Методические указания по оценке подлинности и выявлению фальсификации молочной продукции методические указания (стр. 4 из 5)
(приведены по Приложению 18 к Федеральному закону от 12.06.2008 г. № 88-ФЗ "Технический регламент на молоко и молочную продукцию")
| Показатели пищевой ценности | Предел допустимых отклонений, |
| Белки, жиры, углеводы, сахар, органические кислоты, алкоголь, клетчатка, жирные кислоты | |
| менее 10 г на 100 г продукта | +/- 10% |
| 10 - 40 г на 100 г продукта | +/- 15% |
| более 40 г на 100 г продукта | +/- 6 г |
ПРИЛОЖЕНИЕ 3.
Жирно-кислотный состав молочного жира коровьего молока
| Условное обозначение жирной кислоты | Наименование жирной кислоты по тривиальной номенклатуре | Массовая доля жирной кислоты, % от суммы жирных кислот ** |
| С4::0 | Масляная | 2,0—4,2 |
| Сб:0 | Капроновая | 1,5—3,0 |
| С8:0 | Каприловая | 1,0—2,0 |
| С10:0 | Каприновая | 2,0—3,5 |
| С10:1 | Деценовая | 0,2—0,4 |
| С12:0 | Лауриновая | 2,0—4,0 |
| С14:0 | Миристиновая | 8,0—13,0 |
| C14:1 | Миристолеиновая | 0,6—1,5 |
| С 15:0:1 | Пентадекановая | 3,06-4,45*** |
| Cl6:0* | Пальмитиновая | 22,0—33,0 |
| C16:1* | Пальмитолеиновая | 1,5—2,0 |
| С 17:0:1 | Маргариновая | 2,08-4,07*** |
| Cl8:0 | Стеариновая | 9,0—13,0 |
| C18:1* | Олеиновая | 22,0—32,0 |
| C18:2* | Линолевая | 3,0—5,5 |
| Cl8:3* | Линоленовая | До 1,5 |
| C20:0 | Арахиновая | До 0,3 |
| C22:0 | Бегеновая | До 0,1 |
* - Расчет произведен по сумме изомеров.
** - Согласно ГОСТ Р 52253-2004 Масло и паста масляная из коровьего молока,
общие технические условия.
*** - Согласно Стандарту кодекса для пищевых жиров и масел, для которых не существует отдельных стандартов (CODEX STAN 19-1981, REV. 2-1999) и Стандарту кодекса для поименованных животных жиров (CODEX STAN 211-1999)
Отличительными особенностями состава жирных кислот натурального молочного жира являются:
1. наличие масляной кислоты
2. наличие минорных компонентов (пентадекановой С 15:0:1, пальмитолеиновой С16:1, маргариновой С 17:0:1 кислот.
3. содержание пальмитиновой кислоты не более 33%
4. возможно присутствие трансизомеров ненасыщенных жирных кислот (в основном транс-изомеров олеиновой кислоты) - не более 3-5%
ПРИЛОЖЕНИЕ 4.
МЕТОДИЧЕСКИЕ КАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОТНОСИТЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ СЫВОРОТОЧНЫХ БЕЛКОВ МОЛОКА
Метод идентификации белков молока основан на хроматографическом разделении с помощью эксклюзионной жидкостной хроматографии высокого давления белков водорастворимой фракции коровьего молока (предварительно обезжиренного и отфильтрованного).
При проведении исследования определяются: - суммарное содержание альфа-лактоальбумина и бета-глобулина, - суммарное содержание всех белков растворимой белковой фракции, включая ассоциаты казеинов. Анализируется соотношение суммы альфа-лактоальбумина и бета-глобулина к сумме белков водорастворимой фракции и делается заключение о том, является ли входящий в состав продукции белок цельным белком молочной сыворотки.
1. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709.
2. Натрия хлорид (квалификации не ниже ХЧ) по ГОСТ 4233 Реактивы. Натрий хлористый.
