2.1 Состав и свойства разнолигандного фосфорсодержащегокомплексоната титана марки Т-4.
Разнолигандный фосфорсодержащий комплексонат титана марки Т-4 представляет собой 20,0% водный раствор в виде прозрачной опалесцирующей жидкости зеленоватого цвета, без запаха, устойчивый при хранении. Раствор хорошо смешивается с водой.
В качестве первичного лиганда выступает гидроксиэтилидендифосфоновая кислота (ОЭДФ):
СН3 (НО)2ОР---------- С ----------- РО(ОН)2ОН
ОЭДФ содержит две фосфоновые группы и кислотный центр СН2РО3Н2. Оригинальность этой группы заключается в том, что в его своеобразной стереохимии, которая отличается от стереохимии карбоксильной группы, фосфонат-ион имеет форму искаженного тетраэдра с осью симметрии третьего порядка. Этот ион обладает большею электроотрицательностью и потенциально большей дентатностью. Имеет большое разнообразие протонированных форм: РО32-, НРО3-, Н2РО3.
Наличие в молекуле комплексона –ОН группы определяет способность его взаимодействия с переходными металлами в широком интервале и образование устойчивых полиядерных комплексонатов, которые не токсичны, достаточно растворяемы в воде, способны превращать переходные металлы в биологически активные формы, обладающие высокой мембранопроницаемостью.
ОЭДФ обладает эффектом субстехиометрического взаимодействия, сильными нуклеофильными свойствами. Введение в комплексонат вторичного неорганического лиганда повышает устойчивость, растворимость и электрофильные свойства лигандной составляющей комплексоната, а микроэлемент переводит в биологически активную форму, обладающий высокой мембранопроницаемостью.
Спектрофотометрическим методом изучен состав и оптические характеристики комплексоната, доказано образование разнолигандного комплекса, показано наличие в спектрах двух характерных полос поглощения в ультрафиолетовых и видимых областях спектра. Мольное соотношение компонентов в комплексоне Ti – L1 – L2 = 1: 1: 1. Увеличение концентрации титана более 10-4 моль/л способствует образованию полимерных форм и устойчивых комплексов lgКу=10,15, тогда как у однолигандного комплекса титана с ОЭДФ - lgКу=6,3.
Координация лигандов титаном создает дополнительные условия для окислительно-восстановительного взаимодействия между центральным ионом и лигандами, т.к. имеется непосредственная связь между окислителем и восстановителем, обеспечивающая переход электронов. ФКТ склонен к образованию гетеровалентных и гетероядерных соединений, при этом мостиковую функцию выполняет комплексон. В растворе данный тип комплекса играет роль своеобразного «черного ящика», наполненного электронами и протонами. В зависимости от условий он может отдавать их другим компонентам или пополнять свои «запасы», что определяется восстановительной способностью лигандов, расстоянием передачи электрона.
Комплексонат титана марки Т-4 отличается от разнолигандного ФКТ-3 составом вторичного неорганического лиганда L2, в котором основополагающий элемент не атом кислорода, а элемент значительно усиливающий восстановительные свойства лигандов. В условиях применения в теологических системах он проявляет низкую степень окисления, что обеспечивает более высокую восстановительную активность неорганического лиганда.
ФКТ является аналогом эндогенных хелатных соединений, соответствует тесту на целесообразность его применения в сельском хозяйстве. Проведены санитарно-токсикологические испытания наработанной партии ФКТ-4, его применение разрешено при соблюдении санитарно-гигиенических и санитарно-технических требований, предъявляемых к работе с препаратом. ФКТ утвержден главным государственным врачом г. Москвы.
2.2 Методика, схема и техника проведения опыта
В целях изучения поставленных нами задач в период с июля по сентябрь 2000 г на базе ЗАО «Равис» птицефабрика Сосновская Сосновского района Челябинской области был проведен научный (физиологический), научно-хозяйственный и производственный эксперимент на бройлерах кросса «Смена» в возрасте 1-45 дней.
Группы из цыплят-бройлеров на научный и научно-хозяйственный опыт, а также при производственной апробации были сформированы по принципу аналогов, с учетом живой массы, состояния здоровья, кросса.
В каждой группе в физиологическом опыте было по 5 голов, в научно-хозяйственном – по 200 и в производственном опыте: в контрольной –1207, а в опытной - 1170 голов.
В период проведения опыта хозяйство было благополучно по инфекционным и инвазионным болезням. Научно-хозяйственный опыт проводился по схеме, представленной в таблице 2.
