Таблица 2
Влияние жидкого бифидумбактерина на микробиоценоз толстой кишки у больных дизентерией Флекснера 2а
| Микроорганизмы | Характер течения заболевания | |||
| легкое 1 группа (n=36) | среднетяжелое 2 группа (n=36) | тяжелое 3 группа (n=14) | затяжное 4 группа (n=20) | |
| Концентрация микроорганизмов, lg КОЕ/г | ||||
| Бифидобактерии | 9,58+0,38 * # | 9,08+0,23 # | 7,41+0,34 * # | 7,28+0,29 * # |
| Бактероиды | 7,50+0,36 * | 7,27+0,40 * | 6,80+0,54 * # | 7,51+0,31 * # |
| Клостридии | 2,00+0,20 3) 4) | 2,67+0,33 4) | 3,82+0,41 * # | 4,33+0,40 * # 1) 2) |
| Лактобактерии | 7,00+0,53 * | 6,70+0,36 * | 6,94+0,35 * # | 6,67+0,21 * |
| Кишечная палочка с нормальной ферментативной активностью | 8,00+0,38 2) | 6,92+0,31 * 1) | 6,92+0,44 # | 7,33+0,26 # |
| Кишечная палочка с пониженной ферментативной активностью | 5,00+0,16 2) | 6,75+0,25 * # 1) 3) 4) | 5,51+0,34 | 5,50+0,32 2) |
| Кишечная палочка лактозонегативная | 6,06+0,70 * | 6,00+0,52 * | 6,24+0,37 * | 6,00+0,33 * |
| Кишечная палочка гемолитическая | 0 | 0 | 0 | 0 |
| Другие условно-патогенные бактерии, семейства Enterobacteriaceae | 3,85+0,28 2) | 5,46+0,30 * # 1) 3) | 4,03+0,30 | 3,46+0,24 3) |
| Энтерококки | 7,60+0,37 * # | 7,08+0,26 * # | 7,54+0,34 * # | 6,67+0,32 * # |
| Общее количество стафилококков | 5,00+0,40 * | 5,26+0,27 * | 5,38+0,49 * | 6,00+0,34 * # |
| Золотистый стафилококк | 0 | 4,67+0,60 # 4) | 2,20+0,24 | 1,91+0,19 2) |
| Дрожжеподобные грибы | 5,00+0,34 * 4) | 4,78+0,22 *4) | 5,01+0,20 * 4) | 2,18+0,24 1) 2) 3) |
Примечания: * - различия с показателями контрольной группы достоверны, р< 0,05
# - различия с показателями до лечения достоверны, р < 0,05
1) 2) 3) 4)- различия с показателями 1, 2, 3 и 4 групп достоверны, р < 0,05
нии заболевания (5,38 + 0,49 lg КОЕ/г и 6,00 + 0,34 lg КОЕ/г соответственно, (р < 0,05). Выше, чем в остром периоде было содержание золотистого стафилококка при среднетяжелом течении дизентерии (4,67+0,60 lg КОЕ/г, р < 0,05). Во всех группах достоверно выше нормы (р < 0,05) сохранялась концентрация дрожжеподобных грибов рода Кандида. При среднетяжелом течении заболевания обнаружено увеличение содержания условно-патогенных микроорганизмов (Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella) до 5,46+0,30 lg КОЕ/г, а в остальных группах оно не изменилось (р > 0,05).
В связи с этим необходимо применение более эффективных пробиотиков. Для этих целей выбран для использования новый пробиотик биоспорин, выпускаемый по усовершенствованной технологии Центром военно-технических проблем противобактериологической защиты Научно-исследовательского института микробиологии Министерства Обороны Российской Федерации.
