Исследование расщепления крахмала под действием a-амилазы слюны (стр. 3 из 3)

На рис. Представлена схема действия a-амилаз на амилозу и амилопектин по Бернфельду.

Рис.2 Действие a-амилазы на амилозу и амилопектин по Бернфельду.1 – мальтоза; 2 – глюкоза; 3 – нормальный a-декстрин; 4 – конечный a-декстрин; *-редуцирующий конец амилозы или амилопектина; - действие a-амилазы.

4. Ход работы

Оборудование: электрическая плитка, химические стаканы, колбы, термостойкая колба, термометр, водяная баня, пипетка, мензурка.

Реактивы: крахмал, раствор йода.

Приготовление раствора крахмала:

В термостойкую колбу добавляем 200 мл воды. В неё же добавляем 2 г крахмала. Доводим смесь до кипения и кипятим несколько минут. Таким образом получаем 1% раствор крахмала.

Приготовление раствора слюны:

50 мл воды полощем во рту в течении 3-4 минут.

Проведение эксперимента:

В три пробирки добавляем по 25 мл раствора крахмала и каплю йода. Раствор крахмала окрашивается в интенсивно синюю окраску. Нагреваем электрическую плитку и измеряем температуру водяной бани. В течении 8-10 минут даём время, чтобы температура водяной бани и температура раствора в пробирках уравнялась. Снова измеряем температуру водяной бани. Добавляем в раствор крахмала 5 мл раствора слюны и включаем секундомер. Отмечаем время исчезновения синей окраски. Затем в следующие три пробирки добавляем раствор крахмала и каплю раствора йода, охлаждаем водяную баню и повторяем процедуру при более низкой температуре.

Результаты эксперимента приведены в таблице:

toC	22		30	34	37	40	45	58
t1	11 мин 17 с		7 мин 5с	3 мин 56 с	3 мин 16 с	4 мин6 с	5 мин13 с	6 мин57 с
t2	11мин 22 с		7 мин 13с	4 мин6 с	3 мин23 с	4 мин 16 с	5 мин5 с	6 мин 55 с
t3	11 мин23 с		7 мин 9с	4 мин	3 мин21 с	4 мин8 с	5 мин 11 с	7 мин 3 с
tср.	11 мин 21с		7 мин 9 с	4 мин1 с	3 мин 20 с	4 мин 10 с	5 мин 10 с	6 мин58 с
toC		22	30	34	37	40	45	58
1/t мин-1		0.088	0.14	0.25	0.3	0.24	0. 195	0.143

Зависимость скорости расщепления крахмала от температуры.

Можно видеть, что кривая имеет колокообразный характер с максимумом при температуре 37оС. Это подтверждает белковое строение a-амилазы, так как при использовании неорганических катализаторов скорость при повышении температуры постоянно возрастает. Также можно видеть, что в нейтральной среде оптимальная работа фермента происходит при 37оС, что совпадает с температурой тела человека.

5. Литература

1. Алейникова Т.Л., Рубцова Г.В. «Руководство к практическим занятиям по биологической химии». М.: Высшая школа 1988 г.

2. Жеребцов Н.А. «Амилолитические ферменты в пищевой промышленности». М.: Лёгкая и пищевая промышленность 1984 г.

3. А. Ленинджер «Биохимия». 1976 г.

4. Лещук Р.И., Хило З.В. «Малый практикум по биохимии». Томск 1984 г.

5. Производство и применение амилолитических ферментов в пищевой промышленности. М.: Пищевая промышленность 1968 г.

6. Филиппович Ю.Б. «Основы биохимии». М.: Высшая школа 1985 г.

6. Благодарности

Выражаю благодарность учителю физики Барановой Елене Львовне за помощь в работе и за предоставленное оборудование, ученику 9б класса Косареву Славе за оформление плакатов и ученице 11а класса Овчаровой Наталье за помощь в работе.