3. Стандартные образцы для калибровки колонки «Protein molecular weight standards» Kit MS II, Serva, Германия (кат. № 39064 по каталогу Serva).
3. Приборы, вспомогательное оборудование, лабораторная посуда.
1. Хроматограф жидкостной изократический высокого давления со спектрофотометрическим проточным детектором с длиной волны 280 нм и системой подготовки элюента и хроматографической, предварительно откалиброванной по стандартным глобулярным водорастворимым белкам известной молекулярной массы.
2. Колонка TSK GEL G2000SWLX (0.8*30 см) (кат. номер 18674 по каталогу Tosohbioscience)
3. Центрифуга лабораторная (6000 об/мин)
4. Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г и погрешностью ±0,0001 г..
5. Пробирки типа «эппендорф» объемом 2,5 см3.
6. Фильтры капроновые 0,45 мкм или аналогичные.
7. Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-10 или 5-2-10, 4-2-25 или 5-2-25 по ГОСТ 29227.
8. Фильтрующие насадки 0,22 мкм.
Допускается использование приборов и посуды с метрологическими и техническими характеристиками и реактивов квалификацией не ниже указанных.
4. Отбор проб.
Для учета специфики отбора проб отдельных видов продуктов следует руководствоваться действующей нормативно-технической документацией на конкретную продукцию.
Образец молока объемом 5,0 см3 помещают в полиэтиленовую пробирку объемом 6,0 см3. Пробирку центрифугируют 60 минут при 6000 об/мин и температуре +5°С. Аликвоту прозрачной части фильтруют через фильтрующую шприцевую насадку с размером пор 0,22 мкм в стеклянный флакон. Объем фильтрата должен составлять не менее 2,0 см3.
6. Условия хроматографии и калибровка хроматографической колонки.
Хроматографическая колонка калибруется по стандартным глобулярным водорастворимым белкам известной молекулярной массы по времени удерживания (или расстоянию максимума пика на ленте самописца). Строится калибровочная кривая
зависимости десятичного логарифма молекулярной массы от времени удерживания (или расстояния на ленте самописца), как это показано на рис 1.
Условия хроматографии следующие: скорость элюирования 0,2 см3/мин, ультрофиолетовый проточный детектор 115UV(280 нм), объем образца, инжектируемого в колонку 100 мкл.
В качестве элюента используется 0,2М раствор NaCl. Элюент готовится следующим образом: в колбу емкостью 1000 см3 вносится 24,0 г натрия хлорида, добавляется 600 см3 дистиллированной воды. После полного растворения объем доводится до 1000 см3 дистиллированной водой. Полученный раствор отфильтровывается через фильтр с размером пор 0,45 мкм.
В откалиброванную колонку инжектируется 100 мкм3 раствора обезжиренного и отфильтрованного, как описано в разделе 5 сырого коровьего молока и получаемая хроматограммма (рис. 2) используется как эталонный образец сырого коровьего молока для сравнения с хроматограммами таким же образом обезжиренного и отфильтрованного коровьего молока анализируемых образцов.
7. Проведение хроматографического анализа.
Исследуемый образец обезжиренного и отфильтрованного молока хроматографируется при условиях, описанных в разделе 6.
Характерные хроматограммы сухого молока приведены на рис.3 и 4.
8. Обработка результатов измерения.
Интегрирование проводится после определения базовой линии. Определяется площадь пика бета-лактоглобулина (S1), площадь пика альфа-лактоальбумина (S2), площадь пика ассоциата казеина (S3). Рассчитывается соотношение X,%:
X,% = (S1+S2)/(S1+S2+S3)*100
Значение соотношения X,% для различных видов молока приведено в таблице:
| № | Вид молока | Значение Х,% |
| 1. | Сырое молоко | не менее 42 |
| 2. | Молоко термообработанное | не более 38 |
Погрешность определения соотношения Х,% составляет +/- 5% от полученной величины
Рис. 1 Калибровочная кривая хроматографической колонки TSK GEL G 2000 SWLX (0.8*30 см),