Проведенное нами специальное изучение реактогенности биоспорина при назначении его лицам контрольной группы показало, что после приема препарата у всех испытателей не отмечалось повышение температуры тела. Переносимость препарата была удовлетворительной. Жалоб на ухудшение самочувствия не было. Не выявлено статистически значимых изменений в концентрации эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитарной формуле крови по сравнению с первоначальным значением. Помимо клинического анализа крови, в эти же сроки производили общий анализ мочи, показатели которого также не отличались от нормы. В то же время, повышение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови регистрировали уже спустя 7 суток от начала приема биоспорина, при этом индекс переваривания возрастал с 1,18 + 0,14 усл. ед. до 2,02 + 0,34 усл. ед. (р < 0,05). Еще в большей степени возрастала активность нейтрофилов на 14 сутки наблюдения (2,12 + 0,36 усл. ед., р < 0,05). К концу срока наблюдения происходило некоторое ее снижение, однако величина индекса переваривания продолжала превышать фоновое значение.
Нами установлено, что на 7 и 14 сутки от начала приема биоспорина статистически достоверно возрастала секреция нейтрофилами периферической крови неспецифических эстераз - 1,36+0,04 усл. ед. и 1,55+0,05 усл. ед., соответственно (при норме 1,22+0,04 усл. ед., р < 0,05); миелопероксидазы - 0,40+0,03 усл. ед. и 0,49+0,05 усл. ед. соответственно (при норме 0,22+0,02 усл. ед., р < 0,05). Однако, несмотря на увеличение секреции бета-лизинов на протяжении всего периода наблюдения, уровень достоверности был ниже 95 %. Только на 14 сутки от начала приема препарата показатели секреции лизоцима (9,75+0,75 мкг/мл) и интерферона (8,6+1,1 ед/мл) становились достоверно выше фоновых значений (5,45+1,81 мкг/мл и 4,4+0,7 ед/мл соответственно, р < 0,05).
За время всего периода наблюдения в контрольной группе не было выявлено статистически значимого увеличения концентрации иммуноглобулинов Е в сыворотке крови - 81+12 г/л на 7-е и 81+14 г/л на 14 сутки наблюдения при норме 79+10 г/л (р > 0,05), что свидетельствует об отсутствии выраженного аллергизирующего эффекта у данного препарата.
Изучение динамики содержания Т- и В-лимфоцитов в периферической крови также существенных изменений не выявило. Среднее значение этих показателей практически не отличалось от фоновых (р > 0,05). Так на 7 сутки после начала приема биоспорина концентрация Т-лимфоцитов составила 1036+158 кл/мкл, на 14-е - 1048+156 кл/мкл и на 28 сутки наблюдения - 1036+144 кл/мкл (при норме 1030+160 кл/мкл). Концентрация В-лимфоцитов составила на 7 сутки наблюдения 1211+125 кл/мкл, на 14-е - 1205+136 кл/мкл и на 28 сутки - 1212+144 кл/мкл (при норме 1209+136 кл/мкл).
Не наблюдалось и активации процессов, ответственных за образование циркулирующих иммунных комплексов. На протяжении всего периода наблюдения после приема биоспорина этот показатель не отличался от исходных значений - 0,11+0,06 усл. ед. (р > 0,05).
При пероральном применении биоспорин не оказывал отрицательного влияния на синтез и секрецию в кровь иммуноглобулинов основных классов. Концентрация иммуноглобулина А на 7 сутки после начала приема препарата составила 1,41+0,13 г/л, а на 14 и 28 сутки - 1,68+0,28 г/л и 1,54+0,16 г/л соответственно (при норме 1,58+0,26 г/л. р > 0,05). Концентрация иммуноглобулина G до назначения биоспорина составляла 13,43+0,58 г/л и в дальнейшем существенно не отличалась от этих значений: на 7 сутки наблюдения 12,85+0,44 г/л, на 14 и 28 сутки - 14,24+0,66 г/л и 12,11+0,68 г/л соответственно (р > 0,05). Аналогичная динамика была характерна для содержания иммуноглобулина М - 1,43+0,26 г/л на 7 сутки наблюдения, 1,56+0,26 - на 14-е и 1,54+0,20 г/л на 28 сутки, в то время как при первичном обследовании она составила 1,66+0,16 г/л (р > 0,05).
