Смекни!
smekni.com

Литература - Другое (книга по генетике) (стр. 57 из 64)

всплывают идеи "улучшения человеческой породы " Фрэнсиса

Гальтона, правда, неимеющие ничего общего с примитивной ев-

геникой прошлого. Обрели реальность и казавшиеся невозможны-

ми в недалеком прошлом идеи патентования отдельных генов и

их фрагментов, потенциально особенно перспективных для моле-

кулярной диагностики и биотехнологий. Несмотря на протесты

руководителей программы "Геном человека" Фрэнсиса Коллинса,

Томаса Каски и широкой научной общественности патент-

носпособность генома человека, по крайней мере, его отдель-

ных фрагментов, генов (например, гена BRCA-1- мутации кото-

рого резко увеличивают вероятность рака молочной железы) по-

лучила одобрени 4е 0 законодательных комитетов США

Еще больше этических и моральных вопросов порождает ге-

нотерапия. Однако, и в этой области наметилась определенная

эволюция взглядов как специалистов, так и широкой обществен-

ности. От полной неприемлемости такого подхода в 70-80-х го-

да 4х 0уходящего века до признания безопасности (при соблюдении

необходимых правил) генноинженерных манипуляций на сомати-

ческих клетках. Между тем, логика подсказывает, что по мере

того как все больше соматических мутаций удастся исправить с

помощью генной терапиии, тем значительней будет их вклад на

уровне половых клеток. Тем больше будет шанс того, что 4при

4вступлении 0в брак гомозигот по аутосомно-рецессивным заболе-

ваниям 4(а вероятность такого события будет возрастать по

4мере совершенствования методов лечения генетических

4болезней) 0, все дети 4будут здоровы, хотя и получат от своих

4родителей мутантные гены. Это станет особенно реальным в

4связи с успешной разработкой методологии доимплантационной

4диагностики наследственных болезней. Поэтому 0в научной лите-

ратуре все настойчивее звучит тема генокоррекции на уровне

половых клеток или ранних зародышей человека. Современный

методоческий уровень пока еще не позволяет с абсолютной уве-

ренностью осуществлять направленный перенос гена в половые

клетки и клетки дробящихся зародышей. Пока этого удалось

достичь только в экспериментах с эмбриональными стволовыми

клетками, причем на 1-м этапе возникший организм, в действи-

тельности, является мозаиком по введенному гену (см. Главу

V 4I 0II). Естественно, это не означает, что проблема гомолого-

гичной рекомбинации нормального и мутантного гена на уровне

половых клеток и ранних зародышей принципиально неразрешима.

Однако, потребуется еще много времени, возможно не одно

десятилетие XXI-го века, прежде, чем эта задача будет успеш-

но решена. В настоящее время мнение специалистов и широкой

общественности - максимально предотвратить возможность попа-

дания чужеродного генетического материала в половые клетки,

с тем, чтобы избежать непредсказуемых, а, скорее всего,

весьма печальных, последствий для человечества такого

трансгеноза.

Нет, однако,сомнений в том, что, если конец ХХ-го века

ознаменован расшифровкой молекулярной структуры генома чело-

века, то век XXI прославится выяснением его функций на уров-

не отдельных генов, генных сообществ, хромосом , также всего

генома вцелом в контролировании процессов онто- и филогене-

за.

Молодым людям, вступающим в ХХI век, необходимо знать,

4на каком этапе 0находится наука 4о структуре и функциях 0геном 4а

человека. Это важно не только с сугубо утилитарных, меди-

цинских позиций (хотя и этот аспект крайне важен), но и с

позиций общечеловеческих. Ибо всякое эпохальное открытие на-

уки (а именно таковым и является расшифровка генома челове-

ка) до недавнего времени использовалось не только во благо,

но и во вред человечеству ( 4п 0ечальный пример тому - открытие

расщепления ядра урана, породившее атомную бомбу). Неразум-

ные эксперименты с геномом человека могут привести к еще бо-

лее страшным последствиям. Уберечь генофонд человечества,

всячески оберегая его от рискованных вмешательств, и при

этом извлечь максимальную выгоду из уже полученной бесценной

информации в плане диагностики, профилактики и лечения мно-

гих тысяч наследственно обусловленных недугов - вот задача,

которую необходимо решать уже сегодня 4и 0с которой мы прийдем

в новый XXI век !

ГЛАВА IX.

ГЕННАЯ ТЕРАПИЯ.

Раздел 9.1 Определение, историческая справка, програм-

мы генной терапии.

