой мельнице, просеиваем через сито с размером отверстий 0,1 мм, обрабатываем концентрированной соляной кислотой, отмываем до нейтральной реакции дистиллированной водой и сушим на воздухе. Затем на тонкий слой силикагеля наносим каплю адреналина гидрохлорида 0,1%, помещаем в камеру с 70% этиловым спиртом, закрываем крышкой. Затем рассчитываем значение величины Rf, который должен быть равен 0,13, что свидетельствует о подлинности препарата.
6. Спектр поглощения.
0,005% раствор в 0,01 н растворе соляной кислоты, адреналина гидротартрата имеет максимум поглащения при длине волны 279 нм.
1. Реакция с нингидрином.
0,005 г препарата растворяют в 1 мл воды, прибавляем 1 к4аплю 0,1 н раствора едкого натра, несколько капель 0,25% раствора нингидрина и кипятим смесь 1-2 мин; появляется желтое окрашивание.
2. Реакция с сульфитам меди в щелочной среде.
0,01 г препарата растворяем в 1 мл воды, прибавляем 0,1 мл раствора сульфата меди и 1 мл раствора едкого натра; появляется синевато-зеленое окрашивание.
3. Тонкослойная хроматография (ТСХ).
Как и в случае адреналина в качестве сорбента используем тонкий слой силикагеля в виде порошка, либо в виде водной суспензии; в качестве растворителя также используем 70% этиловый спирт. Коэффициент подвижности Rf равен 0,12.
4. Спектр поглощения.
Определяем на спектрометрах. Анализируемый раствор помещается в специальную кювету (ультрафиолетовая спектроскопия), источник света подается в устройство монохроматора, а оттуда свет попадает в кюветное отделение, после того как раствор поглощает свет, спек р определяется индикатором. Максимум поглощения 0,005% водного раствора норадреналина гидротартрата равен 279 нм.
5. Спектр флюоресценции.
Флюресценция норадреналина вызывается облучением коротковолновым ультрафиолетовым светом. Так, норадреналина гидротартрат флуоресцирует в ультрафиолетовом свете желто-зеленым светом. Максимум флуоресценции норадреналина гидротартрата составляет 505 нм.
1. Реакция образования окрашенных комплексов меди:
0,01 г препарата растворяем в 1 мл воды, прибавляем 0,1 мл раствора сульфата меди и 1 мл раствора едкого натра. Появляется синее окрашивание, при взбалтывании этого раствора с 1 мл эфира эфирный слой окрашивается в фиолетово-красный цвет, что служит реакцией отличия эфедрина от остальных препаратов этой группы, у которых эфирный слой остается бесцветным.
Эфедрин, кроме того. дает следующую реакцию:
0,01 г препарата в 1 мл воды добавляем 8-10 капель раствора феррицианида калия и 2-3 капли раствора едкого натра; при нагревании ощущается запах бензальдегида.
2. Тонкослойная хроматография (ТСХ).
На стеклянную пластинку размером 9x12 см наносим слой окиси алюминия толщиной 0,6 мм.
В качестве растворителей используем смесь бензол-метанол (9:1), помещаем в этот раствор пластинку и рассчитываем потом Rf, который должен быть 0,15.
3. Хроматография на бумаге (БХ).
В данном случае неподвижной фазой служит вода, адсорбированная на бумаге. В качестве растворителя используем: 1) месь циклогексан-диэтиламин в соотношении 9:1, при этом Rp = 0,47; 2) смесь петролийный эфир-этиламин (9:1), Rf = 0,26; 3) смесь циклогексан-хлороформ-диэтиламин (7:2:1), Rf = 0,76.
4. Флюоресценция.
К 1-2 мг эфедрина гидрохлорида в сухой пробирке прибавляем 7-8 капель реактива Марки (раствор фармальдегида в H2SO4) и 5 – 7 капель воды. Наблюдается интенсивно голубая флюоресценция.
Около 0,15 г тонкоизмельченного и высушенного препарата (точная навеска) растворяем в 20 мл ледяной уксусной кислоты, слегка нагревая до 40°С в случае медленного растворения и титруем 0,1 н раствора хлорной кислоты до голубовато-зеленой окраски. Индикатор – метиловый фиолетовый.
1 мг 0,1 н раствора хлорной кислоты соответствует 0,03333 г адреналина.
При проведении титрования было израсходовано 8 мл хлорной к4ислоты. Таким образом, содержание адреналина в исходном препарате составляет 0,26664.
5 мл препарата разводим водой в мерной колбе до 100 мл. К 10 мл полученного раствора прибавляем 0,2 мл железо-цитратного реактива и 1 мл аминоуксусной буферной смеси, оставляем на 10 минут и измеряем оптическую плотность окрашенного раствора на фотонитроколориметре при длине волны 530 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Содержание норадреналина в 1 мл препарата составляет 0,0019 г.
0,1 г препарата (точная навеска) растворяем при нагревании в 10 мл ледяной уксусной кислоты, после охлаждения прибавляем 5 мл предварительно нейтрализованного раствора ацетата окисной ртути и титруем 0,1 н раствором хлорной кислоты до голубого окрашивания. Индикатор – кристаллический фиолетовый.
1 мл 0,1 н раствора хлорной кислоты соответствует 0,02017 эфедрина.
На титрование пошло 10 мл хлорной кислоты, содержание эфедрина в препарате составляет 0,2017.
1. Нами были проведены наиболее широко используемые методы количественного и качественного анализа производных арилалкиламинов. При проведении ТСХ для адреналина был определен коэффициент подвижности Rf, равный 0,13, что соответствует норме т.е. наш исследуемый препарат отвечает требованиям ГФ по показателю «Подлинность».
2. Во время ультрафиолетового спектрафотометрического анализа лекарственных средств аралалкиламинов нами были зафиксированы максимумы поглощения длин волн в радиусе 279 нм.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Э.М. Аксенова. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии. / М.: «Медицина», 1987г.
2. Р.Н. Аляутдин. Фармакология. / М.: 2004 г.
3. А.П. Арзамасцев. Фармакопейный анализ. / М.: «Медицина», 1971г.
4. М.П. Максютина. Методы идентификации лекарственных препаратов. / Киев «Здоровье», 1978г.
5. Г.А. Мелентьева. Фармацевтическая химия, Т. 2 / М.: «Медицина», 1976г.
6. Е.А. Мухин. Фармакология гипертензивных средств / Кишинев, 1974г.
7. Б.А. Райсберг. Руководство по количественному анализу лекарственных препаратов / М.: «Медицина», 1978г.
8. М.Ф. Старцев. Идентификация лекарственных препаратов / М.: «Медицина», 1981г.
9. А.М. Хамцкий. Фармацевтическая химия / Ленинград. «Медицина», 1966г.
10. Д.А Харкевич. Фармакология. / М.: «Медицина», 1980г.
11. ГФ IX / М.: «Медгиз», 1961г.