Схема опыта
Группа | Период | |
Подготовительный, 5 дней | Главный, 40 дней | |
I-я контрольная | Основной рацион (ОР) | Основной рацион (ОР) |
II –я опытная | ОР | ОР + 0,05 мг комплексоната титана (КТ) на 1 кг живой массы |
III-я опытная | ОР | ОР + 0,10 мг КТ на 1 кг живой массы |
IV-я опытная | ОР | ОР + 0,15 мг КТ на 1 кг живой массы |
Все подопытные цыплята в подготовительный период получали нулевой рацион, применяемый на птицефабрике. С 5-ти дневного возраста цыплятам 2-й, 3-й и 4-й опытным группам с питьевой водой задавали комплексонат титана согласно дозировки, приведенной в схеме опыта.
Вся подопытная птица находилась в одном птичнике (№64), условия кормления и содержания были одинаковыми. Обслуживалась птица одним слесарем – оператором и птичницей.
В ходе научно-хозяйственного опыта учитывали следующие показатели:
зоогигиеническую оценку помещения;
условия кормления подопытной птицы;
живую массу цыплят;
состояние и сохранность птицы;
гематологические показатели;
переваримость питательных веществ кормосмесей;
баланс азота, Ca, P, микроэлементов;
мясную продуктивность бройлеров;
резистентность организма цыплят-бройлеров;
бактерицидное действие комплексоната титана;
минеральный состав костяка, мышечной ткани птицы.
Результаты опытов обрабатывались биометрически на микрокалькуляторе при помощи метода Р. Б. Стрелкова (136). Метод рекомендован для статистической обработки экспериментальных данных в области биологии, ветеринарии и медицины, а также на ПЭВМ с использованием программы Microsoft Excel. Достоверностью считали разницу при Р<0,05.
Состояние бройлеров учитывали ежедневным осмотром, принимая во внимание аппетит, подвижность птицы, сохранность поголовья - путем ежедневного учета птицы.
Живую массу определяли с точностью до 5,0 г путем индивидуального еженедельного взвешивания 15% одних и тех же бройлеров из каждой группы. Среднесуточный и относительный приросты рассчитывали по общепринятым методикам.
В зоогигиеническую оценку помещения входило: учет плотности посадки птицы, освещенность, продолжительность светового дня, исследование температуры и относительной влажности воздуха психрометром Августа, аммиака – универсальным газоанализатором УГ-2, освещенность – люксметром Ю-116. Температуру и относительную влажность воздуха определяли ежедневно, аммиак и освещенность – еженедельно, на уровне 3 яруса, где содержалась подопытная птица (123).
Поедаемость корма – путем ежедневного учета дачи и остатков комбикорма. Химический состав и питательность кормосмеси проводили в межкафедральной лаборатории УГАВМ по общепринятым методикам (86, 91, 114): первоначальную воду – методом высушивания навески корма в сушильном шкафу при температуре 65 оС до постоянной массы; гигроскопическую воду – методом высушивания навески корма в сушильном шкафу при температуре 100-105 оС до постоянной массы; «сырую» золу – сжиганием навески корма в муфельной печи при температуре 500-600оС; «сырой» протеин – по методу Кьельдаля (91); «сырую» клетчатку –кипячением в слабых растворах кислот и щелочей по методу Геннеберга и Штомана (86); «сырой» жир – экстракцией сернокислым эфиром в аппарате Сокслета (114); кальций – трилонометрическим методом (151); фосфор – методом – колориметрии (151). Содержание аминокислот взято из данных удостоверения качества комбикормов ПК-5 и ПК-6, завозимых на Сосновскую птицефабрику с Челябинского комбината хлебопродуктов.
Микроэлементы Cu, Fe, Zn, Co, Mn, Ni, Pb определяли на атомно-абсорбционном спектрофотометре (137,138).
2.3 Методика проведения балансового опыта
Для изучения влияния различных дозировок комплексоната титана на переваримость и использование питательных веществ кормосмеси был проведен балансовый опыт в конце выращивания на 5 аналогичных по массе бройлерах, характерных для каждой группы, по методике ВНИТиП (143) и методу М. И. Дьякова (95). Продолжительность балансового опыта 13 дней, из которых 5 дней учетных.
Птица содержалась в отдельных клетках с сетчатым дном, под которым установлены каркасы из полиэтиленовой пленки для сбора помета.
В течение балансового опыта ежедневно учитывали количество съеденного корма, путем учета остатков корма от заданного и количество выделенного помета. Помет собирали дважды в день (утром и вечером), взвешивали, помещали в двойные полиэтиленовые пакеты (тщательно закрываемые), заливали 0,1 н раствором щавелевой кислоты (2 мл на 50 г помета) для связывания аммиака. Количество пошедшей кислоты учитывали при определении первоначальной воды. Помет хранили в холодильнике на нижней полке.
Химический анализ кормосмеси, помета проводили в межкафедральной лаборатории УГАВМ по общепринятым методикам, указанным выше. Азот кала определяли по методу М.И. Дьякова (95).