В широком смысле слова генная терапия означает лечение

путем введения в ткани или в клетки пациента смысловых пос-

ледовательностей ДНК. Первоначально генная терапия рассмат-

ривалась как возможность исправления дефекта в гене. Счита-

лось, что основным обьектом для такого лечения будут служить

моногенные наследственные заболевания человека, причем тео-

ретически представлялась вероятной коррекция генного дефекта

как на соматическом уровне, так и на уровне зародышевых (по-

ловых) клеток. Многочисленные эксперименты по созданию

трансгенных животных, начатые после 1980 г., а также на

культурах клеток внесли существенные коррективы в эти теоре-

тические представления. Во-первых, оказалось значительно

проще исправлять не сам дефект в гене, то есть заменять весь

мутантный ген или его мутированный фрагмент на нормальный, а

вести коррекцию путем введения в организм пациента полноцен-

но работающего гена (обычно его кДНК). Во-вторых, несмотря

на решающие успехи генной инженерии последних лет, исследо-

вания по геннной терапии у человека осуществляются исключи-

тельно на соматических тканях, в которых в норме происходит

экспрессия дефектного гена. Генная терапия на уровне половых

и зародышевых клеток человека ввиду возможных серьезных пос-

ледствий для генофонда человечества представляются весьма

проблематичной и на данном этапе наших знаний - малореаль-

ной. И наконец, в-третьих, уже разработанная и применяемая

на практике методология генной терапии оказалась пригодной

для лечения не только моногенных наследственных заболеваний,

но и таких широко распространенных болезней, какими являются

злокачественные опухоли, многие виды тяжелых вирусных инфек-

ций, включая спид, сердечно-сосудистые и другие заболевания.

Учитывая эти обстоятельства, генную терапию на современном

этапе можно определить как лечение наследственных, онкологи-

ческих, некоторых инфекционных (вирусных) и других заболева-

ний путем введения генов в клетки пациентов с целью направ-

ленного изменения генных дефектов, либо придания клеткам но-

вых функций (Culver, 1994). Первые клинические испытания ме-

тодов генной терапии были предприняты 22 мая 1989г. с целью

генетического маркирования опухоль-инфильтрующих лимфоцитов

в случае прогрессирующей меланомы. Маркированные прокариоти-

ческим геном neo, Т-лимфоциты были устойчивы к неомицину и

могли быть легко отселектированы в культуре, что позволило

детально проследить их судьбу в кровотоке и избирательное

накопление в опухолях (подробней см. 9.5).

Первым моногенным наследственным заболеванием, в отно-

шении которого были применены методы генной терапии, оказал-

ся наследственный иммуннодефицит, обусловленный мутацией в

гене аденозин-дезаминазы. 14 сентября 1990г.в Бетезде (США)

4-х летней девочке, страдающей этим достаточно редким забо-

леванием (1 : 100 000), были пересажены ее собственные лим-

фоциты, предварительно трансформированные ex vivo геном ADA

(ген ADA + ген neo + ретровирусный вектор). Лечебный эффект

наблюдался в течение нескольких месяцев, после чего процеду-

ра была повторена с интервалом 3-5 месяцев (Anderson, 1992;

Culver, 1994). В течение 3-х лет терапии в общей сложности

проведено 23 внутривенных трансфузии ADA-трансформированных

Т-лифоцитов без видимых неблагоприятных эффектов. В резуль-

тате лечения состояние пациентки (Ашанти В. ДеСильва) нас-

только улучшилось, что она смогла вести нормальный образ

жизни и не бояться случайных инфекций. Столь же успешным

оказалось и лечение второй пациентки с этим заболеванием

(подробней см. раздел 9.5). В настоящее время клинические

испытания генной терапии этого заболевания проводятся в Ита-

лии, Франции, Великобритании и Японии.

Другие моногенные наследственные заболевания, в отноше-

нии которых уже имеются официально разрешенные протоколы и

начаты клинические испытания, касаются семейной гиперхолес-

теринемии (1992); муковисцидоза (1993); гемофилии В (1992);

болезни Гоше (1993). В отношении многих других заболеваний

медицинские протоколы клинических испытаний находятся в ста-

дии утверждения (см. раздел 9.5.). К 1993г. только в США к

клиническим испытаниям генно-инженерных конструкций на чело-

веке было допущено 53 проекта (Culver, 1994). К 1995г. в ми-

ре число таких проектов возросло до 100 и более 400 пациен-

тов было непосредственно вовлечено в эти исследования (Hodg-

son, 1995). Подавляющее большинство таких проектов (86) ка-

салось лечения онкологических заболеваний, а также спида.

Таким образом, от опытов на животных и теоретических

построений 80-х годов уже в 1990 году удалось приступить к

реальному лечению моногенных заболеваний, число которых

стремительно нарастает. Естественно, что подобные революци-

онные перемены могли возникнуть только в результате решающих

успехов молекулярной биологии в картировании генов, мутации

которых приводят к наследственным заболеваниям (см.Главу

III), выяснении молекулярной природы этих мутаций (см.Главу

IV), успехов в секвенировании и клонировании генов (см.Главы

I и II), создании генно-инженерных конструкций (см.Главу

II), отработки и совершенствования методов их доставки