всплывают идеи "улучшения человеческой породы " Фрэнсиса
Гальтона, правда, неимеющие ничего общего с примитивной ев-
геникой прошлого. Обрели реальность и казавшиеся невозможны-
ми в недалеком прошлом идеи патентования отдельных генов и
их фрагментов, потенциально особенно перспективных для моле-
кулярной диагностики и биотехнологий. Несмотря на протесты
руководителей программы "Геном человека" Фрэнсиса Коллинса,
Томаса Каски и широкой научной общественности патент-
носпособность генома человека, по крайней мере, его отдель-
ных фрагментов, генов (например, гена BRCA-1- мутации кото-
рого резко увеличивают вероятность рака молочной железы) по-
лучила одобрени 4е 0 законодательных комитетов США
Еще больше этических и моральных вопросов порождает ге-
нотерапия. Однако, и в этой области наметилась определенная
эволюция взглядов как специалистов, так и широкой обществен-
ности. От полной неприемлемости такого подхода в 70-80-х го-
да 4х 0уходящего века до признания безопасности (при соблюдении
необходимых правил) генноинженерных манипуляций на сомати-
ческих клетках. Между тем, логика подсказывает, что по мере
того как все больше соматических мутаций удастся исправить с
помощью генной терапиии, тем значительней будет их вклад на
уровне половых клеток. Тем больше будет шанс того, что 4при
4вступлении 0в брак гомозигот по аутосомно-рецессивным заболе-
ваниям 4(а вероятность такого события будет возрастать по
4мере совершенствования методов лечения генетических
4болезней) 0, все дети 4будут здоровы, хотя и получат от своих
4родителей мутантные гены. Это станет особенно реальным в
4связи с успешной разработкой методологии доимплантационной
4диагностики наследственных болезней. Поэтому 0в научной лите-
ратуре все настойчивее звучит тема генокоррекции на уровне
половых клеток или ранних зародышей человека. Современный
методоческий уровень пока еще не позволяет с абсолютной уве-
ренностью осуществлять направленный перенос гена в половые
клетки и клетки дробящихся зародышей. Пока этого удалось
достичь только в экспериментах с эмбриональными стволовыми
клетками, причем на 1-м этапе возникший организм, в действи-
тельности, является мозаиком по введенному гену (см. Главу
V 4I 0II). Естественно, это не означает, что проблема гомолого-
гичной рекомбинации нормального и мутантного гена на уровне
половых клеток и ранних зародышей принципиально неразрешима.
Однако, потребуется еще много времени, возможно не одно
десятилетие XXI-го века, прежде, чем эта задача будет успеш-
но решена. В настоящее время мнение специалистов и широкой
общественности - максимально предотвратить возможность попа-
дания чужеродного генетического материала в половые клетки,
с тем, чтобы избежать непредсказуемых, а, скорее всего,
весьма печальных, последствий для человечества такого
трансгеноза.
Нет, однако,сомнений в том, что, если конец ХХ-го века
ознаменован расшифровкой молекулярной структуры генома чело-
века, то век XXI прославится выяснением его функций на уров-
не отдельных генов, генных сообществ, хромосом , также всего
генома вцелом в контролировании процессов онто- и филогене-
за.
Молодым людям, вступающим в ХХI век, необходимо знать,
4на каком этапе 0находится наука 4о структуре и функциях 0геном 4а
человека. Это важно не только с сугубо утилитарных, меди-
цинских позиций (хотя и этот аспект крайне важен), но и с
позиций общечеловеческих. Ибо всякое эпохальное открытие на-
уки (а именно таковым и является расшифровка генома челове-
ка) до недавнего времени использовалось не только во благо,
но и во вред человечеству ( 4п 0ечальный пример тому - открытие
расщепления ядра урана, породившее атомную бомбу). Неразум-
ные эксперименты с геномом человека могут привести к еще бо-
лее страшным последствиям. Уберечь генофонд человечества,
всячески оберегая его от рискованных вмешательств, и при
этом извлечь максимальную выгоду из уже полученной бесценной
информации в плане диагностики, профилактики и лечения мно-
гих тысяч наследственно обусловленных недугов - вот задача,
которую необходимо решать уже сегодня 4и 0с которой мы прийдем
в новый XXI век !
ГЛАВА IX.
ГЕННАЯ ТЕРАПИЯ.
Раздел 9.1 Определение, историческая справка, програм-
мы генной терапии.
