Учебно-методическое пособие Минск 2006 удк (стр. 9 из 9)
МПА
Рис. 9. Схема выполнения посевов при испытании противомикробной активности антисептика профилактического назначения
2.7. Контроль стерильности готовых лекарственных форм
антибиотиков и антисептиков
Цель: Освоить методику контроля стерильности готовых лекарственных форм противомикробных препаратов.
Задание: Провести испытание на стерильность образца 0,02% водного раствора фурацилина.
Материалы: Образец 0,02% раствора фурацилина; две бутылочки с 40 мл стерильной тиогликолевой среды, рН 7,2; две бутылочки с жидкой стерильной средой Сабуро, рН 5,6; по 1,0 мл бульонных культур тест-штаммов S. aureus (ATCC 653 P) и C. albicans (ATCC 885-653) плотностью 10 КОЕ/мл; пипетки стерильные 5 мл - 4; пипетка стерильная 1 мл - одна; реактивы для окраски по методу Грама; предметные стёкла, микроскоп.
Методика испытания (рис. 10):
1. 5 мл образца испытуемого препарата внести в колбу со средой Сабуро;
2. 5 мл образца препарата внести в колбу с тиогликолевой средой;
3. В колбу с тиогликолевой средой внести 5 мл образца препарата и 0,1 мл взвеси тест-культуры S. aureus (контроль качества нейтрализации);
4. В колбу со средой Сабуро внести 5 мл образца препарата и 0,1 мл взвеси тест-культуры C. albicans (контроль качества нейтрализации);
5. Тиогликолевые среды поместить в термостат при 30-35оС, среды Сабуро инкубируют при 20-25оС. Наблюдение ведут 14 дней.
6. В контрольных посевах должно быть помутнение. В случае помутнения опытных посевов, не дожидаясь окончания срока наблюдения, а при отсутствии помутнения на 14 день инкубации из опытных и контрольных посевов следует приготовить мазки и окрасить их по Граму.
Оценка результатов:
1. Препарат считается стерильным, если в опытных посевах нет роста микроорганизмов, а в контрольных - есть рост.
2. Препарат считается нестерильным, а, следовательно, непригодным к использованию, если в опытных и контрольных посевах обнаружен рост микроорганизмов.
3. Если в контрольных посевах нет роста, исследование повторяют, используя метод мембранной фильтрации.
Среда Сабуро Исследуемый Тиогликолевая средаобразец ГЛС
5 мл 5 мл
0,1 мл 0,1 мл
тест-культуры Candida, 20-25оС тест-культуры Staphylococcus, 30-35оС
14 дней 14 дней
Рис. 10. Методика контроля стерильности готовых лекарственных форм противомикробных препаратов
2.8. Определение общего микробного числа в готовых
лекарственных формах дезинфектантов
Цель: Освоить методику контроля микробной контаминации ГЛФ противомикробных препаратов.
Задание: Определить общее микробное число в образце 0,5% раствора хлорамина.
Материалы: Образец 0,5% водного раствора хлорамина в объёме 10 мл. Стерильные чашки Петри - две. 2% МПА в пробирках по 20 мл – 2. 0,5% раствор тиосульфата натрия в пробирках по 9 мл – 2. Пипетки 1 мл - 2.
Методика испытания (рис. 11):
1. Образец развести 0,5% раствором тиосульфата натрия в 10 раз (основное разведение).
2. Основное разведение разбавить 0,5% раствором тиосульфата натрия в 10 раз (дополнительное разведение).
3. По 1 мл основного и дополнительного разведений внести в пустые стерильные чашки Петри (раздельно).
4. Чашки залить 20 мл расплавленного и охлаждённого до 45±5оС МПА, смешать, оставить на ровной поверхности до затвердения.
5. Поместить в термостат при 30-35оС на 40 часов.
6. Подсчитать количество КОЕ на обеих чашках и сделать пересчёт на 1 мл испытуемого препарата.
Оценка результатов:
Микроорганизмы не должны обнаруживаться в 100 мл раствора дезинфектанта, предназначенного для хранения стерильного инструментария. В остальных типах дезинфицирующих растворов (в 10 мл) не должны обнаруживаться патогенные микроорганизмы, S. aureus, энтеробактерии и P. aeruginosa. Допускается наличие сапрофитных бактерий не более 10 в 100 мл исследуемого раствора.
Исследуемый Разведение Разведениеобразец ГЛФ образца 1:10 образца 1:100
(основное) (дополнительное)
0,5% раствор фосфатный буфер фосфатный буфер
хлорамина 90 мл 90 мл
10 мл1 мл 1мл
| | |
20 мл МПА 20 мл МПА
Рис. 11. Методика контроля микробной контаминации ГЛФ противомикробного препарата
ЛИТЕРАТУРА
1. Беляков В. Д., Дегтярев А. А., Иванников Ю. Г. Качество и эффективность противоэпидемических мероприятий. - Л.: Медицина, 1981. - 304 с.