Таким образом, произведенные по новой технологии биоспорин не обладает аллергизирующим и иммуносупрессивным действием. Вместе с тем, препарат повышает функциональную активность нейтрофилов. Это обстоятельство дает основание полагать, что биоспорин может оказаться эффективным как для коррекции биоценоза кишечника после перенесенной острой дизентерии, так и для восстановления неспецифической резистентности организма
Изучение влияния биоспорина на восстановление нормальной микрофлоры толстой кишки при проведении коротких кусов бактериотерапии (7 суток) проводили у больных со среднетяжелым течением дизентерии Флекснера 2а.
У больных со среднетяжелым течением дизентерии Флекснера 2а, которым не назначали пробиотики, дисбиотические нарушения после завершения лечения сохранялись в 90 % случаев. При проведении 7-дневного курса терапии бифидумбактерином дисбактериоз выявлен у 50,00 % пациентов. В то же время, после 7-дневного приема биоспорина нарушения кишечного микробиоценоза обнаружены лишь у 23,33 %.
У больных, не получавших бактериопрепараты, сохранялась низкая концентрация основных представителей нормальной микрофлоры толстой кишки. Концентрация бифидобактерий составила 6,33 + 0,45 lg КОЕ/г, бактероидов - 6,09 + 0,38 lg КОЕ/г, лактобактерий - 5,84 + 0,28 lg КОЕ/г, кишечной палочки с нормальной ферментативной активностью - 5,61 + 0,29 lg КОЕ/г, что достоверно ниже (р < 0,05), чем у здоровых лиц (см. табл. 1). Количество атипичных кишечных палочек, условно-патогенных энтеробактерий, энтерококков, стафилококков и дрожжеподобных грибов было выше нормы (р < 0,05). Выявлена тенденция к уменьшению количества бактероидов, лактобактерий, кишечной палочки с нормальной ферментативной активностью.
Биоспорин, как видно из представленных в таблице 3 данных, оказывал более выраженное влияние на восстановление нормальной микрофлоры толстой кишки, чем бифидумбактерин. Об этом свидетельствовало более значительное увеличение концентрации основных представителей микрофлоры толстой кишки (бактероидов - 7,27+0,40 lg КОЕ/г при применении бифидумбактерина и 8,14+0,40 lg КОЕ/г - биоспорина, лактобактерий 6,70+0,36 и 7,77+0,23 lg КОЕ/г соответственно) по сравнению со значениями этих показателей в остром периоде (р < 0,05), а также снижение общего количества стафилококков (5,26+0,27 и 4,06+0,25 lg КОЕ/г), дрожжеподобных грибов рода Кандида (4,68+0,22 и 3,25+0,32 lg КОЕ/г соответственно).
Установлено, что у больных со среднетяжелым типичным течением дизентерии Флекснера 2а в остром периоде заболевания происходит нарушение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов как циркулирующего (периферическая кровь), так и тканевого (небные миндалины) пула.
Содержание катионных белков в нейтрофилах периферической крови было достоверно ниже нормы - 1,01+0,05 усл. ед. у больных, получавших биоспорин, и 0,99+0,02 усл. ед. у больных, получавших бифидумбактерин (р < 0,01). Возрастали показатели секреции катионных белков по данным “Диагностического очага воспаления". В группе больных, получавших бифидумбактерин через 4 часа она составляла 23,00+2,03 усл. ед. и через 24 часа 42,80+2,13 усл. ед. (при норме 0,23+0,04 усл. ед. через 4 часа и 1,97+0,19 усл. ед через 24 часа, р < 0,001). В группе больных, получавших биоспорин, эти показатели составили - 22,90+1,08 усл. ед. и 44,20+1,99 усл. ед. соответственно.