В широком смысле слова генная терапия означает лечение
путем введения в ткани или в клетки пациента смысловых пос-
ледовательностей ДНК. Первоначально генная терапия рассмат-
ривалась как возможность исправления дефекта в гене. Счита-
лось, что основным обьектом для такого лечения будут служить
моногенные наследственные заболевания человека, причем тео-
ретически представлялась вероятной коррекция генного дефекта
как на соматическом уровне, так и на уровне зародышевых (по-
ловых) клеток. Многочисленные эксперименты по созданию
трансгенных животных, начатые после 1980 г., а также на
культурах клеток внесли существенные коррективы в эти теоре-
тические представления. Во-первых, оказалось значительно
проще исправлять не сам дефект в гене, то есть заменять весь
мутантный ген или его мутированный фрагмент на нормальный, а
вести коррекцию путем введения в организм пациента полноцен-
но работающего гена (обычно его кДНК). Во-вторых, несмотря
на решающие успехи генной инженерии последних лет, исследо-
вания по геннной терапии у человека осуществляются исключи-
тельно на соматических тканях, в которых в норме происходит
экспрессия дефектного гена. Генная терапия на уровне половых
и зародышевых клеток человека ввиду возможных серьезных пос-
ледствий для генофонда человечества представляются весьма
проблематичной и на данном этапе наших знаний - малореаль-
ной. И наконец, в-третьих, уже разработанная и применяемая
на практике методология генной терапии оказалась пригодной
для лечения не только моногенных наследственных заболеваний,
но и таких широко распространенных болезней, какими являются
злокачественные опухоли, многие виды тяжелых вирусных инфек-
ций, включая спид, сердечно-сосудистые и другие заболевания.
Учитывая эти обстоятельства, генную терапию на современном
этапе можно определить как лечение наследственных, онкологи-
ческих, некоторых инфекционных (вирусных) и других заболева-
ний путем введения генов в клетки пациентов с целью направ-
ленного изменения генных дефектов, либо придания клеткам но-
вых функций (Culver, 1994). Первые клинические испытания ме-
тодов генной терапии были предприняты 22 мая 1989г. с целью
генетического маркирования опухоль-инфильтрующих лимфоцитов
в случае прогрессирующей меланомы. Маркированные прокариоти-
ческим геном neo, Т-лимфоциты были устойчивы к неомицину и
могли быть легко отселектированы в культуре, что позволило
детально проследить их судьбу в кровотоке и избирательное
накопление в опухолях (подробней см. 9.5).
Первым моногенным наследственным заболеванием, в отно-
шении которого были применены методы генной терапии, оказал-
ся наследственный иммуннодефицит, обусловленный мутацией в
гене аденозин-дезаминазы. 14 сентября 1990г.в Бетезде (США)
4-х летней девочке, страдающей этим достаточно редким забо-
леванием (1 : 100 000), были пересажены ее собственные лим-
фоциты, предварительно трансформированные ex vivo геном ADA
(ген ADA + ген neo + ретровирусный вектор). Лечебный эффект
наблюдался в течение нескольких месяцев, после чего процеду-
ра была повторена с интервалом 3-5 месяцев (Anderson, 1992;
Culver, 1994). В течение 3-х лет терапии в общей сложности
проведено 23 внутривенных трансфузии ADA-трансформированных
Т-лифоцитов без видимых неблагоприятных эффектов. В резуль-
тате лечения состояние пациентки (Ашанти В. ДеСильва) нас-
только улучшилось, что она смогла вести нормальный образ
жизни и не бояться случайных инфекций. Столь же успешным
оказалось и лечение второй пациентки с этим заболеванием
(подробней см. раздел 9.5). В настоящее время клинические
испытания генной терапии этого заболевания проводятся в Ита-
лии, Франции, Великобритании и Японии.
Другие моногенные наследственные заболевания, в отноше-
нии которых уже имеются официально разрешенные протоколы и
начаты клинические испытания, касаются семейной гиперхолес-
теринемии (1992); муковисцидоза (1993); гемофилии В (1992);
болезни Гоше (1993). В отношении многих других заболеваний
медицинские протоколы клинических испытаний находятся в ста-
дии утверждения (см. раздел 9.5.). К 1993г. только в США к
клиническим испытаниям генно-инженерных конструкций на чело-
веке было допущено 53 проекта (Culver, 1994). К 1995г. в ми-
ре число таких проектов возросло до 100 и более 400 пациен-
тов было непосредственно вовлечено в эти исследования (Hodg-
son, 1995). Подавляющее большинство таких проектов (86) ка-
салось лечения онкологических заболеваний, а также спида.
Таким образом, от опытов на животных и теоретических
построений 80-х годов уже в 1990 году удалось приступить к
реальному лечению моногенных заболеваний, число которых
стремительно нарастает. Естественно, что подобные революци-
онные перемены могли возникнуть только в результате решающих
успехов молекулярной биологии в картировании генов, мутации
которых приводят к наследственным заболеваниям (см.Главу
III), выяснении молекулярной природы этих мутаций (см.Главу
IV), успехов в секвенировании и клонировании генов (см.Главы
I и II), создании генно-инженерных конструкций (см.Главу
II), отработки и совершенствования методов их доставки