2. Гандельсман Б. И. Дезинфекционное дело. - М.: Медицина, 1971. - 391 с.
3. Гудкова Е. И., Красильников А. П. Контроль за микробной контаминацией антисептиков и дезинфектантов // Лабор. дело. 1991. – №1. – С. 59-61.
4. Козлов И. М., Лярский П. П. Руководство по дезинфекции, дезинсекции и дератизации. - М.: Медицина, 1983. - 277 с.
5. Красильников А. П. Справочник по антисептике. – Мн.: Выш. шк., 1995. – 367 с.
6. Методика определения чувствительности-устойчивости бактерий к антисептикам: Метод. рекомендации / Сост. А. А. Адарченко, А. П. Красильников, О. П. Собещук. - Мн.: МГМИ, 1989.
7. Приказ МЗ РБ № 165 от 25.11.2002 г. О проведении дезинфекции и стерилизации учреждениями здравоохранения. Приложения 1-5. – 2002. – 44 с.
8. Санитарная микробиология / Под ред. С. Я. Любашенко.–М.: Медицина. 1980.
9. Санитарные нормы и правила 3.2.569-96. - М., 1997.
10. Справочник по санитарной микробиологии / Под ред. Л. В.Григорьевой. – Кишинев. - 1981.
11. Чистенко Г. Н. Основы дезинфекции. / Мир медицины. – 2005, № 11. – С. 3-5.
12. Чистенко Г. Н. Основы дезинфекции. / Мир медицины. – 2005, № 12. – С. 2-4.
13. Чистенко Г. Н. Основы дезинфекции. / Мир медицины. – 2005, № 9. – С. 2-4.
14. Чистенко Г. Н., Филонов В. П., Горбачева В. Н. Основы дезинфекции и стерилизации. – Мн.: Асобны Дах, 1998. – 160 с.
15. McDonnell G., Russell D. / Clinical Microbiology Reviews. – 1999, Vol.12, P.147-179.
Оглавление
| Список сокращений |
| ВВедение (В. А. Горбунов, Е. И. Гудкова) |
| 1. Противомикробные мероприятия |
| 1.1. Стерилизация (Горбунов В. А.) |
| 1.1.1. Физические методы стерилизации |
| 1.1.2. Химический метод стерилизации |
| 1.1.3. Контроль стерильности изделий медицинского назначения |
| 1.2. Дезинфекция (Гудкова Е И.) |
| 1.2.1. Дезинфицирующие средства |
| 1.2.2. Контроль качества дезинфекции |
| 1.3. Антисептика (Гудкова Е И.) |
| 1.3.1. Химические антисептические средства |
| 1.3.2. Биологические антисептические средства |
| 1.4. Механизмы антимикробного действия дезинфектантов и антисептиков (Горбунов В. А., Гудкова Е И.) |
| 1.5. Резистентность микроорганизмов к антисептикам и дезинфектантам (Горбунов В. А.) |
| 1.6. Контроль за распространением устойчивых к антибиотикам, антисептикам и дезинфектантам вариантов бактерий и грибов (Горбунов В. А.) |
| 1.7. Микробиологический контроль за присутствием микроорганизмов в ГЛФ антибиотиков, антисептиков и дезинфектантов (Гудкова Е И.) |
| 1.7.1. Методика контроля стерильности противомикробных препаратов |
| 2. Методические рекомендации к самостоятельному выполнению заданий по контролю качества противомикробных мероприятий |
| 2.1. Стерилизация изделий из стекла и контроль ее качества (Горбунов В. А.) |
| 2.2. Стерилизация медицинского инструментария и контроль ее качества (Горбунов В. А.) |
| 2.3. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах капельных инфекций (Гудкова Е И.) |
| 2.4. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах кишечных инфекций (Гудкова Е И.) |
| 2.5. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Гигиеническая антисептика. (Гудкова Е И.) |
| 2.6. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Хирургическая антисептика. (Гудкова Е И.) |
| 2.7. Контроль стерильности готовых лекарственных форм антибиотиков и антисептиков (Горбунов В. А.) |
| 2.8. Определение общего микробного числа в готовых лекарственных формах дезинфектантов (Гудкова Е И.) |
| Литература |
УЧЕБНОЕ ИЗДАНИЕ
Горбунов Владимир Анатольевич,
Гудкова Елена Ивановна
Микробиологические основы
противомикробных мероприятий
Учебно-методическое пособие
Ответственный за выпуск: доцент В. А. Горбунов
Редактор
Компьютерная верстка
Подписано в печать г. Формат 60х84/16. Бумага писчая.
Печать офсетная. Гарнитура «Times».
Усл. печ. л. _____. Уч.-изд. л. _____. Тираж _____экз. Заказ _____.
Издатель и полиграфическое исполнение –
Белорусский государственный медицинский университет
ЛИ № 02330/0133420 от 14.10.2004; ЛП № 02330/0131503 от 27.08.2004.
220050, г. Минск, Ленинградская, 6.